二氢杨梅素对4种植物油脂抗氧化作用研究

石治敏, 杨丽丽, 沈天娇, 刘 梅, 赵 丽, 闵敬植， 余正文

(贵州师范大学生命科学学院，贵阳 550001)

油脂安全

二氢杨梅素对4种植物油脂抗氧化作用研究

石治敏, 杨丽丽, 沈天娇, 刘 梅, 赵 丽, 闵敬植， 余正文

(贵州师范大学生命科学学院，贵阳 550001)

研究二氢杨梅素(DMY)对植物油脂抗氧化作用。采用紫外可见分光光度计和烘箱强化贮藏法，考察DMY对DPPH自由基清除能力和对山茶油、亚麻籽油、紫苏籽油和油酸的抗氧化作用。结果表明：DMY对DPPH自由基清除能力明显高于TBHQ、BHT、BHA和TP；当抗氧化剂添加量为0.05%时，不同抗氧化剂在山茶油和油酸中抗氧化作用强弱顺序为TBHQ>DMY>BHA>BHT>TP；不同抗氧化剂在紫苏籽油和亚麻籽油中抗氧化作用强弱顺序为TBHQ>BHA>BHT>DMY>TP；DMY还能协助增强其他抗氧化剂的作用；DMY对4种植物油脂抗氧化效果强弱顺序为山茶油>油酸>亚麻籽油>紫苏籽油。

二氢杨梅素；DPPH自由基清除能力；抗氧化作用

山茶油、紫苏籽油和亚麻籽油含有大量不饱和脂肪酸且营养价值高，食用广，倍受人们青睐，特别是能补充胎儿机体生长发育所需的营养物质，统称为“月子油”[1]。食用植物油脂中不饱和脂肪酸(如油酸、亚油酸、亚麻酸等)在生产、运输、营销中都易受到氧气、光照和微生物等因素影响，使油脂发生酸败，从而降低其营养价值，影响食用[2]。添加抗氧化剂能有效减少或防止植物油脂氧化酸败。目前市场上广泛使用的抗氧化剂有BHA(丁基羟基茴香醚)、TBHQ(2-叔丁基对苯二酚)、PG(没食子酸丙酯)、BHT(2、6二叔丁基-4甲基苯酚)等，但均为人工合成。合成抗氧化剂可抑制体内代谢酶活性，过量食用会导致畸形、癌变，其安全性受到人们质疑，一些国家已经限制或禁止使用[3-6]。因此，使用安全高效天然抗氧化剂代替合成抗氧化剂成为必然。天然抗氧化剂如TP(茶多酚)、生育酚等来源于植物[7]，无毒副作用，安全性高。因此，从药食同源植物里寻找新型天然抗氧化剂已成为食品工业的一个发展趋势。

二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)属于黄酮类化合物，在显齿蛇葡萄(Ampelopsisgrossedentate)中含量高达30%以上[8]，国内外在DMY的制备及药理活性(如抗氧化、抗病毒、降三高、保肝等)方面研究较多[9-15]，而将其应用于植物油脂抗氧化作用研究报道较少[16-18]。本文以TBHQ、BHA、BHT和TP为对照，系统研究DMY对山茶油、紫苏籽油、亚麻籽油和油酸的抗氧化作用，以期为开发新型天然抗氧化剂提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 原料与试剂

二氢杨梅素(纯度>98%)，实验室自制；TBHQ、BHT、BHA和TP，北京鑫达食品添加剂有限公司；紫苏籽油和亚麻籽油，甘肃天水陇上小江南食用油坊；油酸，无锡市亚泰联合化工有限公司；山茶油，湖南新金浩茶油股份有限公司；硫酸亚铁、双氧水、冰乙酸、三氯甲烷、DPPH、可溶性淀粉、碘化钾、硫代硫酸钠、无水乙醇等，均为分析纯。

