标本溶血对生化检验结果影响的研究与探讨

刘金华++++++简庆佳++++++符传东++++++邱辉强++++++黄健林++++++赵双玉

[摘要]目的 探讨标本溶血对生化检验结果的影响分析。方法 选择2015年9～12月在我院门诊进行体检的100名正常志愿者的血液标本作为研究对象，采用日立7600-010型全自动生化分析仪检测血液标本溶血前后谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、肌酸激酶（CK）、K+、Ca2+、葡萄糖（Glu）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）等12项生化指标，观察溶血前后各项指标的水平差异。结果 研究对象血液标本溶血前后AST、ALT、TBil、DBil、TP、ALB、CK、K+、Glu、BUN水平比较，差异均有统计学的意义（P<0.05）；溶血前后血液中UA、Ca2+水平比较，差异无统计学的意义（P>0.05）。结论 标本溶血现象对很多临床生化检验实验有很大的影响，为了尽可能减少或避免标本溶血的发生，要求临床工作人员采血时严格按照要求操作，对标本的采集、运送、分离以及检测过程严格操作，做好临床标本分析前的质量控制，使检验结果更准确可靠。

[关键词]溶血；生化檢验；标本溶血；临床标本

[中图分类号] R446.11 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）03（c）-0138-03

[Abstract]Objective To discuss the influence of blood specimen hemolysis on the results of chemical biochemical tests.Methods The blood samples from 100 cases of normal volunteers carried out physical examination in outpatient of our hospital from September to December 2015 for the research object.12 tested indexes of biochemical index blood samples such as alanine aminotransferase （ALT） and aspartate aminotransferase （AST），values of total bilirubin （TBil），direct bilirubin （DBil），total protein （TP），albumin （ALB），creatine kinase （CK），K+，calcium （Ca2+），glucose （GLU），urea nitrogen （BUN），uric acid （UA） were detected before and after hemolysis by the Hitachi Model 7600-010 automatic biochemical analyzer and the levels difference of each indexe was analyzed.Results Levels of AST，ALT，Tbil，Dbil，TP，ALB，CK，K+，Glu，BUN before and after the hemolysis had statistically significant differences （P<0.05）；the value of UA，Ca2+ had no statistical difference before and after the hemolysis （P>0.05）. Conclusion The hemolysis has a great influence on on the clinical and biochemical test，the effect of clinical laboratory tests，in order to reduce or avoid hemolysis phenomenon，clinical staff should be strict in the operating of samples collecting，transport，separate and detecting，and keep higher quality control before test，that can make the results more accurate and reliable.

[Key words]Haemolysis；Biochemistry；Specimen hemolysis；Clinical specimen

标本溶血的原因很多，但主要原因是指医护人员由于采血操作不当或临床检验操作不规范造成红细胞结构破坏，导致某些物质进入血清中，使标本呈现红色[1]，血小板、白细胞、红细胞等血细胞破坏所释放的某些细胞内成分对临床生化指标测定会形成干扰，是临床生化检验实验中最常见的一种干扰因素[2]。这些释放的成分在细胞内的浓度如果与血清的浓度不同，则这些成分的逸出将会影响其在血清中的浓度，使测定结果有所改变[3]。由于造成标本溶血的责任多部分在医护一方，所以一旦有医疗纠发生纷事件，医护一方将处于非常不利的条件[4]。本文通过标本溶血的测定试验，明确标本溶血对生化检验指标测定的干扰与影响，分析其的干扰因素，并提出有效的解决方法。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2015年9～12月在我院门诊做健康体检的100名正常志愿者为研究对象，其中男60例，女40例，年龄25～49岁，平均（32.5±1.5）岁。所有研究对象均对本研究知情同意并签署知情同意书。排除肝肾功能异常、合并呼吸系统疾病、心脑血管疾病、糖尿病及乙型肝炎者。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1仪器 本次生化试验采用的仪器为日立7600-010型全自动生化分析仪。

1.2.2试剂 本次生化试验采用的试剂：天冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒，批号：150830；谷氨酸氨基转移酶（ALT）试剂盒，批号：150821；总胆红素（TBil）试剂盒，批号：150917；直接胆红素（DBil）试剂盒，批号：150917；总蛋白（TP）试剂盒，批号：150918；白蛋白（ALB）试剂盒，批号：150916；肌酸激酶（CK）试剂盒，批号：150921；K+试剂盒，批号：150925；Ca2+试剂盒，批号：20150923；葡萄糖（Glu）试剂盒，批号：150923；尿素氮（BUN）试剂盒，批号：20150925；尿酸（UA）试剂盒，批号：150923。以上试剂由宁波美康生物技术有限公司和上海科华生物技术有限公司提供。

