小青龙汤对单纯型和复合型变应性鼻炎豚鼠模型Th1/Th2失衡的影响

纪雯婷 潘利叶 刘 敏 范盎然 于 雪 胡京红

(北京中医药大学，北京，100029)

小青龙汤对单纯型和复合型变应性鼻炎豚鼠模型Th1/Th2失衡的影响

纪雯婷 潘利叶 刘 敏 范盎然 于 雪 胡京红

(北京中医药大学，北京，100029)

目的：建立单纯型和肾阳虚复合型2种不同变应性鼻炎模型，探讨小青龙汤对2种变应性鼻炎模型Th1/Th2失衡作用的异同。方法：将105只雄性豚鼠随机分7组，每组15只：空白对照组(A组)，单纯模型对照组(B1组)，小青龙汤干预单纯模型组(B2组)，息斯敏干预单纯模型组(B3组)，肾阳虚复合模型对照组(C1组)，小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组)，息斯敏干预肾阳虚复合模型组(C3组)。B1、B2、B3组进行单纯变应性鼻炎造模；C1、C2、C3组在单纯变应性鼻炎的模型上进行肾阳虚复合模型造模。造模成功后，模型组进行用药观察，记录各组局部过敏反应；ELISA法(酶联免疫吸附试验法)检测血清中IFN-γ、IL-4、IL-2和IL-10等细胞因子含量；荧光定量PCR法测脾组织中IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA、T-bet mRNA、GATA-3 mRNA等转录因子的相对含量。结果：变应性鼻炎单纯模型和肾阳虚复合模型均出现IFN-γ降低(P<0.01)，IL-4升高(P<0.01)，IFN-γ/IL-4比值降低(P<0.01)，IFN-γ mRNA降低(P<0.01)，IL-4 mRNA升高(P<0.01)，IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值降低(P<0.01),T-bet mRNA降低(P<0.01)，但可使GATA-3 mRNA升高(P<0.01)，因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对降低(P<0.01)。小青龙汤可使单纯模型IFN-γ升高(P<0.01)，IL-4降低(P<0.01)，IFN-γ/IL-4比值升高(P<0.01)；升高IFN-γ mRNA(P<0.01)，降低IL-4 mRNA(P<0.01)，使IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值升高(P<0.01)；使T-bet mRNA升高(P<0.01)，但可使GATA-3 mRNA降低(P<0.01)，从而使T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对升高(P<0.01)。小青龙汤可降低肾阳虚复合模型中IL-4的含量(P<0.01)，对IFN-γ作用不明显，升高IFN-γ/IL-4比值(P<0.01)；可使IFN-γ mRNA升高(P<0.01)，但对IL-4 mRNA变化不大，IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值升高(P<0.01)；对T-bet mRNA作用不明显，但可使GATA-3 mRNA降低(P<0.05)，因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对升高(P<0.01)。结论：小青龙通过调节IFN-γ/IL-4比值、IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值和T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值，来调节Th1/Th2平衡，对单纯变应性鼻炎模型的过敏反应的改善更为明显。

小青龙汤;Th1/Th2;变应性鼻炎

变应性鼻炎(Allergic Rhinitis，AR)全球发病近年来呈现急剧上升的趋势，临床主要表现为鼻痒、喷嚏、流涕、遇寒而犯等症。中医学者在面对人类疾病时，进行临床辨治的入手与着眼点是证候，而不仅仅是疾病，这是中医学与现代医学的不同之处，是中医学的特色，更是其优势。根据中医理论，变应性鼻炎的证候属性当为肾阳虚损、外受风寒之证。中医认为其属于“鼻鼽”范畴，小青龙汤外散寒邪、内化水饮，为临床干预变应性鼻的常用方和代表方[1-3]。在实验室研究中，我们一方面要挖掘阐明小青龙汤发挥抗过敏效应治疗过敏性鼻炎的药理机制与作用靶点，另一方面，观察评价本方疗效是否对证型具有选择性亦具有十分重要的意义。本研究拟通过观察该方对单纯型和肾阳虚复合型2种变应性鼻炎动物模型的过敏症状和调节Th1/Th2平衡的影响，评价该方对不同模型组的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 选用3～4月龄SPF级雄性豚鼠105只，体重300～350 g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。

