血清γ干扰素诱导蛋白16水平与子痫前期发病的相关性研究

张 展，王会平，石 瑛，袁恩武，张琳琳

(1.郑州大学第三附属医院检验科，郑州 450052；2.商丘医学高等专科学校，河南商丘 476100)

血清γ干扰素诱导蛋白16水平与子痫前期发病的相关性研究

张 展1,2，王会平1，石 瑛1，袁恩武1，张琳琳1

(1.郑州大学第三附属医院检验科，郑州 450052；2.商丘医学高等专科学校，河南商丘 476100)

目的 探讨人γ干扰素诱导蛋白16(IFI16)在子痫前期患者血清中的水平及其与子痫前期发病的相关性。方法 选取2015年8月到2016年3月在郑州大学第三附属医院就诊的子痫前期孕妇45例为子痫前期组，同期进行常规孕期检查的30例健康孕妇为对照组。采用全自动生化分析仪检测血清中尿素氮、尿酸、肌酐等生化指标；采用ELISA方法检测血清中IFI16和内皮素-1(ET-1)的水平，并对血清IFI16水平与各检测指标之间的相关性进行分析；受试者工作特征(ROC)曲线用于评判血清IFI16水平在预测子痫前期疾病中的价值。结果 IFI16和ET-1在子痫前期组孕妇血清中的水平明显高于对照组(P<0.01)；重度子痫前期孕妇血清IFI16水平高于轻度子痫前期孕妇(P<0.01)。子痫前期孕妇血清中IFI16水平与收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量和血清ET-1水平呈明显正相关，与血清清蛋白水平呈负相关。以血清IFI16水平为14.47 ng/mL和17.09 ng/mL作为预测子痫前期及鉴别轻度子痫前期和重度子痫前期的临界值时具有较高的灵敏度和特异性。结论 孕妇血清中高水平的IFI16与子痫前期的发病具有一定相关性，并有可能成为预测子痫前期发生的新的生物学指标。

先兆子痫；γ干扰素诱导蛋白16；内皮素-1

子痫前期是妊娠期特有的疾病，以妊娠20周以后新发的持续性血压升高并伴有明显蛋白尿为主要特征，严重影响母婴健康，是导致孕产妇和围生儿死亡的主要原因之一。子痫前期发病的中心环节是母体全身弥漫性内皮细胞的激活和(或)损伤。人γ干扰素诱导蛋白16(interferon-inducible protein 16，IFI16)属HIN-200家族成员之一，早期研究认为，IFI16主要存在于上皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞和造血细胞的细胞质或细胞核内[1]。近来研究表明，在一些因素刺激下，IFI16的定位可由细胞内转移到细胞外[2-3]。有研究在自身免疫性疾病患者血清中检测到IFI16的存在，且血清中高水平的IFI16可能与内皮细胞损伤有关[4-5]。最近研究发现，IFI16也可表达于子痫前期患者胎盘组织中[6]，然而，关于IFI16是否存在子痫前期患者血清中国内外尚未见报道。本研究主要通过检测IFI16在健康孕妇和子痫前期孕妇血清中的水平及子痫前期孕妇血清IFI16水平与血压、尿蛋白、内皮素-1(Endothelin-1，ET-1)等和内皮损伤有关的血清学指标之间的相关性，探讨IFI16是否与子痫前期的发病有关。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年8月到2016年3月在郑州大学第三附属医院就诊的子痫前期孕妇45例(轻度12例，重度33例)为子痫前期组，同期进行常规孕期检查的30例健康孕妇为对照组。子痫前期的分类及诊断标准参照《妇产科学》(第8版)。子痫前期组平均年龄(33±6)岁，平均采血孕周(34±3)周；对照组平均年龄(32±4)岁，平均采血孕周(35±1)周，两组孕妇年龄和采血孕周相比差异均无统计学意义(P>0.05)。两组孕妇均为单胎，孕前均无高血压、糖尿病、肾病、自身免疫性疾病、血管性疾病、肿瘤、炎症，无烟酒等不良嗜好，无肝炎等传染病史。本研究经医院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 标本收集与处理 采集子痫前期组和对照组孕妇清晨空腹外周静脉全血4 mL，室温自然凝固30 min后3 000 r/min离心10 min，无溶血后取上层血清置于-80 ℃冰箱中保存待测；用含甲苯防腐剂的无菌带盖容器收集24 h尿液标本，标本送检后立即进行24 h尿蛋白量的检测。

