茴香提取液对酒精性胃黏膜损伤的保护作用

韩光顺+梁华益+冯洁+杨敏+莫庸+黄继杰+方晓燕+黄丽娟

【摘要】 目的 探究茴香对小鼠酒精性胃黏膜损伤的保护作用。

方法 用56°北京红星二锅头白酒建立小鼠酒精性胃黏膜损伤模型，用茴香进行干预，30天后，眼球采血测血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平；观察胃黏膜损伤指数，HE染色，观察胃黏膜组织形态学的改变。

结果 与正常组相比，模型组胃黏膜损伤指数、MDA水平明显升高（P<0.01），SOD活性明显降低（P<0.01）；胃黏膜表层大部分腺体形态及结构不完整，可见大量腺体结构破坏、脱落。与模型组相比，茴香高剂量组和西咪替丁组胃黏膜损伤指数、MDA水平均明显降低（P<0.05或0.01），SOD活性显著升高（P<0.05），茴香中剂量组MDA水平明显降低（P<0.01）；茴香中剂量组和高剂量组胃黏膜表层腺体结构较完整，茴香高剂量组细胞坏死较少。

结论 茴香可能通过降低脂质过氧化、增加机体氧化应激能力对酒精胃黏膜损伤进行保护。

【关键词】 茴香；酒精；胃黏膜损伤；氧化应激；超氧化物歧化酶；丙二醛

中图分类号：R573；R965 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2017.03.003

【Abstract】 Objective To explore the protective effects of fennel on alcoholic gastric injury in mice.

Methods The model of alcoholic gastric mucosa injury was established by 56°Beijing Red Star Erguotou Wine and intervened with fennel for 30 days，and then，blood from eyeball was collected to test serum superoxide dismutase （SOD） activity and malondialdehyde （MDA） levels.In addition，the gastric mucosal injury index and HE staining as well as the morphological changes of gastric mucosa were observed.

Results Compared with normal group，gastric mucosal injury index and the level of MDA in model group increased significantly（P<0.01），but the activity of SOD decreased obviously （P<0.01）.The morphology and structure of most glands in the surface of gastric mucosa were incomplete，and it could be seen that a large number of gland structures were damaged and detached.Compared with the model group，gastric mucosal injury index and the level of MDA in fennel high dose group and cimetidine group decreased obviously（P<0.05 or 0.01），but the activity of SOD increased significantly（P<0.05）.The level of MDA in fennel medium dose group decreased significantly（P<0.01）.The structure of glands in the surface of gastric mucosa in the fennel high dose group and the fennel medium dose group were complete，and the fennel high dose group showed less necrosis.

Conclusion Fennel can protect against gastric mucosal damage by reducing lipid peroxidation and increasing oxidative stress in the body.

【Key words】 fennel；alcohol；gastric mucosa injury；oxidative stress；SOD；MDA

隨着生活水平的不断提高，人们饮酒的问题越来越严重，同时过量饮酒造成的消化系统问题也越来越受到人们关注。文献报道长期过量饮酒可以引起胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡等[1]。酒精是一种有机溶剂，高浓度的酒精可以使胃黏膜上皮细胞发生坏死，从而破坏胃黏膜的防御系统，使胃黏膜容易受到各种损伤因子的侵袭而受到损害[2]。伞形科植物茴香是我国传统中药，主要有散寒止痛、和胃理气的功效，其果实、根、茎和叶均可供药用，主要成分含有脂肪油、氨基酸、挥发油、黄酮、糖苷、甾醇及生物碱等多种类型的化合物，具有抗氧化的作用[3～4]。本实验探讨茴香对酒精性胃黏膜损伤的保护作用，为茴香的开发利用提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物

6 W龄健康雄性SPF级小白鼠60只（生产许可证号scxk桂2012-0003，生产批号0007545），体重（22±2）g，由右江民族医学院实验动物中心提供，自由饮食。

1.1.2 试剂与药品

西咪替丁（广东台城制药股份有限公司，批号：20160206）；56°北京二锅头（北京红星股份有限公司，20160410）；超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所（批号分别为20160607，20160606）；茴香茎叶部分（广西百色市出售，晒干备用）。

1.1.3 主要仪器

日立全自动生化分析仪（株式会社日立高新技术公司产品）；722型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 分组与造模

适应性饲养后，按体重随机分为：正常对照组（蒸馏水）、模型组（蒸馏水+56°白酒）、西咪替丁组（25 mg/kg西咪替丁+56°白酒）、茴香提取液低剂量组（2.5 g/kg茴香+56°白酒）、茴香提取液中剂量组（5.0 g/kg茴香+56°白酒）、茴香提取液高剂量组（10.0 g/kg茴香+56°白酒），每组10只小白鼠。各组给予相应的药物干预和56°白酒灌胃，药物和蒸馏水均按0.1 ml/10 g量给予，白酒按（0.13 ml/10 g）给予。先给予药物，1小时后给予白酒，药物每天一次，白酒分2次给予，共30天。