1.1.2 试剂 卵清蛋白(OVA)，购自Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司(货号A5503)；氢氧化铝佐剂，40 mg/mL，购自北京百诺威生物科技有限公司(货号PI77161)；羟基脲片，由山西远景康业制药有限公司生产(批号20140101)；中药饮片，购自北京中医药大学国医堂；IFN-药ELISA试剂盒(SEA033Gu)、IL-4ELISA试剂盒(SEA077Gu)购于武汉优而生商贸有限公司，RNA快速提取试剂盒(74104)购于德国Qiagen公司，RNA逆转录试剂盒(K1622)购于美国Thermo Scientific公司，引物(IFN-γ mRNA，IL-4 mRNA，T-bet mRNA，GATA-3 mRNA)由生工生物工程(上海)股份有限公司设计及生产。

1.2 方法

1.2.1 分组与模型制备 将105只雄性豚鼠随机分7组，每组15只：空白对照组(A组)，单纯模型对照组(B1组)，小青龙汤干预单纯模型组(B2组)，息斯敏干预单纯模型组(B3组)，肾阳虚复合模型对照组(C1组)，小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组)，息斯敏干预肾阳虚复合模型组(C3组)。适应性饲养7 d后进行造模。

造模[4-6]与给药：单纯模型造模组(B1组、B2组、B3组):每只动物给予卵清蛋白(OVA)0.9 mg+铝佐剂0.3 mL混悬液，腹腔内注射，隔日1次，共7次。腹腔注射完成后第2天，行被动皮肤过敏试验(PCA)，确定OVA IgE抗体升高后，将OVA 8 mg+生理盐水20 μL用微量加样器滴入双侧鼻腔，每侧10 μL，1次/d，共7次激发。

造模成功后，小青龙汤干预单纯模型组(B2)给予药液0.5 mL/d，息斯敏干预单纯模型组(B3)给予息斯敏50 μg+0.5 mL生理盐水。单纯模型对照组(A组)则给予等量生理盐水。每天1次灌胃给药，共14 d。肾阳虚复合模型造模组(C1组、C2组、C3组)：在单纯模型造模的基础上，同时给予羟基脲混悬液灌胃，剂量为300 mg/kg+0.5 mL生理盐水，每天1次灌胃造模，共14 d。小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组)给予药液0.5 mL/d，息斯敏干预肾阳虚复合模型组(C3组)给予50 μg+0.5 mL生理盐水，肾阳虚复合模型对照组(C1组)给予等量生理盐水。每天1次灌胃给药，共14 d。空白对照组(A组)：造模过程与治疗过程均给予生理盐水。

1.2.2 中药汤剂制备 小青龙汤(成人常用量)：麻黄9 g、桂枝6 g、白芍9 g、细辛3 g、五味子3 g、干姜3 g、半夏9 g、甘草6 g。换算成豚鼠用量的2倍，按传统方法煎煮，并浓缩，生药浓度约2.51 g/mL。

1.2.3 观察与检测 1)动物的一般生命体征[7]:每日观察记录动物的一般外观症状，如消瘦、体重下降或生长发育缓慢，毛松、竖毛、毛发无光泽，摄食减少，自主活动减少，蜷缩，精神萎靡，呼吸急促等。以上症状出现四项为肾阳虚模型组成功。2)过敏反应行为学评分[8-9]:给卵清蛋白致敏后，动物鼻部逐渐出现擦鼻、喷嚏、流涕等过敏症状，滴鼻激发后症状明显增加。每次滴鼻后20 min内，将上述行为记录并作出评分，总分达5分者为过敏模型组成功。标准如表1。

表1 过敏反应行为评分标准

将动物麻醉后，行腹主动脉取血，然后离心取血清，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-10、IL-2、FN-γ和IL-4等细胞因子含量。剥取脾脏后，进行RNA提取、逆转录，实时荧光定量PCR检测脾组织中IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA、T-bet mRNA、GATA-3 mRNA等转录因子的相对含量。