1.2.2 相关临床指标的检测 用全自动生化分析仪BECKMAN COULTER AU5400检测血清中总蛋白、清蛋白、尿素氮、尿酸、肌酐、胱抑素C、β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、乳酸脱氢酶和24 h尿蛋白水平。

1.2.3 血清中IFI16和ET-1的水平 采用ELISA试剂盒(上海酶联)检测孕妇血清中IFI16和ET-1的水平，操作按照说明书进行。每例样本设3个复孔，所有标本均为同批检测。

2 结 果

2.1 两组孕妇相关临床指标的比较 子痫前期组孕妇收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量、尿素氮、尿酸、肌酐、β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、胱抑素C、乳酸脱氢酶均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；子痫前期组孕妇总蛋白、清蛋白均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 相关临床指标在两组孕妇中的比较

2.2 两组孕妇血清中IFI16和ET-1水平的比较 IFI16在子痫前期组孕妇血清中的水平为(17.9±2.6)ng/mL，高于对照组的(11.2±1.4)ng/mL，差异有统计学意义(P<0.01)；ET-1在子痫前期组孕妇血清中的水平为(41.6±9.3)ng/L，明显高于对照组的(11.0±4.9)ng/L，差异有统计学意义(P<0.01)。轻度子痫前期孕妇和重度子痫前期孕妇血清中IFI16的水平分别为(15.7±2.3)ng/mL和(18.6±2.4)ng/mL，差异有统计学意义(P<0.01)。

2.3 子痫前期孕妇血清IFI16水平与各检测指标之间的相关性 子痫前期孕妇血清中IFI16水平与孕妇收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量和血清ET-1水平呈正相关，与血清清蛋白水平呈负相关；与尿素氮、尿酸、肌酐、胱抑素C、β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、乳酸脱氢酶无明显相关性。见表2。

表2 子痫前期孕妇血清IFI16水平与各检测指标的相关性分析结果

2.4 血清IFI16在预测子痫前期中的价值 ROC曲线分析表明，当血清IFI16浓度为14.47 ng/mL时，预测子痫前期的灵敏度和特异性最高，分别为90%和88.89%，ROC曲线下面积为0.958；当以17.09 ng/mL作为鉴别轻度子痫前期和重度子痫前期的临界值时，其灵敏度和特异性最高，分别为84.85%和83.33%，ROC曲线下面积为0.841。见图1。

A:血清IFI16水平在鉴别子痫前期患者和健康孕妇时的灵敏度和特异性；B:血清IFI16浓度在区分轻度子痫前期患者和重度子痫前期患者时的灵敏度和特异性

图1 血清IFI16在诊断子痫前期时的ROC曲线

3 讨 论

内皮细胞损伤是子痫前期发病的中心环节。然而，到目前为止，子痫前期中内皮细胞损伤的确切机制仍不清楚，但来自子痫前期孕妇胎盘组织的“毒性因子”被认为在引发内皮细胞损伤中发挥了重要作用[7-8]。研究表明，内皮细胞中过表达的IFI16可以抑制细胞增殖、迁移、细胞周期的进展及损害血管形成[9]。在病毒来源的DNA或紫外线照射等因素刺激下，IFI16的定位可由胞内移至胞外[2-3]，且血清中高水平的IFI16可能参与了内皮细胞损伤[4-5]，由此可见，IFI16可能是血管性疾病中的一个重要调控分子。最近研究发现，IFI16蛋白也可表达于滋养细胞系中，并且在子痫前期孕妇胎盘组织中的免疫活性和蛋白水平明显升高[6,10]，但有关IFI16在子痫前期患者血清中水平的研究目前尚未见报道。本研究结果表明，IFI16在子痫前期孕妇血清中的水平高于健康孕妇，且与疾病的严重程度有关，说明IFI16可能与子痫前期的发病有关。

