终末期肾病患者高迁移率族蛋白-1与晚期氧化蛋白产物的研究①
2017-07-03满中敏刘艳姝郭彩霞鲍江波
满中敏,刘艳姝,郭彩霞, 鲍江波
(佳木斯大学附属第一医院肾内科,黑龙江 佳木斯 154003)
终末期肾病患者高迁移率族蛋白-1与晚期氧化蛋白产物的研究①
满中敏,刘艳姝,郭彩霞, 鲍江波
(佳木斯大学附属第一医院肾内科,黑龙江 佳木斯 154003)
目的:观察终末期肾病(ESRD)患者血清高迁移率族蛋白-1 (HMGB-1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平并评价其相关性。方法:选取ESRD患者60例(30例非血液透析和30例MHD治疗患者:按透析龄分为长期组、短期组)和30例健康体检者。酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测HMGB-l、AOPP,并记录一般临床资料。结果:①ESRD非血液透析组、MHD组与对照组相比,HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。②MHD组与ESRD非血液透析组相比,HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。③MHD长期组与短期组相比,HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。④相关性分析,在ESRD组中,血清HMGB-1水平与hs-CRP水平(r=0.762,P<0.01)呈正相关;血清AOPP水平与hs-CRP水平(r=0.843 ,P<0.01)呈正相关。结论:终末期肾病患者体内存在微炎症及氧化应激状态,血液透析会加重这种状态,并且随着透析龄的增高这种状态越来越严重。
终末期肾病;HMGB-1;hs-CRP;AOPP;血液透析
现代肾脏替代疗法使ESRD患者的生活质量显著提高,存活时间大大延长(可长达20余年)。MHD治疗是ESRD患者最常见的替代治疗方式之一,长期MHD治疗所引起的并发症十分常见[l]。微炎症和高氧化应激均与ESRD的许多并发症及其预后都紧密相关。因此,研究ESRD患者微炎症及氧化应激水平并积极干预 ,对于延缓ESRD的进展及其并发症的发生发展极为重要。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2015-09~2016-09在佳木斯大学附属第一医院肾内科就诊的终末期肾病患者60例,其中未行血液透析治疗患者30例(男15例,女15例)及MHD治疗患者30例(男14例,女16例)。未行血液透析治疗患者的原发病为:慢性肾小球肾炎(13例)糖尿病肾病(10例)高血压肾损害(5例)多囊肾(2例),MHD治疗患者,长期组15例原发病为:慢性肾小球肾炎(7例)糖尿病肾病(6例)高血压肾损害(2例);短期组15例原发病为:慢性肾小球肾炎(5例)糖尿病肾病(5例)高血压肾损害(2例)间质性肾炎(1例)痛风性肾病(1例)病因未明(1例)。终末期肾病的诊断标准按照NKF—K/DOQI标准进行诊断和分期。排除近期发生过明显感染或传染性疾病;恶性肿瘤;结缔组织疾病者;肾移植者;近期使用激素或免疫抑制剂;不愿参与研究者。正常对照组为30例在佳木斯大学附属第一医院健康体检者。
1.2 方法
1.2.1 血液透析
所有MHD患者均在佳木斯大学附属第一医院肾内科血液透析室透析,MHD治疗每周3次,MHD时间每次4~4.5h。
1.2.2 一般情况及标本的采集、检测
记录研究对象的一般情况:姓名、性别、年龄、体重及MHD患者的透析龄等。研究对象均在体检时或者入院后次日晨空腹采外周静脉血,离心后取血清保存待测HMGB-l、hs-CRP、AOPP水平。采用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测人高迁移率族蛋白B1 (HMGB-l)、晚期氧化蛋白产物AOPP。生化及血常规指标在佳木斯大学附属第一医院检验科检测完成。
1.3 统计学方法
2 结果
2.1 各组一般情况的比较
ESRD未血液透析组,MHD组与正常健康对照组比较,年龄、性别、体重水平,差异无统计学意义(P>0.05)。未血液透析组与MHD组相比,年龄、性别、体重、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C水平,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
表1 各组间一般请况的比较±s)
2.2 各组间血清HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平的比较
2.2.1MHD组、ESRD组(非血液透析组)与正常对照组相比,HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。MHD组与非血液透析组相比,HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。
表2 各组血清HMGB-1、hs- CRP、AOPP水平的比较
