非酒精性脂肪肝患者血清脂肪细胞因子Chemerin与IL-1β、IL-8的相关性研究

赖 敏，张仕华，晋琼玉，黄 隽，徐 静，曾洪燕，秦亚录，吴多江，葛 斌，徐 革，吴 攀

(成都市郫都区人民医院 a．消化内科;b．心内科;c．肾内科;d．检验科，四川 成都 611730)

非酒精性脂肪肝患者血清脂肪细胞因子Chemerin与IL-1β、IL-8的相关性研究

赖 敏a，张仕华a，晋琼玉a，黄 隽a，徐 静a，曾洪燕b，秦亚录b，吴多江c，葛 斌d，徐 革d，吴 攀a

(成都市郫都区人民医院 a．消化内科;b．心内科;c．肾内科;d．检验科，四川 成都 611730)

目的 探讨非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者血清中脂肪细胞因子Chemerin与白介素(IL)-1β、IL-8的相关性。方法2014年1月至2015年6月我院60例NAFLD患者，同期健康体检者29例(对照组)。检测两组血清脂肪细胞因子Chemerin、IL-1β和IL-8水平，并分析其相关性。结果NAFLD组血清Chemerin、IL-1β、IL-8明显高于对照组(P＜0.05)，Chemerin与IL-1β和IL-8呈正相关(P＜0.01)。结论NAFLD患者血清脂肪因子Chemerin显著升高，且与IL-1β和IL-8密切相关。chemerin、IL-1β和IL-8可能参与了NAFLD的发生、发展。

脂肪细胞因子;chemerin;非酒精性脂肪肝;白介素-1β;白介素-8

随着人们生活方式与饮食习惯的改变，非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)的发病率逐年增加，成为慢性肝病的常见原因［1］，我国 NAFLD的患病率约为 15%［2］。研究发现，NAFLD与肥胖、胰岛素抵抗等代谢综合征密切相关［3］，存在脂肪组织和肝脏等的天然免疫功能紊乱［4］，并且可能是胰岛素抵抗并发氧化应激反应，是在首次打击的基础上，由活性氧诱导的发生在肝脏实质细胞内的炎症反应［5］。近年研究认为，脂肪组织是内分泌器官之一，能分泌多种脂肪细胞因子，包括瘦素、脂联素和抵抗素等，在能量代谢中起重要作用［6］。Chemerin是2007年被确认的一种新的脂肪细胞因子，不仅可通过自分泌或旁分泌途径调节脂肪细胞代谢，还具有促炎作用，与肥胖和代谢综合征等密切相关。本研究探讨 NAFLD患者血清Chemerin水平的变化及其与IL-1β和IL-8的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择我院消化内科2014年1月至2015年6月住院治疗的NAFLD患者60例(NAFLD组)，其中非酒精性脂肪性肝炎21例，非酒精性单纯性脂肪肝39例，均符合2010年中华医学会肝病分会非酒精性脂肪性肝病诊断标准［7］。其中男34例，女26例，年龄(47.21±11.79)岁。排除病毒性肝炎、药物性肝炎、自身免疫性肝病、肝豆状核变性、全胃肠外营养、甲状腺功能亢进或减退、恶性肿瘤、血液系统疾病、阻塞性睡眠呼吸暂停、严重感染及心肺功能不全、多囊卵巢综合症、处于妊娠期、哺乳期及口服避孕药女性及可导致脂肪肝的其他疾病。选取同期我院健康体检者29例(对照组)，男14例，女15例，年龄(43.17±14.14)岁。两组性别、年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。所有入选患者均签署书面知情同意书。

1.2 方法两组均在清晨空腹状态下抽静脉血1管离心后，将血清放置在－80℃保存待测。采用双位点夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定人血清IL-1β、IL-8和Chemerin水平。Chemerin ELISA试剂盒购自英国Abcom公司，IL-1β和IL-8试剂盒购自美国Biotech公司，操作步骤严格按照说明书进行、采用酶标仪(上海赛默非世尔公司Mutiskan Mk3型)测定吸光度值，选定波长450 nm。

