冰城寿离体培养与植株再生

胡松梅

摘 要 以冰城寿的花梗为外植体进行离体培养植株再生研究，结果表明：中段花梗最易形成愈伤组织并分化成苗。初代培养的最佳培养基为MS+1 mg/L6-BA+1 mg/LKT+0.2 mg/LNAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂，可诱导少量愈伤，也可直接诱导丛生芽。丛生芽增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L6-BA+0.5mg/LKT+0.2 mg/LNAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂。丛生芽壮苗的最佳培养基为MS+0.5 mg/LNAA+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L 蔗糖+7 g/L琼脂。

关键词 冰城寿；花梗培养；植株再生

中图分类号：Q943.1 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.18.062

冰城寿是磨面寿的变异品种，为十二卷属多肉植物变异三杰之一，近年来深受花卉市场的欢迎。冰城寿叶插易返祖，失去应有观赏价值，且叶插繁殖率低，生长速度慢，不适宜大规模生产[1-3]。本试验对其花梗进行离体培养与植株再生研究，旨在探索适于冰城寿组织培养的最佳条件，为其快速繁殖研究奠定基础。

1 材料与方法

取冰城寿刚开一朵花的花梗为外植体，常规消毒灭菌后，将花梗切成约2 cm的小段，每段尽量保留两个花梗芽。将花梗接种至初代培养基中后，45 d时记录诱导率。将诱导出的芽转入继代培养基中进行增殖，45 d后观察统计丛生芽的增殖及生长状况。选取高1 cm以上的丛生芽转入壮苗培养基中，60d后观察统计苗的生长状况。

诱导、增殖和壮苗基本培养基为MS，所有培养基均附加30 g/L蔗糖，7g/L琼脂，pH 5.8～6.0。诱导每瓶接1 个茎段、增殖和壮苗每瓶接6个，3次重复。培养温度为23～25 ℃，光照时间为12 h/d，诱导前期暗培养，后期光照强度为2000 Lx[4]。

各阶段培养基植物生长调节剂的浓度设计如下：（单位为mg/L，以下皆同）

2 结果与分析

2.1 不同植物生长调节剂组合对冰城寿茎段诱导成苗的影响

将花梗分成上、中、下三段，分别接入诱导培养基中。试验发现，花梗上端褐化严重，易形成愈伤，下端组织老化，诱导率低，居中花梗段既可形成愈伤，也可以直接出苗（见图1），花梗上的愈伤不转接60 d后可形成丛生芽。不同植物生长调节剂组合对冰城寿茎段诱导成苗的影响见表1。

茎段在不同培养基中培养10 d左右，1、2号培养基中的茎段切口处膨大，出现淡黄色愈伤组织，愈伤组织松散，水渍状，45 d后转接到同种培养基中容易褐化死亡。此种愈伤组织接种于分化培养基中，未能分化成芽。3、4号培养基中茎段先产生少量愈伤组织，愈伤组织鲜绿坚硬，转接到分化培养基中可分化成芽，如不转接，60 d后也会部分分化成芽。有些茎段直接在花梗芽处形成丛生芽。

2.2 不同植物生长调节剂组合对冰城寿丛生芽增殖的影响

4种植物生长调节剂组合均能促进冰城寿不定芽的增殖（见图2）。6-BA浓度越高，增殖速度越快，累积5代以后玻璃化程度增加，苗瘦弱，壮苗时间延长。6-BA浓度低，苗壮实增殖速度慢。一年多的丛生芽增殖试验表明，前3代的最佳培养基为MS+0.5 mg/L6-BA+0.5 mg/LKT+

0.1 mg/LNAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂，以后继代培养逐步降低细胞分裂素浓度，加入活性炭，减少玻璃化。

2.3 不同植物生长调节剂组合对冰城寿丛生芽壮苗的影响

因多数多肉植物易生根，组培苗生根后要去掉根系再移栽，故只研究培养基对丛生芽壮苗的影响。将1 cm左右小苗转入壮苗培养基中，45 d后不同植物生长调节剂组合对冰城寿丛生芽的影响见表2。

1、2号培养基植株矮化，根系生长迅速，40 d粗壮膨大似萝卜状，培养基消耗速度快，但植株叶片皱褶变异，变短变宽，严重影响观赏价值。2号培养基植株正常，叶片短而宽，叶色鲜绿（见图3和图4）。4号培养基植株叶片狭长，叶片数量少，不符合多肉植物矮壮厚的审美要求。

3 结果与讨论

试验结果表明：以冰城寿的花梗为外植体进行离体培养植株再生，中段花梗最易形成愈伤组织并分化成苗。初代培养最佳培养基为MS+1 mg/L6-BA+1 mg/LKT

+0.2 mg/LNAA+30 g/L蔗糖+7 g/L瓊脂，可诱导少量愈伤，也可直接诱导丛生芽。丛生芽增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L6-BA+0.5 mg/LKT+0.1 mg/LNAA+

30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂。丛生芽壮苗的最佳培养基为MS+0.5 mg/LNAA+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂。

6-BA对冰城寿的增殖和愈伤组织的玻璃化有明显的促进作用。试验发现，愈伤组织增殖中玻璃化严重，如降低6-BA浓度、适量加入KT，可减少玻璃化，但以花梗诱导和丛生芽增殖共8个培养基配方进行试验，愈伤组织分化效果不佳，玻璃化严重，分化成苗率极低，需进一步研究愈伤组织的最佳分化培养基配方。

NAA对冰城寿的植株矮化和生根效果显著[5]。试验发现，NAA浓度1mg/L以上植株开始矮化，浓度越高，叶片越畸形，根系越粗壮。

参考文献

[1]张爽，梁本国，万群.植物组织培养实用技术[M].武汉：华中科技出版社，2013.

[2]孙涛，金蕊，李德森.康平寿的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学通讯，2003，39（3）：232.

[3]左志宇，李建希，安晓云，等.克里克特寿的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学通讯，2007，43（2）：311-313.

[4]张昊鹏，宋晓涛，张耀，等.白银寿的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学通讯，2008，44（5）：951-952.

[5]陈红刚，高素芳，杨韬.玉露的组织培养与快速扩繁[J].北方园艺，2011（12）：101-102.

（责任编辑：赵中正）endprint