酒精性肝病与非酒精性脂肪肝患者血清GP73水平差异及意义

周爱国 候俊 冯鑫 黄玉波 李伯安

277100 枣庄，山东枣庄市中区医院(周爱国)；100039 北京，解放军302医院(候俊、李伯安)；100015 北京，首都医科大学附属北京地坛医院(冯鑫、黄玉波)

·技术方法·

酒精性肝病与非酒精性脂肪肝患者血清GP73水平差异及意义

周爱国 候俊 冯鑫 黄玉波 李伯安

277100 枣庄，山东枣庄市中区医院(周爱国)；100039 北京，解放军302医院(候俊、李伯安)；100015 北京，首都医科大学附属北京地坛医院(冯鑫、黄玉波)

目的 明确酒精性肝病(ALD)患者血清GP73变化特征及可能的临床意义。方法 本研对32例ALD患者，40例非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者，以及40例健康对照人群进行了观察。血清GP73采用ELISA法检测。结果 ALD患者(93.39±66.91 ng/ml)的血清GP73水平显著高于NAFLD患者(55.38±21.00 ng/ml)；NAFLD患者的血清GP73也显著高于健康对照人群(43.91±19.02 ng/ml)。以NAFLD人群为参照“健康”人群，以酒精性肝病为“患者”人群，则GP73临床诊断ALD的ROC分析曲线下面积为0.66(95%CI：0.52～0.80，P=0.02)。以75.65 ng/ml为诊断cut-off值，则GP73诊断ALD的特异性为85.0%，敏感性为50.0%。结论 ALD患者血清GP73水平较健康对照人群及NAFLD患者显著升高，检测血清GP73对ALD和NAFLD之间有一定的鉴别诊断意义。

高尔基体蛋白-73(GP73)最初由Kladney等[1]从成人巨细胞性肝炎组织标本内克隆表达，并发现病毒感染可以上调该蛋白的表达。随后进一步的观察提示，该蛋白是一个良好的肝癌诊断标志物[2]。而且，肝病患者GP73对良、恶性病变也具有一定的鉴别诊断价值[3]。因此，该标志物逐渐用于肝癌的临床诊断和鉴别诊断。但近年来的临床观察结果越来越多地提示，该标志物的血清水平与慢性肝病患者的纤维化进程一致[4,5]。显然，对不同慢性肝病患者血清GP73水平特征的观察，也就成为正确诠释血清GP73临床意义的关键问题之一。虽然乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)及丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)感染患者血清GP73的变化特征已经基本明确，但酒精性肝病患者血清GP73的变化特征一直缺乏相应的临床资料。本研究对部分酒精性肝病患者的血清GP73水平进行了观察。

1 材料与方法

1.1 观察对象 观察对象为2012年6月至2014年12月间枣庄市中区医院及同期部分北京地坛医院就诊的酒精性肝病(32例)，非酒精性脂肪肝(40例)患者，以及40例健康体检人群。酒精性肝病入组的患者符合欧洲肝病学会2012年临床指南的标准。非酒精性脂肪肝的诊断标准符合美国肝病学会的诊断标准。酒精性肝病、非酒精性脂肪肝的诊断标准，除符合相应的诊断标准外，不包括以下情况的患者：①合并心、肾及呼吸功能衰竭；②合并其他明确病毒感染，如HBV，HCV等；③合并恶性肿瘤、糖尿病、自身免疫性肝病，以及其他病因明确的肝脏慢性疾病。对照组被观察对象为健康体检无异常者。排除性别偏倚对观察结果的影响。

1.2 影像学检查及生化分析 所有入组患者均接受标准超声肝脏扫描，并排除占位性病变。采用标准酶法检测血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine transaminase, ALT)，门冬氨酸转氨酶(Aspartate transaminase, AST)等肝功能指标。标准生化法分析血脂、血糖。

1.3 血清GP73检测 血清GP73含量采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定。按照制造商(北京热景生物)提供的说明书进行。

1.4 统计学方法 计量资料以均数±标准差表示。两组以上均数差异比较采用ANOVA分析；两组之间均数差异采用t检验。P<0.05 设置为显著性检验水准。以非酒精性脂肪肝及体检人群为“健康对照”人群，以酒精性肝病为“患者”人群，GP73 诊断酒精性脂肪肝的性能采用ROC分析。GraphPad Prism 5.01软件进行统计分析。

2 结果

2.1 患者一般资料 32例酒精性肝病患者中，男性28例，平均年龄42(21～67)岁；女性4例，平均年龄41(28～49)岁；40例非酒精性脂肪肝患者中，男性34例，平均年龄38(26～53)岁；女性6例，平均年龄41(31～50)岁；40例健康体检人群中，男性33例，平均年龄37(23～56)岁，女性7例，平均年龄39(29～55)岁。3组人群之间年龄构成无差别(F=2.59，P=0.08)。

2.2 酒精性肝病患者血清GP73水平的差异 与预期的结果一致，ALD患者的血清ALT(126.8 ±121.8 U/L)水平显著高于NAFLD(43.10 ± 27.27 U/L)，以及健康对照人群(38.67 ± 18.09 U/L,P<0.0001)。在此基础上，我们观察了不同被观察对象人群之间血清GP73水平的差异。结果显示，ALD患者(93.39±66.91 ng/ml)的血清GP73水平显著高于NAFLD患者(55.38±21.00 ng/ml，P=0.001)；NAFLD患者的血清GP73也显著高于健康对照人群(43.91±19.02 ng/ml，P=0.012)。与NAFLD患者(44.81±3.56 g/L)相比，ALD患者血清白蛋白(ALB)水平显著降低(40.95±6.20 g/L)；但NAFLD与健康对照人群(44.80±4.22 g/L)之间ALB水平差异无统计学意义(P=0.99)。进一步的分析还显示，3组不同被观察对象之间总胆红素(Tbil)水平差异无统计学意义(F=2.092，P=0.128)。

