黄尾鲴自然受精与人工授精孵化效果比较研究

郭旭升，伦峰，赵良杰，彭新亮，吕瑛

（1信阳农林学院水产学院，河南省渔业生物工程技术研究中心，河南信阳464000；2罗山县水产局，河南罗山464200）

黄尾鲴自然受精与人工授精孵化效果比较研究

郭旭升1，伦峰1，赵良杰1，彭新亮1，吕瑛2

（1信阳农林学院水产学院，河南省渔业生物工程技术研究中心，河南信阳464000；2罗山县水产局，河南罗山464200）

对黄尾鲴进行人工催产，比较自然受精和人工授精的孵化效果。结果显示，人工授精的受精率和出苗率分别为92.00±4.60%和88.30%，优于自然受精的81.50±7.00%和84.30%，但人工授精的亲鱼成活率仅为57.50%，明显低于自然受精的90.00%。

黄尾鲴；自然受精；人工授精

黄尾鲴（Xenocypris davidiBleeker）[1]俗称黄尾、黄片、黄姑子、黄瓜鱼等[2]，是一种中小型淡水鱼类，主要分布于长江、珠江、闽江及闽东南各溪流，具有食性杂、生长快、适应能力强、易捕捞等特点。黄尾鲴主要以腐殖质、有机碎屑及附生藻类为食，在不增加饲料的情况下，在大水面进行黄尾鲴移植、增殖，并加强资源保护，让其形成自然种群，不仅能增加单位面积鱼产量，而且对净化水质、减缓水体富营养化进程、促进主养鱼增产和提高经济效益有重要作用。该鱼易养殖，饲料来源广，养殖成本低，具有较好的经济效益和增养殖前景，已成为当前水产养殖品种结构调整中首选的优良品种之一。但该鱼性情急躁，应激反应剧烈，人工繁殖难度较大。为了进一步优化黄尾鲴人工繁殖技术，探索不同人工繁殖方式的效果，于2016年5-6月开展了自然受精和人工授精对黄尾鲴孵化效果的对比试验，以期为黄尾鲴的大规模人工繁殖提供参考。

1 材料与方法

1.1 亲鱼

亲鱼为罗山县小龙山鱼类良种繁育场培育的黄尾鲴，年龄为3龄，平均体质量为500 g。

1.2 催产剂

催产剂为鱼用促黄体素释放激素A2（LRH-A2）和马来酸地欧酮（DOM），均购自宁波第二激素厂。

1.3 产卵池和孵化设施

产卵池采用小龙山鱼类良种繁育场的家鱼人工繁殖圆形产卵池，孵化设施为新建的玻璃钢孵化缸，为保证孵化效果，孵化缸底部铺设环形管用于充气，并通过管道与充气泵相通。

1.4 亲鱼选择

雄鱼头部、鳃盖、胸鳍等处“追星”较多，体表抚摸粗糙，轻压腹部能挤出乳白色精液；雌鱼则腹部膨大，卵巢轮廓明显，压感松软，在催产之前，用挖卵器取卵检查，卵粒大小均匀、饱满、容易分开，可以进行人工催产。

1.5 雌雄配比及催产

自然受精和人工授精试验同步进行，每个试验亲鱼分别为20组；自然受精的雌雄配比为1:1.5；人工授精的雌雄配比为1:1。两种方法的催产剂用量为10 ug LRH-A2/kg和6 mg DOM/kg，雄鱼减半，于胸鳍基部一次性注射，注射后放入产卵池，微流水刺激，促进亲鱼性腺成熟。

1.6 自然受精

亲鱼注射催产剂后，按雌雄1:1.5的比例放入产卵池中，适时冲水，让其自然产卵受精，产卵池水温为23.5℃，效应时间8 h左右[3]。发情后的亲鱼不停的沿产卵池四周追逐，雄鱼时而用头部撞击雌鱼的腹部，发情达到最高潮时雌雄鱼游泳速度加快，尾部摆动频率增加，并行片刻，交尾发出“啪”的响声并翻起浪花，雌雄鱼完成一次产卵交配活动。产卵后雌、雄亲鱼随即下沉，不久又重复产卵活动，整个过程持续3-4 h。发现亲鱼大批量发情产卵后，及时向产卵池中泼洒10%黄泥浆水[4]，用量为1 kg/m3，使其自行脱粘。产卵结束15 min后分批取出受精卵，然后漂洗，用于人工孵化。