2 结果

2.1 小青龙汤对2种模型过敏行为评分的影响 与空白对照组比较，单纯模型组(B组)和肾阳虚复合模型组(C1组)的过敏行为评分明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)。药物干预后，与空白对照组比较，各组仍存在过敏行为，但小青龙汤可以使单纯模型过敏评分降低(P<0.01)(B2组)，但对肾阳虚复合模型过敏评分无影响(P>0.05)(C2组)。2.2 小青龙汤对2种模型IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4的影响 与空白对照组比较，单纯模型对照组(B1组)和肾阳虚复合模型对照组(C1组)IFN-γ降低，IL-4升高，IFN-γ/IL-4比值降低，且差异有统计学意义(P<0.01)。

与单纯模型对照组(B1组)比较：小青龙汤干预单纯模型组(B2组)IFN-γ升高(P<0.01)，IL-4降低(P<0.01)，IFN-γ/IL-4的比值升高(P<0.01)；息斯敏干预单纯模型组(B3)，IFN-γ升高(P<0.01)，IL-4降低(P<0.01)IFN-γ/IL-4的比值升高(P<0.01)。

与肾阳虚复合模型对照组(C1组)比较：小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组)IFN-γ无明显变化,IL-4降低(P<0.01)，IFN-γ/IL-4比值升高(P<0.01)；息斯敏干预单纯模型组(B3)，IFN-γ升高(P<0.01)，IL-4降低(P<0.01)IFN-γ/IL-4的比值升高(P<0.01)。见表3。

2.3 小青龙汤对2种模型IL-2与IL-10的影响 与空白组比较，其他组IL-10的含量明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)；IL-2含量无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05)。与单纯模型对照组(B1组)比较，小青龙汤干预单纯模型组(B2组)和息斯敏干预单纯模型组(B3组)的IL-10的含量无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05)。与肾阳虚复合模型对照组(C1组)比较，小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组)和息斯敏干预肾阳虚复合模型组(C3组)IL-10的含量无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表2 小青龙汤对2种模型过敏行为评分的影响±s)

注：滴鼻激发后，第5，6，7天，各组动物的过敏反应表现较稳定，比较3 d的平均评分；与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；与肾阳虚复合模型对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与单纯模型组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

表3 小青龙汤对2种模型IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；与肾阳虚复合模型对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与单纯模型组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

表4 小青龙汤对2种模型IL-2、IL-10的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；与肾阳虚复合模型对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与单纯模型组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

2.4 小青龙汤对2种模型IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA和IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA的影响 与空白组比较，单纯模型对照组(B1组)和肾阳虚复合模型对照组(C1组)IFN-γ mRNA降低，IL-4 mRNA升高，IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值降低，其差异均有统计学意义(P<0.01)。

与单纯模型对照组(B1组)比较，小青龙汤干预单纯模型组(B2组)与息斯敏干预单纯模型组(B3组)的IFN-γ mRNA均升高(P<0.01)，IL-4 mRNA均降低(P<0.01)，IFN-γ mRN/IL-4 mRNA比值均升高(P<0.01)。

与肾阳虚复合模型对照组(C1组)比较：小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组)的IFN-γ mRNA升高(P<0.01)，IL-4 mRNA变化不大，IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值升高(P<0.01)；息斯敏干预单纯模型组(B3组)IFN-γ mRNA升高(P<0.01)，IL-4 mRNA降低(P<0.01)，IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值升高(P<0.01)。见表5。

2.5 小青龙汤对2种模型T-bet mRNA、GATA-3 mRNA和T-bet mRNA/GATA-3 mRNA的比值的影响 与空白组比较，单纯模型对照组(B1组)和肾阳虚复合模型对照组(C1组)T-bet mRNA降低，GATA-3 mRNA升高，T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值降低，且差异有统计学意义(P<0.01)。

与单纯模型对照组(B1组)比较，小青龙汤干预单纯模型组(B2组)与息斯敏干预单纯模型组(B3组)T-bet mRNA升高(P<0.01)，GATA-3 mRNA均显著降低(B2组P<0.01)，T-bet mRNA/GATA-3 mRNA均比值升高(P<0.01)。

与肾阳虚复合模型对照组(C1组)比较：小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组)T-bet mRNA无明显变化，GATA-3 mRNA降低(P<0.05)，T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值升高(P<0.01)；息斯敏干预单纯模型组(B3)T-bet mRNA升高(P<0.01)，GATA-3 mRNA降低(P<0.01)，T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值升高(P<0.01)。见表6。

