超声提取优选研究多叶棘豆各药用部位盐酸小檗碱的分布
2017-05-30海平苏雅乐其其格
海平 苏雅乐其其格
摘要[目的]比较2种超声提取工艺研究多叶棘豆茎、叶、根、种子中盐酸小檗碱分布的不同。[方法]采用2种超声提取工艺对蒙药多叶棘豆茎、叶、根、种子中盐酸小檗碱进行提取并优选（方法Ⅰ是先将蒙药进行超声提取后放置24 h，方法Ⅱ是将蒙药先室温放置24 h再进行超声提取）。在波长426 nm处用分光光度法测定，计算盐酸小檗碱的含量和回收率。[结果]多叶棘豆茎中盐酸小檗碱分布最多，叶、根、种子盐酸小檗碱分布明显减少，而2种提取工艺中方法Ⅱ优于方法Ⅰ，加样回收率在92.58%～110.00%，RSD在0.782 3%～0.974 9%。[结论]多叶棘豆各药用部位盐酸小檗碱分布不均，茎中分布明显多，2种不同超声提取工艺中方法Ⅱ优于方法Ⅰ。
关键词超声提取；优选；多叶棘豆；不同药用部位；盐酸小檗碱
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2017）36-0119-02
Abstract[Objective] The research aimed to compare the distribution of berberine hydrochloride in the stem， leaf， root and seed of Oxytropis myriophy by two different ultrasonic extraction techniques.[Method]Two kinds of ultrasonic extraction process were used to extract and optimize the berberine hydrochloride in the stems， leaves， roots and seeds of Oxytropis myriophy（The first technology was to extract the Mongolian medicine first by ultrasonic extraction and then placed 24 h， and the second technology was to put the Mongolian medicine at room temperature for 24 h before ultrasonic extraction.）.And calculated the content of berberine hydrochloride and recovery in 426 nm wavelength spectrophotometry.[Result]The content of berberine hydrochloride was the most in the stalk of Oxytropis myriophy， the distribution of berberine hydrochloride in leaves， roots and seeds was obviously reduced，and the second technology of extraction process was better than the first technology，the recovery rate was 92.58%-110.00%， the relative standard deviation （RSD） was 0.782 3%-0.974 9%.[Conclusion]The distribution of berberine hydrochloride is not equal in the medicinal parts of Oxytropis myriophy， and the distribution in the stems is much more significantly， and the second technology is better than the first in the two different ultrasonic extraction techniques.
Key wordsUltrasonic extraction；Optimization；Oxytropis myriophy；Different medical parts；Berberine hydrochloride
多叶棘豆，蒙古名为娜布其尔哈格-敖日道扎、查干-达可沙、达林-敖日道扎。为豆科植物多叶棘豆[Oxytropis myriophy （Pall.）DC.]的干燥全草，是常用蒙药，具有杀粘、清热、燥黄水、愈伤、生肌、合脉止血、消肿、软便之功效[1]。国内外文献调研发现，对多叶棘豆的相关研究较少，已报道的化学成分主要有黄酮类[2]、木脂素类[3]、酚苷类[4]、三萜皂苷类[5]、生物碱类[6]以及多糖[7]，化合物种类和数量极为有限，药理活性及其相关活性物质基础研究鲜见报道。盐酸小檗碱主要用于抗炎、抗菌和解热，其不仅可以增强白细胞作用，还对肿瘤（胃癌MGC803、肾癌7860和肝癌HepG2等）有较好的抑制作用[8-9]。该试验通过2种不同超声提取工艺提取并测定多叶棘豆叶、莖、根、种子中盐酸小檗碱，研究多叶棘豆中盐酸小檗碱在各药用部位的分布，为寻找其活性物质提供依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1仪器。
