分析5%葡萄糖注射液中外源性抗氧剂的测定

＊陈敏 雷翔霄 王洋 张贾亮

（常州方圆制药有限公司工程中心 江苏 213125）

分析5%葡萄糖注射液中外源性抗氧剂的测定

＊陈敏 雷翔霄 王洋 张贾亮

（常州方圆制药有限公司工程中心 江苏 213125）

利用HPLC方法对5%葡萄糖注射液内抗氧剂1010与168的含量进行检测，侧重点在于专研抗氧剂在注射液内的迁移情况。结果显示抗氧剂1010在0.61～363.66mg·L-1范畴内线性关系优良，抗氧剂168在1.21～362.66mg·L-1区间内线性关系优良。可见外源性抗氧剂在5%葡萄糖注射液中发生了迁移。

5%葡萄糖注射液；外源性抗氧剂；测定形式；线性关系

在实验研究进程中，应用的色谱柱为伊利特C18柱，流动相为乙睛一四氢呋喃一水，其流动速率1．5mL·min-1，检测波长度为276nm。具体是以三种不同的聚丙烯输液瓶为研究对象，研究结构复杂以及性质不稳定的强氧化剂是否能够与药物之间产生化学反应，以及工业抗氧化剂是否能够从外包装渗入进药液内，对抗氧化剂的渗出状况进行思考研究。

1.实验器具、试剂及样品

(1)实验器具

液相色谱仪为岛津LC 20AD型（由日本岛津生产）；电子分析天平，梅特勒XS 105型（由梅特勒一托利多仪器有限公司生产）；固相苯取柱为PEP SPE 60mg/3mL Agela Cleanert型（由安吉尔提供）。

(2)试剂与药品

抗氧剂1010，抗氧剂168（均由西格玛奥德里齐公司提供）；三批次聚丙烯输液瓶（由六安鹏诚医药包装有限公司提供），批号如下：081202、081203、081204。河南和江苏生产并提供聚丙烯输液瓶均为1批，批号如下：090301、090113；其它试剂均或分析纯或色谱纯。

2.方法

(1)对波长的检查与测量

分别量取抗氧剂1010、168适量，融入流动相配制对照品溶液，将其搁置于紫外分光光度计内对其波长进行整体化扫描，扫描结果表明上述两类抗氧剂在270-280nm区间内吸收量最大，在上述区段内吸收峰波动幅度不大，鉴于溶剂对其影响程度微小的缘故，所以将检测波长设定为276nm。

(2)系统适应性试验

量取适量抗氧剂，与流动相配置混合对照液，参照色谱条件对样，录入色谱图。继而采用单一化的对照措施，对溶液1010、168-1、168-2性质进行定位务必参照一定的规律，结果显示抗氧剂168更容易被氧化，有磷酸盐与亚磷酸盐物质出现。通过检测上述两种物质峰面积总和具有统计意义，所以本实验借助两者峰总面积进行计算。已知抗氧剂色谱峰和相邻峰之间的分离度R高于1．5，理论板数N也不小于3000。研究结果证明，依照上述因素，1010与168抗氧剂和其余成分之间能出现基线分离现象，实验过程中始终要确保供试品中抗氧剂存留时间和对照品之间的一致性，空白样品对实验结果无任何影响（见图1～3）。

图2 样品液色谱图

图3 空白色谱图

(3)供试液制备方式

葡萄糖注射液中抗氧剂的迁移量与粒料数目、瓶内抗氧剂量等因素相关联，为了对氧化剂迁移模式有一个全面的认知，对粒料与瓶内抗氧剂开展了溶液配置工作，为检测环节提供便捷性。将苯与甲醇按照2：3的比例混合洗涤烧瓶与漏斗，把洗涤液注入进滤液内至0．25L，量取0．05L对其采取烘干策略，量取等体积的四氢呋喃和乙睛混合液，将剩余物投入其中，定容到5．0 mL，应用0． 45um滤膜对其进行过滤，以备用。

对抗氧剂迁移量检测用于供试液配置环节：首先对样品事先做好处理，即用天平称取样品30．0g，对其施以捣碎举措，继而将其置于烧杯内，用400mL蒸馏水对其清洗，在25℃室温环境下待样品干燥以后，将其导入锥形瓶内，兑入200mL的5%葡萄糖溶液，将其置于高压蒸汽火菌器内，加热到125℃，维持0．5h，冷却到25℃，取出即获得样品液，对其采用均等分配，一份备用。