表5 小青龙汤对2种模型IFN-γ mRN、IL-4 mRNA及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；与肾阳虚复合模型对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01;与单纯模型组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

表6 小青龙汤对2种模型T-bet mRNA、GATA-3 mRNA及T-bet mRNA/ GATA-3 mRNA的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01；与肾阳虚复合模型对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01;与单纯模型组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。

3 讨论

变应性鼻炎以喷嚏频发、鼻塞清涕、易受寒引发并反复发作为临床主症，根据中医理论当辨为肾阳虚损、外受风寒之证[10-11]。在实际临床过程中，会由于患者个体差异或者所处病程阶段不同而表现为阳虚与感寒2个方面侧重不同。小青龙汤出自《伤寒论》，其功效为解表散寒、蠲化水饮。当变应性鼻炎发作，以风寒外束、水饮内停为临床主要证型时，小青龙汤是其常用经方[12-13]。

实验研究中，学者常采用OVA进行致敏诱导以建立变应性鼻炎模型，该模型可以表现出鼻痒鼻塞、喷嚏鼻涕等症状。从中医角度进行辨识，该模型体现其外感风寒的一面，但肾阳虚的病机特点在OVA模型中体现不突出。本研究中，我们利用OVA致敏诱发建立了单纯型变应性鼻炎模型。并在此基础上以羟基脲作为肾阳虚诱导剂建立了肾阳虚型变应性鼻炎复合模型。羟基脲是一种核苷酸还原酶抑制剂，可抑制DNA的合成，并可抑制核酸代谢，使得脂肪、蛋白质、能量代谢下降，出现一系列虚损的表现。

本研究提示，单纯模型组表现出擦鼻、喷嚏、流涕等局部过敏症状，而肾阳虚复合模型在此基础上还出现毛发枯槁疏松、堆叠，摄食及活动减少，蜷缩、消瘦，精神萎靡甚至呼吸急促，死亡等一系列症状和体征，提示肾阳虚复合过敏模型造模成功。另外，从各组过敏评分可以看出，单纯模型组鼻部过敏评分升高，而肾阳虚复合模型组过敏评分升高更为明显，表明过敏严重程度与肾阳虚之间存在相关性。2种模型动物给予小青龙汤灌胃治疗后，单纯模型组的过敏症状可以得到明显改善，而肾阳虚复合模型症状缓解并不明显。临证过程中，小青龙汤适用于变应性鼻炎外寒内饮型而非肾阳虚型，本实验结果与临床实际保持一致，为变应性鼻炎的中医辨证论治提供了科学依据。

我们进一步从Th1/Th2细胞的平衡偏移入手来挖掘相关现代药理机制。Th1/Th2细胞的平衡偏移是一系列免疫炎性反应的病理生理基础[14-15]。在变应性鼻炎的发病机制中，活化的树突状细胞分泌IL-12与IFN-γ，促进幼稚Th细胞向Th1细胞分化，表达转录因子T-bet，分泌大量IL-12与IFN-γ，形成正反馈。当Th细胞被抗原激活后，IL-4诱导幼稚Th细胞向Th2细胞分化，表达转录因子GATA-3，分泌大量IL-4，形成正反馈[16-17]。大量的炎性反应细胞和炎性反应因子进一步引发IgE合成、嗜酸性粒细胞增多、肥大细胞脱颗粒等过敏反应的产生。袁颖等[18]、王守玺等[19]认为，Th1/Th2与中医证候虚实存在相关性。

实验结果表明，小青龙汤可使单纯模型IFN-γ升高，IL-4降低，IFN-γ mRNA升高，IL-4 mRNA降低，因而IFN-γ/IL-4比值、IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值皆升高；同时，小青龙汤可以使肾阳虚复合模型IL-4降低，对IFN-γ作用不明显，IFN-γ/IL-4比值也升高；使IFN-γ mRNA升高，对IL-4 mRNA影响不大，最终IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA比值也升高。并且，小青龙汤还可以使单纯模型T-bet mRNA升高，GATA-3 mRNA降低，因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值升高；对肾阳虚复合模型组的T-bet mRNA作用不明显，可使GATA-3 mRNA降低，因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值升高。