注：A，不同人群之间血清ALT水平差异；B，不同人群之间血清GP73水平差异；C，不同人群之间血清ALB水平差异；D，不同人群之间血清Tbil水平差异(ALT，谷丙转氨酶；GP73，高尔基体蛋白73；ALB，血清白蛋白；Tbil，血清总胆红素)图1 不同人群之间血清标志物差异Note: A, serum ALT activity in different populations; B, serum GP73 levels in different populations; C, serum ALB levels in different populations; D, serum Tbil levels in different populations (ALT， Alanine transaminase GP73, golgi protein 73; ALB, albumin; Tbil, total bilirubin) Fig.1 Differences of serum GP73 among the three populations

2.3 血清GP73对酒精性肝病的诊断价值 以NAFLD和健康体检人群为参照“健康”人群，以酒精性肝病为“患者”人群，我们对GP73诊断ALD的临床价值进行了ROC分析。结果显示，ROC曲线下面积AROC为0.7(95%CI：0.57～0.83，P=0.001)。根据最大似然比确定最佳诊断cut-off值。如将诊断cut-off值设定为53.15 ng/ml，则GP73诊断ALD的敏感性为66.67%，特异性为68.75%。如果以NAFLD为“健康对照”人群，则GP73临床诊断性能ROC分析曲线下面积为0.66(95%CI：0.52～0.80，P=0.02)。以75.65 ng/ml为诊断cut-off值，则GP73诊断ALD的特异性为85.0%，敏感性为50.0%。

注：A，以NFALD患者和体检人群(总计80例)为“健康对照”人群，以ALD为“患者”人群，GP73 诊断ALD的临床诊断性能ROC分析曲线。B，以NFALD人群为“健康对照”人群，以ALD为“患者”人群，GP73 诊断ALD的临床诊断性能ROC分析曲线图2 GP73诊断ALD临床性能分析Note: A, We set NFALD patients and examination population as “health control” population, and ALD patients as “patients”population, area of ROC analysis for GP73 diagnosing ALD. B, NFALD patients were dligned as "healthy control" population, and ALD patients as "patients" population, area of ROC analysis for GP73 diagnosing ALDFig.2 The clinical performance of GP73 for ALD diagnosis

3 讨论

作为一个新型的肝癌诊断标志物，GP73 在我国已经广泛应用于肝癌的临床诊断[6，7]。但近期我们的研究发现，该蛋白在肝衰竭[8]、其他病毒感染[9]，以及病毒性肝炎患者中显著升高，并与患者肝纤维化程度有一定的相关性[10]。显然，明确不同肝损伤的病因对客观诠释GP73升高的临床意义具有重要意义。但有关酒精性肝病患者血清GP73变化特征的资料一直缺乏。本研究中发现，与健康对照人群及NAFLD患者相比，ALD患者血清GP73显著升高。提示，对于血清PG73升高的肝病患者，还需要考虑ALD的可能。酒精性肝病，因患者摄入的酒精多少不同，临床上表现为不同程度的肝损伤。从轻微的肝细胞脂肪变，酒精性肝炎，肝纤维化，肝硬化，甚至肝癌[11]。根据患者的饮酒史，诊断一般不难。但很多情况下，患者对饮酒史有不同程度的隐瞒，给临床诊断带来了一定的困难[12]。根据2014年美国CDC的资料，仅15.7%的酗酒者经常寻求医疗专业人员的帮助[13]。本病迄今为止也缺乏有效的实验室诊断标志物[14,15]。该结果提示，检测血清GP73水平对ALD与NAFLD患者人群的鉴别有一定的诊断价值。

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(本文编辑：陈培莉)

Difference and clinical significance of serum GP73 between alcoholic liver disease and non-alcohol fatty liver disease

ZhouAiguo,HouJun,FengXin,HuangYubo,LiBoan

TheZaozhuangShizhongPeople'sHospital,Zaozhuang, 277100,China(ZhangAG);TheNo302HospitalofthePeople′sLiberationArmy,Beijing,100039,China(HouJ,LiBA);BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing,100015,China(FengX,HuangYB)

LiBoan,Email：lba@263.net

Objective The present study was designed to evaluate the clinical significance of serum GP73 in patients with alcohol liver disease.Methods Thirty-two patients with alcoholic liver disease (ALD), 40 patients with non-alcohol fatty liver disease(NFLAD), and 40 apparently healthy individuals were included in this study. Results Compared with Those of healthy control population(43.91±19.02 ng/ml), the serum GP73 levels in ALD patients(93.39±66.91 ng/ml) were significantly increased, and also markedly higher than those of NFLAD patients (55.38±21.00 ng/ml). Taken the NFALD as “healthy controls” population, and ALD population as “patients”, the GP73 may be used to differentiate the ALD from NFLAD. The area of ROC analysis was 0.66(95%CI：0.52～0.80，P=0.02). We set 75.65 ng/ml as the cut-off value for ALD diagnosis, the sensitivity and specificity were 50.0% and 85.0% respectively. Conclusion Serum GP73 levels in ALD patients were significantly higher than those of NFALD patients. GP73 may be a new marker for differentiating ALD from NFALD.

Alcoholic liver disease; Non-alcohol fatty liver disease; Golgi protein 73; Differentiating diagnosis

李伯安,Email：lba@263.net

10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2017.02.017

酒精性肝病;非酒精性脂肪肝;高尔基体蛋白73; 鉴别诊断

2016-11-21)