1.2.3检测方法 所有受检者均要求空腹12 h以上，清晨抽静脉血8 ml，将所采集的血液分别置于2支干净的试管中，每支4.0 ml静脉血，其中1支试管的静脉血在室温条件下进行自然分离，待30 min后，1500 r/min离心10 min，将血清进行充分分离，取分离后的血清1.5 ml，备用，即为溶血前样本；另一支试管中的静脉血标本，采用物理方法溶血，再取血清1.5 ml以相同的速度进行离心分离，备用，即为溶血后样本。采用日立7600-010型全自动生化分析仪进行检测，利用上海科华生物试剂与宁波美康生物试剂进行测定血清中的AST、ALT、TBil、DBil、TP、ALB、CK、K+、Ca2+、Glu、BUN、UA等12項指标水平，操作步骤和方法均按照试剂盒说明书及日立7600-010型全自动生化分析仪上的操作规程进行，每份标本的溶血血清与正常血清分别进行15次的12项指标测定，求出两组每份血清的平均值，分别计算100例标本中12项指标测定的平均值，得到两组测定的平均值，并对结果进行分析与总结。

1.3统计学方法

采用SPSS 15.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

溶血后AST、ALB、TP、ALT、BUN、CK及K+水平均有显著升高，与溶血前比较，差异有统计学意义（P<0.01），分别升高了23.02%、8.33%、9.41%、23.01%、10.86%、16.21%及36.00%；而TBil、GLU、DBil则有明显的降低，差异有统计学意义（P<0.01），分别下降了18.10%、17.59%、18.19%；Ca2+、UA溶血前后对比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

3讨论

数据表明，标本溶血对大多数临床生化检验结果均有影响。而标本溶血对临床生化检验有影响的干扰和因素主要有以下几个方面。第一，标本溶血对血液中被测物质的浓度有影响。由于红细胞中K+的含量约为血清中的20倍[5]，如果标本溶血，作为K+电解质测定时，钾离子的检验结果会大大升高[6]。倘若1%的红细胞因破坏而造成标本溶血时，CK检验的结果可为实际水平的212%，ALT检验的结果可为实际水平的220%[7]。因此，做上述项目K+、CK、ALT等临床生化检测时，不能有丝毫溶血[8]。第二，标本溶血对有色物质的吸光度和散光度产生较大的误差。标本溶血可干扰临床生化检验的显色反应，例如溶血时，某些被测物质的的性质发生变化，其摩尔吸光系数也会随之发生改变，从而使检测结果不同[9]。第三，标本溶血对某些物质的检测有影响。当标本溶血时，血红蛋白被释放出来从而进入血浆中，其可干扰临床生化试验中BUN、Bil等物质的检测[10]。第四，标本溶血可使线粒体酶和一些离子的浓度升高[11]。当标本溶血时，除了红细胞被破坏之外，粒细胞系统也可破坏，并释放出谷氨酸脱氢酶（GLDH或GDH）等线粒体酶类，使被测的血清线粒体酶含量升高[12]。除此以外，标本溶血时血小板也被破坏，使被测的血清K+、Mg2+等离子检测含量升高[13]。第五，标本溶血可改变铁离子化合价。溶血标本中的红色Fe2+，被氧化成黄色的Fe3+，对比两点的色差，利用比色法来确定待测物质含量将会被造成干扰，当血红蛋白过多时，可造成TBil、TP、AST、ALB等增高[14]；第六，血红蛋白可抑制反应。当血红蛋白达到一定浓度时，可以抑制生物化学反应[15]，导致测定值要低于实际值。

综上所述，只要标本溶血，对大部分生化检查项目的结果影响都很大。首先，检验工作人员的技术和素养很重要，如果检验科工作人员不及时识别，结果不仅仅会直接影响临床医生对就诊者的正确诊断，甚至会造成严重性误诊。所以检验科的工作人员在日常工作中必须严格做好标本分析前的质量控制。其次，负责抽血的医护人员也要做好岗前技术培训，保证抽血方法规范化，以减少就诊者二次痛苦。常见的因护理因素引起溶血有以下几点：①穿刺前由于消毒乙醇未干；②穿刺部位不准确，造成瘀血而溶血；③注射器漏气，产生气泡造成溶血；④抽血后未卸下针头，强力注入试管；⑤长时间或用力摇动或剥动血块；⑥采血时压迫时间过长；⑦抗凝剂和血液的比例不适；⑧注射器、容器内有水；全血放置时间过长[16]。最后，采用空白试验方法消除溶血的干扰和影响，对于溶血后标本，血红蛋白对物质的吸光度和散光度的影响可通过空白实验等措施克服系统误差，以便提高实验的精密度。

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