从本研究我们可以得出，一方面，Th1细胞代表性细胞因子IFN-γ，Th2细胞代表性细胞因子以及其转录因子T-bet、GATA-3mRNA表达的影响应是小青龙汤治疗变应性鼻炎发挥抗过敏效应的重要药理学机制；另一方面，对单纯模型与复合模型2种不同模型，小青龙汤的效应确实存在差异，显然本方干预作用在单纯模型中要优于在肾阳虚复合模型中，因此，而小青龙汤药效的发挥与证型之间的相关性显而易见[20-21]。这提示我们，中医辨证论治具有一定的现代科学依据，病机与治法对应契合的程度直接影响药效的发挥，药理机制的挖掘，中医药临床所强调的辨证论治在实验研究中同样应该受到重视。阐明解释古典经方治疗现代疾病的药理机制，同样应考虑到证型这一影响因素。

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(2016-12-12收稿 责任编辑：杨觉雄)

第十四届世界中医药大会暨“一带一路”中医药文化周第二轮会议通知2017年10月*东南亚

各位专家、各位同仁：

由世界中医药学会联合会主办的世界中医药大会是全球中医药领域规模大、参与广、层次高的学术盛会。至今已在中国、法国、加拿大、新加坡、中国澳门、澳大利亚、荷兰、英国、马来西亚、美国、俄罗斯、西班牙、新西兰成功举办了十三届。第十三届世界中医药大会期间举办“一带一路”中医药文化周系列活动，为中医药在大洋洲的发展搭建了广阔的平台。

“第十四届世界中医药大会暨‘一带一路’中医药文化周”，将于2017年10月下旬在东南亚举行。活动期间，来自世界各地的中医药专家学者、政府官员、企业家将分享他们的理论研究和临床经验、科研成果和新发明新创造，大会附设中医药服务贸易展览会。活动期间将组织多种形式的学术考察调研活动。

现就有关事宜通知如下：

一、地点：泰国、柬埔寨、尼泊尔、越南

二、主题：助力一带一路，服务民众健康

三、会议安排：10月20-24日，第十四届世界中医药大会，泰国·曼谷；

10月23-27日，“一带一路”中医药文化周柬埔寨专场，吴哥；

10月24-27日，“一带一路”中医药文化周尼泊尔专场，加德满都；

10月26-29日，“一带一路”中医药文化周越南专场，胡志明；

四、会议主要议题及征文内容：

1.中医药基础理论研究；

2.中医药临床实践：临床研究方法创新与进展、临床疗效评估体系研究、老中医临证经验总结、特色疗法体会及推广、中医养生保健治未病研究等；

3.针灸推拿研究实践：针药配合临床研究、特殊针法临床经验介绍、中医针灸治疗在区域性疾病治疗中的特色与优势等；

4.中药研究：中药方剂学、临床配伍研究、中药应用及研究等；

5.中西医结合研究：理论创新、最新进展、实践创新、经验总结；

6.中医手法流派的传承与发展；

7.中医药国际标准化、信息化研究；

8.中医药在世界各国的发展及立法情况，各国中医教育动态、教育制度现状及科研情況；

9.中医药文化与非物质文化遗产保护；

10.道地药材与濒危珍稀动植物保护；

11.中医药服务贸易理论研究与实践及经验交流。

五、参会人员：

相关国家政府官员，各国中医药、传统医药、中西医结合、现代医药及相关领域从事医疗、教育、科研、管理、生产、贸易的专家学者和企业家，世界中联各国各地区会员。

六、会议安排：

1.学术会议：开、闭幕式，主题演讲，分会场专题报告，现场演示工作坊，欢迎晚宴。

2.中医药服务贸易展览会：每个展位3*3 m，1张桌子，2把座椅，1个插座，基本照明，免2人参会注册费。

3.参会者可授予中国国家级继续教育二类学分证书6分，如有需要，请提前告知大会组委会。

4.“一带一路”中医药国际交流考察：具体安排请咨询世界中联国际联络部。

七、重要日期：

2017年7月1日大会注册费优惠截止。

2017年8月31日大会论文投稿截止。

八、会议注册：

即日起接受报名，采用网上会议平台注册，网址如下：

http://wccm2017.medmeeting.org/cn

或微信扫描右侧会议平台二维码，点击“报名参会”即可。

九、会议咨询联系方式如下：

《世界中医药》杂志社：魏金明、徐晖、徐颖、王明

电子邮箱：sjzyyzz@vip.126.com，电话：010-58650236/58650023/58239055

泰国中医师总会咨询处(仅接受泰国、新加坡、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾、越南、缅甸、老挝、柬埔寨、文莱地区等东盟十国地区的参会专家报名)：

