PCR法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果比较

何晓芳

PCR法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果比较

何晓芳

目的分析细菌培养法和PCR检验法在阴道细菌检验中的应用效果。方法选取自2015年8月至2016年8月间妇科收治病房的女性患者90例进行研究，采集其阴道后穹窿处分泌物分别使用细菌培养法和PCR法进行检测，对比两组检测方法下各个细菌类型阳性率情况。结果PCR组细菌阳性率为90%，细菌培养组细菌阳性率为55.56%，前者明显高于后者数据差异有统计学意义（P<0.05）；两种检测方法结果显示肠球菌、棒状杆菌以及加特纳菌阳性率差异有统计学意义（P<0.05）。结论在女性妇科疾病阴道细菌检验时采用PCR检查法，细菌阳性检出率更高，提供更为准确的依据。

阴道细菌 妇科疾病 细菌培养法 PCR检验

阴道炎是阴道黏膜及黏膜下结缔组织的炎症，是妇科门诊常见的疾病，由于女性阴道内致病菌逐渐增多，且乳酸杆菌含量明显减少造成局部生态平衡遭到破坏所引发的一系列疾病。细菌性阴道炎是一种可经由性行为传播的病症，主要的症状表现为阴道分泌物增加且性状异常，带有鱼腥臭等刺激性气味、外阴部瘙痒、性交疼痛等。科学的诊断方法是治疗的关键，目前临床上主要采用细菌培养法和PCR进行检测，本文比较了这两种方法的临床价值。

1 临床资料

1.1 一般资料 本次观察对象均是本院近年来收治的细菌性阴道炎患者，共90例，年龄24~39岁，平均年龄（31.5±2.6）岁；病程3周~1个月，平均（4.3±0.4）周。纳入标准：均为育龄期女性，主要症状表现为阴道异味、瘙痒、分泌物增多。

1.2 方法 采集患者阴道后穹窿处分泌物少许，将其置于无菌生理盐水中保存，每位患者的样本均分为2份：（1）细菌培养法：取出阴道分泌物样本的NaCl溶液放置于配制的培养基中，然后将培养皿放在孵育箱中（CO2浓度为5%）约2d，提取菌落上部灰色半透明且光滑的菌群，随即进行细菌鉴定（BIOMERIEUX的VITEK2全自动细菌鉴定仪和配套的细菌鉴定卡）。（2）PCR检验法：首先取1000μl保存于生理盐水中的阴道分泌物样本离心15min（1200r/min），弃去上层清液，向沉淀中加入蛋白酶K和内参，在全自动核酸纯化仪Smart.LabAssist-32上磁珠法提取35min，制作DNA模版。PCR反应体系为：DNA模板20.0μl，PCR缓冲液15μl，引物探针10μl，Taq酶5μ1（上海复星长征医学科学有限公司）离心（1200r/min）数秒后置于PCR仪（罗氏Cobas z 480）上。50℃反应2min循坏1次；94℃保温5min循坏1次；94℃10s→60℃ 45s循坏5次；94℃10s→60℃ 45s循坏40次，60℃采集FAM、JOE荧光通道信号并自动计算结果。阳性对照与阴性对照除不加模板DNA外，其余同检测组。

1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件。计数资料以%表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

本次实验中共检出致病细菌种类为肠球菌、加特纳菌以及棒状杆菌等，PCR组检测的阳性率为90%，细菌培养法检测阳性率为55.56%，前者细菌阳性率明显高于后者（P<0.05），见表1。

表1 两组检查方法的细菌阳性率情况［n（%）］

3 讨论

阴道炎发病较缓慢，隐匿期较长，因此早期患者临床症状不明显，多数患者难以察觉，直至炎性病变发展至盆腔、腹部出现腹痛等明显症状时病情已经较为严重，比如难治性阴道炎等，严重者会引发不孕症等，所以早期有效的诊断是预防和治疗最佳手段［1］。目前临床上在检查阴道炎时依然将细菌培养法作为“金标准”予以应用，该方法的优点是操作简单，检测费用低廉，患者更容易接受，但是该种检测法耗时较长，细菌培养时间必需在两天左右，且样本容易被污染而影响最终的检测结果，由于细菌培养法的检测阳性率较低，常需要患者进行多次采样检测［2］。PCR法用于阴道炎诊断快速及时且灵敏度高，通过IPDNA杂交能提高特异性，保证了阴道致病菌检测的准确性，还能展现PCR技术的敏感度，因此在细菌阳性检测方面准确率非常高［3-5］。本次实验中检测肠球菌、棒状杆菌以及加特纳菌90例，结果PCR法检测该3种细菌的阳性率分别为18.89%、14.44%、56.67%，细菌培养组数据依次为7.78%、6.67%和41.11%，两组数据对比差异有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，在细菌性阴道炎的诊断过程中采用PCR法能够提高阴道炎的致病菌检出率，为制定治疗方案提供依据，因此值得推广。

［1］ 华玲.PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果对比.中外医学研究,2015,13(17):50-51.

［2］ 成树芳.PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果.中国处方药,2016,14(2):107-108.

［3］ 张贺伟.PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果.医药论坛杂志,2014,13(24):660-662.

［4］ 刘学勇.比较PCR检验法与细菌培养法用于阴道细菌检验的效果.中国实用医药,2016, 11(11):338-339.

［5］ 赵彦丛.PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的应用价值.世界临床医学,2016, 10(9):247-248.

ObjectiveTo analyze the effect of bacterial culture method and PCR test in the detection of vaginal bacteria.MethodsFrom August 2015 to August 2016，90 female patients admitted to the department of gynecology ward were collected posterior vaginal fornix secretions respectively by bacterial culture method and PCR method. They were used to examine the positive rate of different types of bacteria detection and compared between the two groups.ResultsThe PCR positive rate of bacteria was 90%，the positive rate of bacteria culture of bacteria was 55.56%，the former was signifi cantly higher than that of the latter data（P<0.05）；the results of the two detection methods showed that there was statistical significance difference in positive rate of Corynebacterium and Enterococcus, Gardnerella vaginalis（P<0.05）.ConclusionThe PCR detection method is more effective in the detection of vaginal bacteria in women with gynecological diseases.

Vaginal bacteria Gynecological diseases Bacterial culture PCR test

321100 浙江省兰溪市人民医院检验科