1.7 人工授精

亲鱼注射催产剂后，按雌雄1:1的比例放入产卵池中，适时冲水观察，待雌雄亲鱼发情追逐激烈时，及时将亲鱼捞出进行人工授精。为延缓亲鱼产卵，发现亲鱼发情，可在产卵池中下一道拉网将发情的亲鱼短暂隔离。

采取改良的半干法授精。用干毛巾抹去雌亲鱼腹部及泄殖孔四周的水分，轻压腹部将鱼卵挤入干燥器皿中；同时取雄鱼，用干毛巾擦干腹部及生殖孔四周水分，挤精液滴入盛鱼卵器皿中，加入0.7%生理盐水适量，轻轻搅拌20-30 s，然后用手或羽毛轻轻搅拌1-2 min；加入适量清水，再轻轻搅拌1-2 min，静置1 min左右，倒去污水；随机将卵子倒入事先配好的10%黄泥浆水中脱粘，用手轻轻搅动4-5 min，将泥浆水连同受精卵一起用网片过滤，洗去多余泥浆，筛出鱼卵，如此重复用清水洗卵2-3次，即可移入孵化缸中孵化。

1.8 人工孵化

为防水霉病，先用2-4 g/m3水霉净浸浴8-10 min，然后按80-100万粒/m3放受精卵[5]。由于黄尾鲴受精卵较小，人工脱粘后卵表面附有泥沙，同时卵子吸水膨胀不明显，卵比重较大，孵化时要求水流速度较大，可通过孵化缸底部铺设环形管充气，以看到受精卵粒随水流上下翻动为宜。

1.9 产后亲鱼的处理

自然产卵后的亲鱼，及时用网具捕起，并用浓度为20 g/m3的KMnO4浸浴10 min[6]，期间用气泵供气，确保氧气充足，然后放入亲鱼暂养池中。人工授精后的亲鱼，特别是雌鱼受伤严重，需进行挑选，不能存活或伤势较重的亲鱼挑出，受伤较轻的亲鱼用上述方法处理后下池。

2 结果

2.1 受精率

试验在水温23.00±1.00℃条件下，分别完成20组自然受精和人工授精，受精卵孵化3 h后到达原肠胚期，每20组随机抽取5组，每组抽样200粒[7]，在4×10倍显微镜下观察，自然受精组的受精率达81.50±7.00%；人工授精组的受精率达92.00±4.60%（表1）。

表1 自然受精和人工授精效果比较Table 1 Effect comparison of natural fertilization and artificial insemination

2.2 出苗率

在水温23.00±1.00℃条件下，两种方式得到的受精卵分别放在孵化缸中，孵化水质及其它条件相同，受精卵经过30-36 h后开始破膜出苗，36-47 h完全破膜，仔鱼孵出后经过88-92 h出现腰点（鰾充气），开始平游，并主动开口摄食时，鱼苗即可下池培育，此时统计自然受精的出苗率为84.30%；人工授精的出苗率为88.30%，此次试验共出苗240万尾。

2.3 产后亲鱼成活率

黄尾鲴产后2 h亲鱼死亡和暂养2周内的死亡情况（表2），自然受精的亲鱼成活率达90.00%；人工授精的亲鱼成活率为57.50%。

表2 自然受精和人工授精后亲鱼成活情况Table 2 The survival condition of parent fishes of natural fertilization and artificial insemination