肾脏主要由一团毛细血管网组成，含大量的血管内皮细胞，当肾脏损伤时，会导致外周血中尿素氮、尿酸、肌酐等反映肾功能的血清学指标发生改变。ET-1主要存在于血管内皮细胞，当内皮细胞受到刺激或损伤时大量合成和释放，是内皮细胞激活和(或)损伤的血清学指标之一。因此笔者通过检测这些指标在子痫前期孕妇外周血中的变化及血清IFI16与这些指标的相关性，探讨子痫前期孕妇血清IFI16是否与血管内皮细胞损伤有关。本研究发现，这些指标在子痫前期孕妇外周血中明显改变，且子痫前期孕妇血清IFI16水平与收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量、ET-1呈正相关，与血清清蛋白呈负相关，提示血清中高水平的IFI16可能通过损伤血管内皮细胞参与了子痫前期的发病。研究表明，氧化应激和各种炎性因子可以促使IFI16表达上调[11-12]。众所周知，子痫前期胎盘组织处于强氧化应激和高炎性反应状态，推测胎盘组织中强氧化应激和高炎性反应状态导致IFI16表达升高，高表达的IFI16在一些因素刺激下作为胎盘来源的“毒性因子”释放进入母体血液循环，导致外周血中IFI16水平升高并激活和(或)损伤血管内皮细胞，从而引起肾脏毛细血管损伤，肾小球滤过功能下降，与肾功能相关的血清学指标发生改变。另外，内皮细胞损伤还会导致ET-1水平合成与释放，加重血管痉挛，形成恶性循环，进一步促进子痫前期的发展，诱发高血压、蛋白尿及其他临床症状的发生。ROC曲线分析表明，适当的血清IFI16水平在预测子痫前期及鉴别轻度子痫前期和重度子痫前期中具有一定的意义。

本研究结果表明，IFI16在子痫前期孕妇血清中明显升高，与疾病的严重程度具有一定相关性，可能作为潜在的胎盘来源的“毒性因子”通过损伤血管内皮细胞参与子痫前期的发病，并且血清IFI16水平有可能成为预测子痫前期发生的新的生物学指标。鉴于目前有关IFI16在子痫前期发病中的研究较少，未来仍需进一步的研究，从而为疾病的早期预测、诊断及治疗提供新的思路和方法。

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[2]Costa S,Borgogna C,Mondini M,et al.Redistribution of the nuclear protein IFI16 into the cytoplasm of ultraviolet B-exposed keratinocytes as a mechanism of autoantigen processing[J].Br J Dermatol,2011,164(2):282-290.

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Correlation of serum interferon-inducible protein 16 level with pathogenesis of preeclampsia

ZhangZhan1,2，WangHuiping1，ShiYing1，YuanEnwu1，ZhangLinlin1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,ThirdAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou,Henan450052,China;2.ShangqiuMedicalCollege,Shangqiu,Henan476100，China)

Objective To investigate serum interferon-inducible protein 16 (IFI16) level in the patients with preeclampsia (PE) and its correlation with PE pathogenesis.Methods Forty-five PE pregnant women in the Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University from August 2015 to March 2016 were selected as the PE group and contemporaneous 30 healthy pregnant women undergoing the routine pregnant examination were selected as the control group.The biochemical indexes of serum urea,uric acid,creatinine,etc.were detected by using the automatic biochemical analyzer.The serum levels of IFI16 and ET-1 were measured by ELISA.Then the correlations between serum IFI16 level with these detected indicators were analyzed.The receiver operating characteristic (ROC) curve analysis was performed to evaluate the value of serum IFI16 for predicting PE disease.Results The serum IFI16 and ET-1 levels in the PE group were significantly higher than those in the control group (P<0.01).Furthermore the serum IFI16 level in severe PE was significantly higher than that in mild PE (P<0.01).Serum IFI16 level in PE was positively correlated with systolic blood pressure,diastolic blood pressure,24-h urine protein quantitation and serum ET-1 level,and negatively correlated with serum albumin.Serum IFI16 levels 14.47 ng/mL and 17.09 ng/mL as the critical values for predicting preeclampsia and discriminating between mild preeclampsia and severe preeclampsia has a higher sensitivity and specificity.Conclusion The high level of serum IFI16 in pregnant women has a certain correlation with PE pathogenesis and may be a novel biomarker for predicting PE occurrence.

preeclampsia；interferon-inducible protein 16；endothelium-1

张展(1959-)，教授，博士，主要从事生殖医学、子痫前期、多囊卵巢、不孕等研究。

��·临床研究

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.20.012

R714.244

A

1671-8348(2017)20-2774-03

2017-02-13

2017-04-13)