1.3 统计学方法采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用t检验;相关性分析采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清 IL-1β、IL-8和 Chemerin水平比较NAFLD患者外周血IL-1β、IL-8和Chemerin水平均高于对照组(P＜0.05)，见表1。

表1 两组血清IL-1β、IL-8和Chemerin水平比较

2.2 血清Chemerin与IL-1β和IL-8水平的相关性 NAFLD患者血清Chemerin与IL-1β和IL-8水平均呈正相关(r分别为0.836、0.766，P＜0.01)。

3 讨论

NAFLD是一种与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关的代谢应激性肝脏损伤，疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝(Nonalcoholic simple fatty liver，NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic fatty hepatitis，NASH)及其相关肝硬化和肝细胞癌，其中定居于肝内的巨噬细胞即Kupffer细胞在其发病机制中起重要作用。游离脂肪酸高度氧化增加氧自由基的形成，进一步导致脂质过氧化和线粒体的功能紊乱，进而导致细胞因子(主要包括肿瘤坏死因子、IL-6、IL-8、IL-10和C反应蛋白等)的释放和肝细胞损伤。炎症的持续存在则激活肝脏星状细胞，还包括其它细胞的活动，如I型胶原和IV型胶原细胞的沉积，从而启动肝脏纤维增生，形成肝纤维化。进展性肝纤维化及持续炎症坏死可导致肝小叶结构改建，最终形成肝硬化。因此炎症在整个NAFLD的发生和发展中起到重要作用。

Chemerin是新发现的脂肪细胞因子之一，以前体蛋白Proehemerin形式分泌，经丝氨酸蛋白酶水解激活后具有活性，中性粒细胞、凝血纤溶系统和炎症级联反应中的凝血因子Ⅻa、Ⅶa、纤溶酶、尿激酶、纤维蛋白溶酶原激活物(t-PA)、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等均可激活 Chemerin［8］。Chemerin在人体的多种组织广泛表达，在脂肪组织、肾上腺、肝脏、肺、胰腺、胎盘、卵巢、皮肤等都有表达，其中主要表达于白色脂肪组织、肝脏和肺。

有研究发现Chemerin血清浓度与炎症介质高敏C 反应蛋白、IL-6，TNF-a呈正相关［9］;另一研究也证实在小鼠脂肪细胞成熟过程中，chemerin和chemR23的表达显著升高，并且在高脂饮食喂养的小鼠中二者表达水平上调［10］。还有研究者［11］通过对胆碱-蛋氨酸缺乏饲料(MCD)诱导NAFLD不同时期大鼠肝脏Chemerin及其受体表达的动态变化研究发现，Chemerin及其受体的表达变化可能参与了MCD饲料诱导的NAFLD的发病过程。以上研究表明，Chemerin不仅作为脂肪细胞因子发挥作用，而且可作为趋化因子发挥趋化作用，通过旁分泌途径，使巨噬细胞向肝脏细胞募集进而释放炎性因子，导致肝脏炎性反应增强及加重胰岛素抵抗，参与NAFLD的发生。体内外的研究结果表明Chemerin可能在炎症反应的不同阶段起不同的作用，在炎症初始阶段可能发挥招募各类免疫细胞，促进炎症发生，增强免疫应答的作用;而在炎症缓解期可能加速中性粒细胞的清除，抑制巨噬细胞活化，发挥抗炎作用［12］。NAFLD最主要的病理改变为肝细胞脂肪变及炎症细胞的浸润。这些结果也提示，Chemerin可能在非酒精性脂肪性肝病的炎症过程中发挥作用［13］。

IL-1大部分来源于激活的单核/巨噬细胞，另外少部分来源于心肌细胞和淋巴细胞［14］。IL-1据其等电点不同可分为IL-1α型和IL-1β型。有研究人员发现IL-1β增加脂质的在肝细胞的沉积，调节炎症反应，肝胰岛素抵抗和纤维化，进一步表明IL-1β在肝脏炎症中起重要作用［15］。研究发现IL-1β在NAFLD外周血清中含量较正常对照组明显升高［16］。IL-8 是在 IL-1、IL-3、TNF-α、粒-巨噬细胞集落刺激因子、内毒素的刺激下由单核细胞/巨噬细胞、肿瘤细胞及血管内皮细胞等多种细胞分泌的细胞因子，有研究证实而IL-1是最重要的刺激物［17］，NAFAD患者外周血 IL-8明显升高，考虑 IL-8和NAFAD 的发病有关［18］。