联系人：张永发、杨秀专、贾宗亢、叶峰

电子邮箱：wctcm2017@hotmail.com，电话：+66-814350636/896641681/890739192

更多会议信息，欢迎扫描右方二维码，关注世界中医药大会官方微信公众平台

世界中医药大会组委会

2017年7月12日

Different Functions of Xiaoqinglong Decoction of Regulating the Imbalance of Th1/Th2 in the Simple Type of Allergic Rhinitis Model and the Complex Type

Ji Wenting,Pan Liye,Liu Min，Fan Angran,Yu Xue,Hu Jinghong

(BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,China)

Objective:To establish the simple type of allergic rhinitis model and the complex type of kidney yang deficiency of allergic rhinitis model,and to study the different effects of Xiaoqinglong decoction on the two models of allergic rhinitis,evaluating the difference functions of correcting the imbalance of Th1/Th2.Methods:The simple type of allergic rhinitis model was induced with ovalbumin (OVA) in guinea pigs.Based on this,the complex type of kidney yang deficiency of allergic rhinitis model was established with hydroxyurea administration.Both of the two models were evaluated by observing the weight，survival state and local allergic reaction of guinea pigs,testing the contents of INF-γ,IL-4,IL-2 and IL-10 cytokine in serum by ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay),and carrying on real-time fluorescence quantitative PCR method for measuring the relative content of IFN-γ mRNA,IL-4 mRNA,T-bet mRNA and GATA-3 mRNA in spleen tissue.Results:In all models,IFN-γ was reduced,IL-4 increased and the ratio of IFN-γ/IL-4 reduced.In the simple type of allergic rhinitis model,Xiaoqinglong decoction could increase IFN-γ and reduce IL-4,increasing the ratio of IFN-γ/IL-4.As to the complex type of kidney yang deficiency of allergic rhinitis model,the effect on IFN-γ was not obvious.Xiaoqinglong decoction could reduce the IL-4 so that the ratio of IFN-γ/IL-4 of both was reduced,as well as IFN-γ mRNA and IL-4 mRNA was increased.Xiao Qinglong decoction could increase IFN-γ mRNA and decrease IL-4 mRNA in both Simple type of allergic rhinitis model and complex type of kidney yang deficiency of allergic rhinitis model,so that it made the ratio of IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA increased,and the role in simple type of allergic rhinitis model was more obvious.Both the simple type of allergic rhinitis model and the complex type of kidney yang deficiency of allergic rhinitis model were found T-bet mRNA decreased,GATA-3 mRNA increased,and the ratio of T-bet mRNA/GATA-3 mRNA decreased.Xiaoqinglong decoction could increase T-bet mRNA and reduce the GATA-3 in the simple type of allergic rhinitis model and thus the ratio of T-bet mRNA/GATA-3 mRNA was increased.In the complex type of kidney yang deficiency of allergic rhinitis model,Xiaoqinglong decoction had no obvious effect on T-bet mRNA,but it also could reduce the GATA-3 mRNA,increasing the ratio of T-bet mRNA/GATA-3 mRNA.Conclusion:Xiaoqinglong decoction can significantly improve the local allergic reaction of the simple type of allergic rhinitis model,but has relatively small effect on the complex type of kidney yang deficiency of allergic rhinitis model.Xiaoqinglong decoction regulates the balance of Th1/Th2 by increasing the ratio of IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA and T-bet mRNA/GATA-3 m RNA.Also,it has more obvious effect on the simple type of allergic rhinitis model.

Xiaoqinglong decoction; Models of allergic rhinitis; Th1/Th2; Allergic rhinitis

国家自然科学基金项目(81202728);北京中医药大学自主课题(2016-JYB-JSMS-001；2016-JYB-XS011)

纪雯婷(1990.10—)，女，在读研究生，研究方向：中医临床基础

刘敏(1978.04—)，女，博士，副教授，副主任医师，硕士研究生导师,研究方向:经方防治常见病、疑难病研究。E-mail:liumin78@126.com

R259；R289.3

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.07.039