3 讨论

由表1可见，黄尾鲴自然受精的受精率明显低于人工授精，可能有以下几方面的原因：（1）人工授精方法精子和卵子在器皿内结合的机会多；而自然产卵受精往往由于亲鱼发情激烈，卵子和精子射出较远，分布范围大，影响受精率。（2）人工授精确保精子和卵子在极短时间内充分接触，从而提高受精率。但是人工授精必须把握好效应时间，如果超过效应时间再挤卵，则受精率会明显降低。（3）人工授精是把精子和卵子同时挤入器皿中，人工均匀搅动使精卵结合的机率大大增加；而自然产卵受精在精卵排出体外时，只是亲鱼用尾巴搅动，另外，自然产卵受精不能保证精卵同时排出，卵子刚产出体外时有下沉趋势，而精子排出体外遇水即散，从而影响受精率。（4）雌雄搭配比例不尽合理，自然受精情况下，为提高受精率，雌雄搭配比例最好提高到1:2。

钟岳采用DOM和LRH-A催产进行人工授精，并施以不同注射剂量，获得的受精率在62.00%-84.00%，采用PG和LRH-A进行催产，同时采用人工授精，其受精率为72.00%-82.00%[8]。而本试验人工授精的受精率达到92.00±4.60%，效果明显增强。

由表2可知，无论是自然受精还是人工授精，黄尾鲴产后亲鱼伤亡较为严重，特别是雌鱼产后死亡率高，最高达65.00%，这和黄尾鯝性情急躁，应激反应剧烈有关，因此在实际生产操作过程中，从日常管理、拉网捕鱼、运输、催产等各个环节都需谨慎操作，以免造成亲鱼大量死亡。

从试验结果分析黄尾鲴人工授精效果优于自然受精，但亲鱼的死亡率高。在黄尾鲴养殖生产中，如果后备亲鱼不足，建议培育好亲鱼，采取自然受精方式；如果后备亲鱼充足，可采用人工授精方式，提高受精率和出苗率。

[1]农业大词典编辑委员会编,农业大词典[M].北京:中国农业出版社,1998:549.

[2]付辉云,章海鑫,赵春来,等.军山湖黄尾密鲴的形态生物学研究[J].江苏农业科学,2015,43(7):247-249.

[3]黄邦星.黄尾鲴人工繁殖及苗种培育技术[J].福建农业,2013,3:27.

[4]李生武.鲴鱼的生物学特性及养殖技术[J].水产科技情报,2002,29(3):116-118.

[5]卞伟,阳爱生,伍远安,等.黄尾密鲴人工繁殖技术[J].水利渔业,1987,4:20-23.

[6]潘金培.鱼病诊断与防治手册[M].上海:上海科学技术出版社,1988:163.

[7]中华人民共和国国家标准:青鱼、草鱼、鲢、鳙鱼卵受精率计算方法,GB/T15806-1995.

[8]钟岳.高效鱼类催产合剂Ⅱ号催产黄尾密鲴试验报告[J].江西水产科技,1998(3):16-18.

Study on natural fertilization and artificial insemination hatching of Xenocypris davidiBleeker

Guo Xusheng1,Lun Feng1,Zhao Liangjie1,Peng Xinliang1,Lu Ying2
（1 Colloge of Fisheries,Xinyang Agriculture and Forestry University,Fishery Biological Engineering Technology Research Center of Henan Province, Xinyang 464000,Henan,China;2 Fisheries Bureau of Luoshan County,Luoshan 464200,Henan,China）

Hatching effects ofXenocypris davidiwith natural fertilization and artificial insemination after artificial induced spawning were compared in this study.The results showed that the fertilization rate and emergence rate of artificial insemination were 92.00±4.60%and 88.30%,higher than that of natural fertilization(fertilization rate 81.50±7.00%，emergence rate 84.30%).However,the survival rate of parent fishes of artificial insemination was57.50%,obviously lower than that of natural fertilization(90.00%).

Xenocypris davidi;natural fertilization;artificial insemination

河南省科技攻关项目（162102110053）

郭旭升（1968-），男，教授，研究方向：水产种质资源育种与保护，E-mail：gxs1968@163.com

彭新亮，E-mail：pengxinliang01@126.com