1.1.2 仪器与设备

101-2AB型电热鼓风干燥箱，天津市泰斯特仪器有限公司；分析天平(十万分之一)，梅特勒-托利多仪器有限公司；电子恒温不锈钢水浴锅，上海宜昌仪器纱筛厂；UV759CRT紫外可见分光光度计，上海佑科仪器仪表有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 DPPH自由基的清除实验

取2 mL 0.08 mg/mL 的 DPPH溶液和2mL 70%乙醇，混匀反应稳定(40 min)后，以 70%乙醇为对照，517 nm处测定吸光值(A1)；取2 mL 70%乙醇和2 mL待测样品溶液，混匀反应稳定(40 min)后，以无水乙醇为对照，517 nm 处测吸光值(A2)；取2 mL 0.08 mg/mL的DPPH溶液和2 mL 待测样品溶液，混匀反应稳定(40 min)后，以无水乙醇为对照，517 nm处测吸光值(A3)。计算不同质量浓度下的DPPH自由基清除率[19]。DPPH自由基清除率=[1-(A3-A2)/A1]×100%。

1.2.2 抗氧化性能实验

采用烘箱强化贮藏法。分别取50 g油酸、山茶油、紫苏籽油和亚麻籽油放入三角烧瓶中，按0.05%的DMY或其他抗氧化剂添加到油脂中，混合均匀，以不加抗氧化剂的油酸、山茶油、紫苏籽油和亚麻籽油为空白对照。将上述各油样放置(60±1)℃ 烘箱中强化贮藏，每24 h搅拌1次，3 d测定1次过氧化值，测定方法参照GB/T 5538—2005。

2 结果与分析

2.1 DMY与不同抗氧化剂对DPPH自由基的清除能力(见图1)

图1 DMY与不同抗氧化剂对DPPH自由基的清除能力

由图1可以看出，DMY、TBHQ、BHA、BHT和TP对DPPH自由基的清除能力均随质量浓度的增加而增加，在相同质量浓度下DMY对DPPH自由基的清除能力明显优于其他抗氧化剂。实验表明，DMY具有较强的清除DPPH自由基的能力。

2.2 DMY与不同抗氧化剂对油酸的抗氧化效果比较(见图2、图3)

图2 DMY与不同抗氧化剂对油酸的抗氧化作用

由图2可以看出，不同抗氧化剂对油酸的抗氧化作用不同，随着时间的延长过氧化值呈上升趋势，且低于对照组的；DMY在油酸中抗氧化能力接近TBHQ，而高于BHA、BHT和TP。