固相萃取处理环节中的操作要点：首先应用等量的甲醇与蒸馏水（5mL）对固相萃取柱施以活化措施，称取150mL参照上述程序配制样品液，对其在固相萃取柱流动的速度进行管控，最佳区间为2～3mL·min-1，借用5ml甲醇、4Ml四氢呋喃对其分别进行洗涤脱水处理，将最后溶液整合在一起，使等体积四氢呋喃与乙睛混合，对其进行稀释到10 ml，以备用。

(4)稳定性

抗氧剂1010峰面积（D1～D4）分别为99751、94623、95613、95798，上述数据证明抗氧剂1010在24h内稳定性优良；抗氧剂168峰面积（D1～D3）分别为66812、68977、68725，上述数据证明抗氧剂168的磷酸盐和亚磷酸盐浓度之和在24h内稳定性优良。

3.结果

(1)抗氧剂1010的线性研究

取上述对照品溶液D1～D4，按上述色谱条件注入色谱仪，记录峰面积，峰面积(X)与浓度(Y)之间存在线性回归关系，回归方程为：Y=0．000SX+2．0142(r=0．9997)。结果证明抗氧剂1010在0．61-363． 66mg区间中线性关系优良。

(2)抗氧剂168的线性研究

取上述对照品溶液D1～D3，依照以上色谱条件导入进色谱仪，记录峰面积，峰面积(X)与浓度(Y)之间存在线性回归关系，回归方程为：Y=0．0007X+1．2845(r=0．9998)。结果证明抗氧剂168在1．21～362．66mg区间内线性关系优良。

4.实验讨论

将葡萄糖注射液作为提取媒介，抗氧剂的测量结果显示，3批次粒料、5批次瓶体中测量到的抗氧剂单一含量均小于0．02%，总量数值也没有超过0．3%。其都和欧洲药典第5版（非肠道制剂及眼科制剂用容器用聚丙烯）内做出的相关规范相匹配，总量满足了小于0．3%的限度标准。

结束语

文中三个不同厂家制造的聚丙烯输液瓶内的抗氧剂比例存在差异性，总量分别为0．1%、0．2%、0．4%，尽管抗氧化剂迁移总量都不高于最低检出量，但是090301中抗氧剂1010含量显著高于仪器检测极限值。通过该设计与开展该实验，可以得出如下的结论，即在5%葡萄糖注射液中外源性抗氧剂的迁移量与粒料数目、瓶体中抗氧剂的量相关联，则迁移量与上述物质投入量之间呈正相关关系，所以管控好药用输液包装制作进程中抗氧剂添加比例是极为必要的。

[1]周婵婵,朱泓霞,周雪琴．参芎葡萄糖注射液致药物不良反应回顾性分析[J]．实用药物与临床,2015,04:454-456．

[2]郭欢迎,耿庆光,王嫦鹤．右旋糖酐40葡萄糖注射液pH值与5-羟甲基糠醛、糠醛含量的相关性分析[J]．中国药物警戒,2015,10:611-613．

[3]李治军．几种常用中药注射剂与5%葡萄糖注射液的配伍分析[J]．内蒙古中医药,2014,21:47．

(责任编辑：王恒)

Analysis of the Measurement of Exogenous Antioxidants in 5% Glucose Injection

Chen Min, Lei Xiangxiao, Wang Yang, Zhang Jialiang

（Engineering Center, Changzhou Fangyuan pharmacy Co., ltd, Jiangsu, 213125）

Make use of the HPLC method to measure the content of antioxidants 1010 and 168 in 5% glucose injection and the key point is the study of the movement situation of antioxidants in injection. The result has shown that the antioxidant 1010 has a good linear relation in the range of 0.61～363.66mg·L-1and antioxidant 168 has a good linear relation in the range of 1.21～362.66mg·L-1. We can know that the exogenous antioxidants has movement in 5% glucose injection.

5% glucose injection；exogenous antioxidants；measurement form；linear relation

R < class="emphasis_bold"> 文献标识码：A

A

陈敏（1990～)，女，常州方圆制药有限公司工程中心；研究方向：药物分析。