1.2.2 茴香水提取液的提取

取茴香茎叶粉碎，用4倍水浸泡40 min，盛于玻璃容器内，微波处理后，用10倍水分2次浸提，共1个小时，浓缩至每ml含生药1 g（1.0 g/ml）。冰箱冷藏， 按相应浓度用原液1.0 g/ml及分别稀释为0.5 g/ml和0.25 g/ml。

1.2.3 指标检测 末次给药后，禁食不禁水12小时，行眼球采血，收集血液按说明书用分光光度计测定并计算MDA水平、SOD活性；取胃组织，记录胃黏膜损伤指数（胃黏膜损伤程度参照Kitagawa等[5]方法用损伤指数表示，按黏膜损伤的长度评分并计算损伤指数：≤1.0 mm为1分，>1.0 mm且≤2.0 mm为2分，依此类推；全胃评分的总和为该小鼠的胃黏膜损伤指数）。取胃组织甲醛固定、脱水、石蜡包埋、HE染色，光镜观察胃黏膜病理组织学变化。

1.2.4 统计学方法 采用SPSS 20.0软件进行统计分析，计量资料以（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，两两组间比较采用q检验，检验水准：α=0.05，双侧检验。

2 结 果

2.1 茴香提取液对小鼠酒精性胃黏膜组织损伤指数的影响

正常组、模型组、茴香低剂量组、茴香中剂量组、茴香高剂量组、西咪替丁组这六组胃黏膜损伤指数比较，经方差分析，差异有统计学意义（F=2.834，P=0.024）。经采用LSD分析进行两两比较得出结果：与正常组相比，模型组胃黏膜损伤指数显著升高（P=0.003）；与模型组相比，茴香高剂量组和西咪替丁组胃黏膜损伤指数显著降低，差异有统学意义（P值分别为0.024，0.009）。见表1。

2.2 茴香提取液对酒精性胃黏膜损伤小鼠血液SOD、MDA的影响 正常组、模型组、茴香低剂量组、茴香中剂量组、茴香高剂量组、西咪替丁组这六组SOD、MDA比较，经方差分析，差异有统计学意义（SOD：F=2.501，P=0.031；MDA：F=19.081，P<0.001）。经采用q检验進行两两比较得出结果：与正常组相比，模型组SOD活性显著降低，MDA水平明显升高，差异有统计学意义（P值分别为0.003、<0.001）；与模型组相比，茴香高剂量组和西咪替丁组SOD活性显著升高，差异有统计学意义（P值分别为0.014、0.036）；茴香中剂量组、茴香高剂量组和西咪替丁组MDA水平明显降低，差异有统计学意义（P值分别为0.004、<0.001、0.013）。结果见表2。

2.3 茴香提取液对酒精性胃黏膜损伤小鼠胃组织病理变化的影响 正常组和西咪替丁组胃黏膜表层腺体形态及结构完整。模型组胃黏膜表层大部分腺体形态及结构不完整，可见大量腺体结构破坏、脱落。茴香治疗组胃黏膜损害有较大的改善，随着浓度的增加，改善越明显。结果见图1。

3 讨 论

实验结果表明，模型组胃黏膜损伤指数较正常组明显增加，胃黏膜表层可见大量腺体结构破坏、脱落。说明酒精对小鼠胃组织造成了损伤，经过茴香治疗后，胃黏膜损伤指数均有所降低，胃黏膜表层腺体结构破坏及细胞坏死较少，以茴香高剂量最有效，说明茴香对酒精所致小鼠胃黏膜损伤有治疗作用，具有明显的量效关系。

有研究表明，乙醇对胃损伤的机制主要有以下几种：氧自由基产生的增加、胃黏膜血流量减少，从而造成胃黏膜的微循环障碍、破坏胃黏膜机械屏障、降低胃酸的分泌，其中氧自由基的增多是乙醇对胃黏膜损伤最主要的机制[6]。研究表明酒精在小鼠体内代谢也会引起脂质的过氧化，从而引起胃黏膜细胞损伤[7]。本实验结果表明，模型组MDA含量明显比正常组增高，SOD明显低于正常组，而经过茴香治疗后，MDA水平明显降低，SOD明显升高。机体内产生的氧化自由基主要是由机体内抗氧化酶系统进行清理，而其中SOD就是体内一种氧化酶，当机体发生氧化应激时，机体会增加SOD活性，清除产生过多的氧化自由基，从而减轻机体的氧化应激损伤[8]。MDA是由脂类代谢所产生一种的氧化产物，其含量的高低主要反映机体自由基和脂质过氧化的代谢水平[9]。而且有研究报道茴香提取液中的主要成分黄酮类化合物、挥发油等具有体外抗氧化作用[10～11]，由此推测茴香可能通过提取物中的抗氧化物质降低小鼠酒精性胃黏膜损伤的氧化应激和增强机体抗氧化能力对胃黏膜进行保护。

综上所述，茴香可能通过降低脂质过氧化和增加机体氧化应激能力，从而对酒精引起的胃黏膜损伤进行保护。除此之外，是否还有其他保护作用途径有待于进一步研究。

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（收稿日期：2017-04-26 修回日期：2017-05-22）

（编辑：潘明志）