图3 不同增效剂对油酸的抗氧化作用

由图3可以看出，不同抗氧化剂中加入DMY能明显降低油酸的过氧化值，其抗氧化作用均大于单独使用TBHQ、BHA、BHT和TP的效果。

不同抗氧化剂对油酸的抗氧化能力从优到劣顺序为TBHQ>DMY>BHA>BHT>TP。

2.3 DMY与不同抗氧化剂对山茶油的抗氧化效果比较(见图4、图5)

图4 DMY与不同抗氧化剂对山茶油的抗氧化作用

由图4可以看出，加入等量的不同抗氧化剂及DMY，山茶油的过氧化值低于对照组的,DMY能有效抑制山茶油的氧化，且抗氧化能力高于BHA、BHT和TP，低于TBHQ。

图5 不同增效剂对山茶油的抗氧化作用

由图5可以看出，不同抗氧化剂中加入DMY的山茶油的过氧化值均小于单独使用各抗氧化剂的过氧化值。

不同抗氧化剂对山茶油的抗氧化能力从优到劣顺序为TBHQ>DMY>BHA>BHT>TP。

2.4 DMY与不同抗氧化剂对紫苏籽油的抗氧化效果比较(见图6、图7)

图6 DMY与不同抗氧化剂对紫苏籽油的抗氧化作用

由图6可以看出，加入不同抗氧化剂的紫苏籽油的过氧化值明显低于对照组的。加入DMY的紫苏籽油的过氧化值高于加入TBHQ、BHA和BHT的，但低于加入TP的。

图7 不同增效剂对紫苏籽油的抗氧作用

由图7可以看出，增效剂可提高紫苏籽油的抗氧化活性。实验数据表明DMY在紫苏籽油中抗氧化活性低于TBHQ、BHA和BHT，高于TP。

各抗氧化剂对紫苏籽油的抗氧化能力从优到劣顺序为TBHQ>BHA>BHT>DMY>TP。

2.5 DMY与不同抗氧化剂对亚麻籽油的抗氧化效果比较(见图8、图9)

图8 DMY与不同抗氧化剂对亚麻籽油的抗氧化作用

图9 不同增效剂对亚麻籽油的抗氧化作用

由图8、图9可以看出，加入不同抗氧化剂的亚麻籽油的过氧化值明显低于对照组的；增效剂能降低亚麻籽油的过氧化值。不同抗氧化剂对亚麻籽油的抗氧化能力从优到劣顺序为TBHQ>BHA>BHT>DMY>TP。

空白组油样因不添加抗氧化剂，其过氧化值随时间延长增幅明显，加入等量的抗氧化剂后，油脂的过氧化值明显低于对照组的，说明抗氧化剂的添加能有效抑制油样的氧化。DMY在不同油样中抗氧化效果不同，在油酸和山茶油中抗氧化效果与 TBHQ 相近，强于BHA、BHT和TP，在紫苏籽油和亚麻籽油中抗氧化效果强于TP，低于TBHQ、BHA和BHT。作为抗氧化剂，DMY系极性化合物，其在不同油脂中溶解度不同；而油酸和山茶油主要含油酸，亚麻籽油和紫苏籽油主要含亚麻酸，这些都可能导致DMY抗氧化活性不同。DMY在不同植物油脂中抗氧化能力从优到劣顺序为山茶油>油酸>亚麻籽油>紫苏籽油。

3 结 论

从以上分析可以看出，DMY对DPPH自由基清除能力明显优于TBHQ、BHA、BHT和TP。当抗氧化剂添加量为0.05%时，DMY的抗氧化能力始终强于TP，能明显抑制植物油脂的过氧化值增加速度，可作为植物油脂添加剂。添加量为0.025%DMY+0.025% 其他抗氧化剂(TBHQ、BHT、BHA和TP)时，抗氧化能力明显优于单独使用BHT、BHA和TP，从而减少合成抗氧化剂的使用量，降低对人体的伤害。DMY对油脂抗氧化作用强弱顺序为山茶油>油酸>亚麻籽油>紫苏籽油。因此，作为抗氧化剂，DMY最适添加于山茶油中。

[1] 张艳红. 月子餐的秘密武器[J]. 健康与营养,2014(10):90-93.

[2] 林国荣. 荷叶黄酮的分离及对油脂抗氧化的研究[J]. 粮食与油脂,2015(1):20-23.

[3] 李书国,赵文华,陈辉. 食用油脂抗氧化剂及其安全性研究进展[J]. 粮食与油脂,2006(5):34-37.

[4] VAN ESCH G J. Toxicology of tert-butylhydroquinone(TBHQ)[J]. Food Chem Toxicol,1986,24(10/11):1063-1065.

[5] 杨洋,韦小英，阮征. 国内外天然食品抗氧化剂的研究进展[J]. 食品科学,2002,23(10):137-138.

[6] 许中畅,卢晓霆. 葵盘总黄酮对油脂抗氧化作用研究[J]. 中国油脂,2016,41(2):44-47.

[7] 陈小雷,胡王,周蓓蓓，等. 天然抗氧化剂茶多酚对水产品的抗氧化研究[J]. 安徽农业科学,2016，44(1):112-114.

[8] 陈雁梅,于华忠,刘同方,等. 酶法提取藤茶茎中二氢杨梅素工艺研究[J]. 应用化工, 2016,45(2):304-307.

[9] ZHANG Z S, WANG X M, ZHAO M X, et al. Optimization of polysaccharides extraction fromClematishuchouensisTamura and its antioxidant activity[J]. Carbohydr Polym,2014,111(20):762-767.