Chemerin具有趋化作用，可通过与巨噬细胞表面表达的ChemerinR结合，趋化巨噬细胞和树突状淋巴细胞向炎症部位聚集，而巨噬细胞定居在肝内即为Kupffer细胞，Kupffer细胞是NAFLD氧自由基的重要来源细胞，可释放过氧化氢、一氧化氮(NO)，募集中性粒细胞和淋巴细胞等炎性反应细胞，使之在肝内聚集，诱发或加剧肝内的炎性反应［19］。同时，激活的Kuffer细胞释放炎性反应因子TNF-α、IL-1、IL-6，抑制胰岛素受体底物-1丝氨酸磷酸化，进而抑制胰岛素受体酪氨酸磷酸化，一方面使激素敏感性脂肪酶活性增强，促进周围脂肪组织分解，产生大量的游离脂肪酸，通过门静脉入肝使脂质在肝内聚积，促进肝细胞脂肪变;另一方面降低脂蛋白脂肪酶活性，减少乳糜微粒中甘油三醋的分解，导致高脂血症［20］。国外研究者［21］发现 NAFLD 患者血浆Chemerin水平明显较正常人高且NASH患者血浆中chemerin水平较NAFL患者高，表明Chemerin与炎性反应、NAFLD密切相关。此外，还有学者［22］通过研究发现病态性肥胖伴脂肪肝患者血液Chemerin水平与脂肪肝纤维化程度呈正相关，经过校正体重指数后，重度肝纤维化伴炎性反应者Chemerin水平较轻度肝纤维化伴炎性反应者明显升高，表明Chemerin还与NAFLD的纤维化密切相关。

本研究发现，NAFLD患者血清Chemerin水平显著升高，提示血清Chemerin可能是NAFLD发病的炎症因子之一。NAFLD患者血清Chemerin水平与IL-1β、IL-8密切相关，提示其升高可能与机体存在的炎症反应有一定关系，可以推测Chemerin在NAFLD炎症发病机制中的起重要作用。

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The correlation between serum levels of IL-1β，IL-8 and chemerin in patients with non-alcoholic fatty liver disease

LAI Mina，ZHANG Shi-huaa，JIN Qiong-yua，HUANG Juna，XU Jinga，ZENG Hongyanb，QIN Ya-lub，WU Duo-jiangc，GE Bind，XU Ged，WU Pana(a．Department of Gastroenterology，b．Department of Cardiology，c．Department of Nephropathy，d．Department of Clinical Laboratory，Pidu District People's Hospital，Chengdu 611730，China)

WU Pan

Objective To investigate the association of serum chemerin with interleukin-1β (IL-1β)and interleukin-8(IL-8)in patients with non-alcoholic fatty liver disease(NAFLD)．MethodsSixty NAFLD patients and 29 healthy controls from January 2014 to June 2015 in our hospital were involved in the study．Serum IL-1β，IL-8 and chemerin were measured and their relationship was analyzed．ResultsSerum levels of IL-1β，IL-8 and chemerin in the NAFLD patients were significantly higher than those in the healthy controls(P ＜ 0.05)．Linear correlation analysis showed that chemerin was positively correlated with IL-1β and IL-8(P ＜ 0.01)．Conclusion The serum fatty factor chemerin is significantly increased in patients with NAFLD，and closely related to IL-1β and IL-8．Thus，chemerin，IL-1β and IL-8 may be involved in occurrence and development of NAFLD．

Chemerin;Nonalcoholic fatty liver disease;Interleukin-1β ;Interleukin-8

R575

A

1672-6170(2017)04-0064-03

2016-10-21;

2017-01-24)

成都市卫计局科研基金资助项目(编号:2013072)

吴 攀