FA 2004型电子天平（上海天平仪器厂）；HH-S28S型数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声波仪器有限公司）；722S型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）。
1.1.2试剂。
无水乙醇（沈阳市东兴试剂厂）；甲醇（沈阳市东兴试剂厂）；浓盐酸（长春市化学试剂厂）；盐酸小檗碱（中国药品生物制品鉴定所）；以上试剂均为分析纯。
1.1.3药品。
多叶棘豆于2016年7月采集于兴安盟五叉沟，室温晾干，保存。
1.2方法
1.2.1样品的预处理。
将干燥的多叶棘豆样品进行茎、叶、根、种子分开处理，再将多叶棘豆的根清洗干净，放入烘干箱中烘干，最后用碾碎机将多叶棘豆的茎、叶、根、种子全部粉碎成样品粉末，分别用电子天平称取样品5.00 g。
1.2.2标准品溶液的配制。
精密称取10 mg盐酸小檗碱对照品，置于100 mL容量瓶中，加入85 mL无水乙醇，充分搅拌，待其完全溶解，再加无水乙醇至刻度，摇匀，此溶液浓度为0.1 mg/mL。
1.2.3标准曲线的建立。分别用移液管移取盐酸小檗碱标准品溶液1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL置于5 mL的比色管中，标记为1～5号，加入无水乙醇至刻度，充分摇匀，波长为426 nm处以无水乙醇为空白对照，测定吸光度，以浓度（mg/mL）为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线（图1），得线性方程为y=12.233x-0.038 9（r=0.998 9）。
3小结
采用2种不同超声提取工艺对多叶棘豆不同药用部位茎、叶、根、种子的盐酸小檗碱含量分布进行了比较研究，结果表明，多叶棘豆的茎、叶、根、种子中盐酸小檗碱的含量明显不同，其中茎的含量最多，叶、根、种子的含量相对较少。说明茎中盐酸小檗碱分布相对多，其他部位分布相对少。多叶棘豆不同药用部位茎、叶、根、种子的回收率也明显不一样，其中叶的回收率最高，茎的回收率最低，并且方法 Ⅰ 的回收率低于方法 Ⅱ 的回收率。
参考文献
[1] 蒙医学编辑委员会.中国医学百科全书·蒙医学[M].上海：上海科学技术出版社，1992：212.
[2] SHE G M，SUN F F，LIU B.Three new flavonoid glycosides from Oxytropis myriophylla[J].Journal of natural medicines，2012，66（1）：208-212.
[3] OKAWA M，YAMAGUCHI R，DELGER H，et al.Five triterpene glycosides from Oxytropis myriophylla[J].Chemical & pharmaceutical bulletin，2002，50（8）：1097-1099.
[4] KOJIMA K，PUREVSUREN S，NARANTUYA S，et al.Alkaloids from Oxytropis myriophylla（Pall）DC[J].Scientia pharmaceutica，2001，69（4）：383-388.
[5] 白清云.中國医学百科全书[M].赤峰：内蒙古科学技术出版社，1986：322.
[6] 伊希巴拉珠尔.蒙医甘露四部.呼和浩特：内蒙古人民出版社，2007：404.
[7] 苏雅乐其其格，海平.多叶棘豆不同部位多糖体外抗氧化活性比较研究[J].辽宁中医杂志，2016，10（43）：2168-2169.
[8] GHOSH R，GRAHAM H，RIVAS P，et al.Phellodendron amurense and itsmajor alkaloid compound，berberine ameliorates scopolamineinduced neurnal impairment and memory dysfunction in rats[J].Anticancer Res，2010，30：857-866.
[9] JAMES M A，FU H，LIU Y，et al.Dietary administyation of berberine or Phellodendron amurense extract inhibits cell cycle progressoin and Lung tumorigenesis[J].Mol Carcinog，2011，50（1）：1-7.
[10] 程华，余龙江，胡琼月，等.分光光度法测定岩黄连不同部位总生物碱的含量[J].时珍国医国药，2006，17（3）：364-365.
[11] 海平，苏雅乐，王秀兰.手参及其炮制品盐酸小檗碱含量的测定[J].中国民族医药杂志，2009，15（3）：62-64.