注:与正常对照组比较,a1、a2P<0.05;与非血液透析组比较,bP<0.05。
2.2.2MHD组不同透析龄长期组与短期组相比,HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表3。
表3 MHD组不同透析龄长期组与短期组HMGB-1、
2.3 各指标相关性的分析
在ESRD组中,血清HMGB-1水平与hs-CRP水平(r=0.762 ,P<0.01)呈正相关;血清AOPP水平与hs-CRP水平(r=0.843 ,P<0.01)呈正相关。
3 讨论
目前普遍认为,各种原发及继发性肾脏疾病本身就存在免疫功能的异常。肾间质纤维化是各种肾脏疾病慢性进展直至终末期的共同病理表现,同时也是所有肾脏疾病慢性发展的最终结果,涉及多种细胞、细胞因子、生长因子、细胞外基质及其相互作用[2]。ESRD是各种慢性肾脏病的终末期,在肾脏功能下降及肾脏自身损害为前提下,机体免疫应答已发生异常。2000年Schoming提出“微炎症状态”的概念以来,受到了广泛关注。有研究表明,ESRD患者在未行MHD治疗时,其肾脏病本身就能引起微炎症状态,主要因素是肾脏排泄及内分泌功能的衰竭。一些研究同时也表明,MHD治疗与这种微炎症状态存在相关性,考虑可能与透析膜生物不相容性,透析液的污染,透析血管通路的类型及感染等有关,这些均会加重体内微炎症反应。
C反应蛋白是一种正相急性反应蛋白,广泛应用于感染状态的临床检测,随着检测技术的高速发展,以高灵敏度著称的超敏C反应蛋白(highsensitiveC-reactiveprotein,hs-CRP)出现,是公认的反映ESRD微炎症状态的最佳指标。Oetega等[3]研究结果表明慢性肾衰竭患者在行透析治疗前血清CRP水平就已经升高,Yeun等[4]通过对MHD患者血清CRP的检测,结果显示其中30%高于正常。本试验通过对MHD以及ESRD未性血液透析患者血清hs-CRP检测同时于正常对照组对比,分别为(10.48±2.78)mg/L、(5.56±1.01)mg/L、(2.02±0.20)mg/L,与上诉试验结果相符。本实验还创新性的分析了长期透析组与短期透析组的hs-CRP分别为(12.90±1.65、8.07±0.89)mg/L,证实随着透析龄的增加,微炎症状态逐渐加重。
高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)广泛存在于真核生物体细胞核和细胞质,可作为转录和生长因子的DNA结合蛋白,分子量为30kDa。近年来被作为组织损伤的促炎症介质,HMGB-1可由固有免疫细胞如巨噬细胞和单核细胞主动分泌,当受到内毒素刺激时,HMGB-1可有受损及坏死的细胞被动释放,去激活和诱导炎症反应。2008年Bruchfeld[5]对未开始行血液透析的慢性肾脏病患者血清HMGB-1的检测,并且与正常对照组相比,HMGB-1水平显著升高,并且和hs-CRP呈显著相关。本研究通过对ESRD患者包括(非血液透析和MHD)与正常健康对照组血清HMGB-1的对比,证明ESRD患者体内存在微炎症反应,血液透析加重这种微炎症状态,随着透析龄的增高更加明显。与hs-CRP进行相关性的分析,两者成显著相关,同样与上诉实验结果相符,再次证明了HMGB-1可以作为评价MHD患者微炎症状态的新指标。
ESRD患者体内大量代谢产物的蓄积,导致内环境失衡,从而影响了氧自由基的清除。国内外研究表明,由于血液透析过程中多种因素的影响,MHD患者较未行血液透析治疗的ESRD患者氧化应激状态更为显著。AOPP是 1996年Witko-Sarsat等[6]在慢性肾衰竭患者体内发现的蛋白质过氧化产物,随后作为新型的尿毒症毒素及评价氧化应激的可靠指标,受到广泛关注。ESRD患者体内AOPP水平显著升高,伴随肾功能的减退,慢性肾脏病患者体内AOPP的潴留更加明显,ESRD患者体内AOPP水平较正常人增加2倍[7]。1998年Witko-Sarsat[8]等的研究结果显示,MHD患者血清AOPP显著升高。国内研究同样发现透析治疗会升高ESRD血清AOPP的水平,相对于接受腹膜透析治疗,MHD患者体内AOPP水平升高更为显著。本实验结果显示,MHD患者、ESRD未行血液透析患者血清AOPP分别为(85.40±11.72、44.12±6.16)umol/L高于正常对照组(21.19±3.14)umol/L,和上诉实验结论相符合。随着透析龄的增加,AOPP的水平是增高的,MHD加重了氧化应激状态。同时通过对其与hs-CRP相关性分析,得出两者呈正相关,推测AOPP可能参与了炎症反应的进程。
综上所述,ESRD患者无论未行血液透析治疗还是已接受MHD治疗,HMGB-1、hs-CRP、AOPP均高于健康对照组,MHD会加重ESRD患者体内的微炎症和氧化应激状态,并且随着透析龄的延长这种状态越来越严重。因此,积极控制ESRD患者体内的微炎症及高氧化应激的状态可能为减轻及减少其并发症提供一个重要途径。而HMGB-1、AOPP作为重要的炎症及氧化应激因子为这种可能提供了新的治疗靶点。
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[2]刘艳姝,刘中柱,史为伍,等.活性维生素D3对UUO模型大鼠肾间质骨形成蛋白 -7 表达的影响[J]. 黑龙江医药科学,2016,39(5):21-23