[10] WANG Z Y,ZHOU F,QUAN Y. Antioxidant and immunological activity in vitro of polysaccharides fromPhellinusnigricansmycelia[J]. Int J Biol Macromol,2013,99(2):139-143.

[11] UVAABJAV S,SHUQIN H,KOMATA M,et al. Isolation and antiviral activity of water-solubleCynomoriumsongaricumRupr. polysaccharides[J]. J Asian Nat Prod Res,2016,18(2):159-171.

[12] NACHE-VAZQUEZ M,BALLESTEROS N,ANGELES C,et al. Dextrans produced by lactic acid bacteria exhibit antiviral and immunomodulatory activity against salmonid viruses[J]. Carbohydr Polym,2015,124:292-301.

[13] 朱雷. 发酵藤茶黄酮类化学组成及其对糖尿病大鼠血糖、血脂的影响[J]. 湖北民族学院学报(医学版),2015,32(1):4-7.

[14] 赵喜兰. 显齿蛇葡萄叶总黄酮对原发性高血压大鼠的降血压研究[J]. 营养与保健,2016，37(6):351-355.

[15] 王俊杰,舒洋,曹欣，等. 藤茶对非酒精性脂肪性肝病的治疗作用研究[J]. 中国全科医学,2011,14(20):2248-2250.

[16] N BAEK A P,NIELSON WN EIGEL,SF OKEEFE. Antioxidant properties of a dihydromyricetin-rich extract from Vine Tea(Ampelopsisgrossedentata) in menhaden oil[J]. J Bot Sci,2015,4(3):53-63.

[17] 张志坚，张晓元. 二氢杨梅素在食品中的抗氧化作用研究与应用[J]. 湖南城市学院学报(自然科学版),2008(1):49-52.

[18] YE L Y,WANG H J,DUNCAN S E,et al. Antioxidant activities of Vine Tea (Ampelopsisgrossedentata) extract and its major component dihydromyricetin in soybean oil and cooked ground beef[J]. Food Chem,2015,172:416-422.

[19] 孔琪. 显齿蛇葡萄提取物与主要黄酮类化合物及衍生物的抗菌抗氧化活性研究[D]. 贵阳：贵州师范大学，2015.

Antioxidant effects of dihydromyricetin on four plant oils

SHI Zhimin, YANG Lili, SHEN Tianjiao, LIU Mei, ZHAO Li,MIN Jingzhi, YU Zhengwen

(School of Life Sciences, Guizhou Normal University, Guiyang 550001, China)

Antioxidant effects of dihydromyricetin(DMY) on plant oils were investigated.Scavenging activity on DPPH free radical and the antioxidant activity on oil-tea camellia seed oil, linseed oil, perilla seed oil and oleic acid were evaluated by UV-visible spectrophotometry and oven strengthen storage. The results showed that the scavenging activity of DMY on DPPH free radical was significantly higher than TBHQ,BHT,BHA and TP. When the antioxidant dosage was 0.05%, the antioxidant activities of TBHQ in oil-tea camellia seed oil and oleic acid were the strongest, followed by DMY, BHA, BHT and TP, and the antioxidant activities of TBHQ in perilla seed oil and linseed oil were the strongest, followed by BHA, BHT, DMY and TP. Morever, DMY could help to enhance the role of other antioxidants. The antioxidant effect of DMY on oil-tea camellia seed oil was the best, followed by oleic acid, linseed oil and perilla seed oil.

dihydromyricetin; DPPH free radical scavenging activity; antioxidant effect

2016-12-26；

2017-01-08

国家自然科学基金(31460068); 贵州省教育厅自然科学研究项目(黔教合KY字[2015]335);贵阳市大学生创业基金项目(筑科合同[2011201]大-5号)

石治敏(1988)，女，在读硕士，研究方向为药用植物开发与利用(E-mail)1870247186@163.com。

余正文，教授，博士(E-mail)yuzhengwen2001@126.com。

TS221; TS202.3

A

1003-7969(2017)06-0089-04