40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂高效液相色谱分析

覃华全杨春燕蔡凤英

(1.珠海真绿色技术有限公司,广东 珠海 519000 ; 2.广东植物龙生物技术股份有限公司， 广东 珠海 519000)

40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂高效液相色谱分析

覃华全1杨春燕2蔡凤英2

(1.珠海真绿色技术有限公司,广东 珠海 519000 ; 2.广东植物龙生物技术股份有限公司， 广东 珠海 519000)

本文采用简易便捷高效液相色谱法分析方法，对40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂复配制剂进行定量定性分析，使用C18反相柱和紫外可变波长检测器，以甲醇-水为流动相，用外标法对有效成分进行分析定量。配制一系列浓度己唑醇(甲基硫菌灵)标准溶液，以己唑醇(甲基硫菌灵)标准溶液的浓度为横坐标，以己唑醇(甲基硫菌灵)峰面积作为纵坐标，绘制标准曲线，相关系数r均为0.999。标准偏差分别为0.19、0.055，变异系数分别为0.54%、1.06%，平均回收率分别为100%、100.2%。

甲基硫菌灵；己唑醇；高效液相色谱；分析

甲基硫菌灵(thiophanate-methyl)和己唑醇(hexaconazole)均为广谱性低毒杀菌剂，对防治白粉病，锈病等都有良好的效果，经过大量的药效证明，二者复配做成悬浮剂后，速效性和防御性能得到大大提高，具有很好的市场潜力。目前上末见公开报道有关这两个成分复配后的分析方法报道。[1-3]

所以经过大量实验后，本文提出采用反相高效液相色谱法，采用常规C18柱和紫外可变波长检测器，对有效成分进行分析和定量。这个方法既简便又快速，适用于生产厂家对于产品质量检测分析或者检验机构对产品检验。[4]

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

安捷伦1120型高效液相色谱仪，具有紫外可变波长的检测器。

甲醇色谱纯；水为新蒸二次蒸馏水；甲基硫菌灵：纯度≥98.0，己唑醇：纯度≥98.0(中国农业大学学院)；40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂(广东植物龙生物技术股份有限公司研制)。

1.2 色谱条件

色谱柱：Agilent SB-C18 250mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，粒径5µm；检测器波长：210nm，流动相：甲醇∶水 = 85∶15(v/v)；流速：1.0mL/min；进样体积：10µL；柱温：室温；保留时间：甲基硫菌灵约2.8min，己唑醇约 5.2min。

1.3 溶液配制

1.3.1 标准溶液配制

称取己唑醇标准品0.01g(精确到0.0002g)和甲基硫菌灵标准品0.07g(精确到0.0002g)，置于同一个25mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。分别移取上述溶液1mL同一个10mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。

1.3.2 试样溶液配制

称取40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂0.2g(精确到0.0002g)，置于25ml容量瓶中，先加3mL水稀释，再用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。移取上述溶液1.0mL于10mL容量瓶，用流动相稀释至刻度，摇匀，经0.22µm滤膜过滤，清液待用。

1.4 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，待相邻两针响应值变化小于1.2%时，按照标样溶液，试样溶液，试样溶液，标样溶液的顺序进行测定。典型的40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂色谱图分别见图1。

图1 40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂的高效液相色谱图

1.5 计算

将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中己唑醇(甲基硫菌灵)的峰面积分别进行平均。己唑醇的质量分数X(%)按下式计算。

式中：A1为标样溶液中己唑醇(甲基硫菌灵)的峰面积的平均值；A2为试样溶液中己唑醇(甲基硫菌灵)的峰面积的平均值；m1为己唑醇(甲基硫菌灵)标样的质量(g)；m2为试样的质量(g)；ω为标样己唑醇(甲基硫菌灵)的质量分数，数值以%表示。

2 结果与讨论

2.1 线性相关曲线

称取己唑醇(99.0%)标准品0.0725g于25mL容量瓶中，甲醇溶解定容，分别吸取0.05mL、0.08mL、0.1mL、0.12mL、0.15mL于10mL容量瓶中，流动相溶解定容。称取甲基硫菌灵(99.0%)标准品0.0514g于另一25mL容量瓶中，甲醇溶解定容分别吸取0.5mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.5mL于上述10mL容量瓶中，流动相溶解定容。按照4.3.4测定方法，以己唑醇(甲基硫菌灵)标准溶液的浓度(µg/mL)为横坐标，以己唑醇(甲基硫菌灵)峰面积作为纵坐标，绘制标准曲线。得到己唑醇线性方程为y=-1637+33835x，相关系数r为0.999，甲基硫菌灵线性方程y=-12099+60256x，相关系数r为0.999，说明该线性相关曲线中的x与y之间的线性关系是显著相关的，所建立的回归直线方程是合理的。

2.2 精密度测定

方法精密度的测定通过对同一样品进行5次平行测定，测得的己唑醇质量分数的标准偏差为0.055，变异系数为1.06%，甲基硫菌灵质量分数的标准偏差为0.19，变异系数为0.54%，由表1可知该方法精密度较高。

表1 40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂精密度测定结果

2.3 准确度测定

方法准确度的测定采用标准加入法，称取5份已测己唑醇(甲基硫菌灵)质量分数的试样，分别加入一定质量的标准样品，按上述测定方法进行测定，测得己唑醇回收率在98%～102%之间，甲基硫菌灵回收率在98%～102%之间，测定数据见表2。

表2 40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂回收率测定结果

3 结语

本文根据实际需要提出对40%甲基硫菌灵·己唑醇悬浮剂中有效成分质量分数的分析方法，从实验线性相关曲线、精密度和回收率得知，此方法具有较高可行性，并且操作简单，快捷，具有较高的实用价值。

[1]刘长令.世界农药大全:杀菌剂卷[M].北京:化学工业出版社,2006:281-282.

[2]刘长令.世界农药大全:杀菌剂卷[M].北京:化学工业出版社,2008:170-171.

[3]毕秋艳.二元杀菌剂复配增效机理初探[D].保定:河北农业大学.

[4]中国化工标准化研究所，中国标准出版社第二编辑室.农药标准汇编.通用方法[M].北京:中国标准出版社，2006:108.129,479-483.