[3]OetegaO,RodriguezI,GallarP,etal.SignificanceofhighCreactiveproteinlevelsinpro-dialysispatients[J].NephrolDialTransplant, 2002, 17(6):1105-1109
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A study of high mobility group box - 1 protein and advanced oxidized protein products in end-stage renal disease
MANZhong-min,LIUYan-shu,GUOCai-xia,BAOjiang-bo
(Department of Nephrology,the First Affiliated Hospital of Jiamusi University,Jiamusi 154003,China)
Objective: To observe the level of HMGB-1,hs-CRP and AOPP in patients with end-stage renal disease, and to analyze their relevance. Methods: Sixty patients with end-stage renal disease were enrolled (including 30 non-hemodialysis patients and 30 maintenance hemodialysis patients. MHD group was divided into long-term and short-term groups according to dialysis ages. )and 30 cases accepted healthy physical examination. Serum HMGB-1 and AOPP were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).And the general clinical data of patients were recorded. Result:①The levels of HMGB-1, hs-CRP and AOPP in the ESRD group (non-hemodialysis group and hemodialysis group) were higher than those in the normal control group,and the difference was statistically significant (P<0.05).②MHDandESRDgrousp(non-hemodialysisgroup)werecompared,andHMGB-1,hs-CRP,AOPPlevelswereincreased;andthedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05). ③Comparedthelong-termandshort-termgroup,HMGB-1,hs-CRP,AOPPlevelsinhemodialysisgroupwereincreased,andthedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05). ④ThecorrelationAnalysisinESRDgroup,serumHMGB-1levelsandandhs-CRPlevels(r=0.762,P<0.01)werepositivelycorrelated;andserumAOPPlevelsandhs-CRPlevels(r=0.843,P<0.01)werepositivelycorrelated. Conclusion: The presence of a high end-stage in micro-inflammation and oxidative stress in patients with renal failure, hemodialysis could aggravate this state, and this state could get worse with the extension of the duration of dialysis.
ESRD;HMGB-1;hs-CRP;AOPP;hemodialysis
佳木斯大学研究生科技创新项目,编号:YM2016-049。
满中敏(1988~) 女,山东滕州人,在读硕士研究生。
刘艳姝(1971~) 女,黑龙江佳木斯人,硕士,副主任医师,硕士研究生导师。E-mail:liuyanshu1015@sina.com。
R
B
1008-0104(2017)03-0050-03
2017-03-02)