马来甜龙竹试管苗生根诱导培养研究
2017-04-19李云海陈丽华刘云谣
李云海++陈丽华++刘云谣
摘要 以马来甜龙竹的试管苗为试验材料,采用1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA(0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L)+0.7%琼脂+30 g/L蔗糖,pH值为5.8的培养基,对马来甜龙竹试管苗生根的影响进行研究。结果表明:在培养基为1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5 mg/L+0.7%琼脂+30 g/L蔗糖时,马来甜龙竹试管苗在接种45 d后的生根、叶长、叶色和株高等综合情况都比较好,并且生根率高达85%,利于试管苗的驯化移栽。
关键词 马来甜龙竹;组织培养;试管苗;生根诱导;生根率
中图分类号 S795 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2016)24-0146-01
马来甜龙竹[(Dendrocalamus aspera(J.A.et J.H.Schult.)Backer ex Heyhe)]属竹亚科(Gramiaeae bambnsoideae)牡竹属丛生大型竹类,竹干横切面周长10~30 cm,竹壁厚2.2~2.5 cm,株高20~30 m,是世界上巨型竹种之一。马来甜龙竹造型美观,是园林绿化的优良竹种[1];其笋有甜味,也具有较高的食用和经济价值。
马来甜龙竹试管苗诱导生根方面,已有学者做了相应的试验研究工作。刘荣辉等[1]研究得到NAA 5 mg/L+多效唑0.1 mg/L利于马来甜龙竹生根;1/2MS+NAA1.0 mg/L+20 g/L蔗糖+0.5%琼脂(pH值5.8)和1/2MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+PP333 0.1 mg/L则是龚力波等[2]和苏 海等[3]通过研究得到的适合马来甜龙竹生根诱导的培养基。此外,TDZ也可显著诱导竹子生根[4],国外也有报道称IAA和香豆素配合使用可以使生根率达90%以上[5]。本试验以云南师范大学薯类作物研究所提供的马来甜龙竹试管苗为试验材料,以1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA(0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L)+0.7%琼脂+30%蔗糖、pH值为5.8的培养基进行研究,以期从中筛选出可用于本试验诱导马来甜龙竹试管苗生根的较适宜的培养基激素浓度。
1 材料与方法
1.1 试验设计
以马来甜龙竹试管苗为试验材料,以1/2MS培养基添加6-BA 1.0 mg/L为基础(蔗糖和琼脂的用量分别为30 g/L和0.7%,pH值调至5.8),设置萘乙酸(NAA)浓度为4个水平,即0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L,各试验处理分别用L-1、L-2、L-3和L-4表示。
1.2 试验方法
把供试的长势较均匀的马来甜龙竹试管苗剪去基部的愈伤组织等,切分成2~3苗的小丛并转接到不同NAA浓度的培养基上。每处理接种5瓶,每瓶接种5小丛,封膜后放置于培养室中培养。培养室温度为21~23 ℃,光照强度2 000 lx,光照时间12 h/d。
1.3 调查统计
每隔15 d观察记录马来甜龙竹试管苗接种后的生根及生长情况,至第45天时对其生根和生长情况进行测量并作生物统计分析[6]。
2 结果与分析
2.1 不同处理生根情况
由表1可知,到第45天时,从平均生根数来看,处理L-2最多,为4.25丛;处理L-1次之,为3.20丛;其后依次为L-3、L-4,分别为2.75丛、2.33丛。方差分析中各处理之间差异显著,各重复之间差异不显著。进一步的多重比较结果为,L-2与L-3和L-4之间差异极显著;L-2与L-1之间差异显著;L-1与L-3、L-4之间及L-3与L-4之间差异不显著(表2)。从生根率来看,随着NAA的浓度增加,马来甜龙竹试管苗的生根率不断上升,当到达L-2的浓度時,生根率达到最大;但当NAA的浓度升至L-3和L-4时,二者的差异已经不明显并且生根率反而降低,故处理L-2的培养基比较适合马来甜龙竹的生根诱导培养。
2.2 不同处理株高生长情况
由表2可知,到第45天,各处理的植株均有一定程度的生长,其中处理L-2植株最高,为7.45 cm;其次为处理L-1,株高为7.16 cm;处理L-4居第三,株高为6.37 cm;处理L-3最矮,为6.18 cm。进一步方差分析和多重比较可得出,L-2与L-1、L-3、L-4之间差异极显著;L-1与L-3、L-4之间差异显著;L-3与L-4之间差异不显著。因此,处理L-2的促生长效果较之其他3个处理稍好。
2.3 不同处理叶片长度
由表3可知,到第45天,处理L-2的叶片平均长度最高,为3.23 cm。方差分析表明,各处理之间差异显著,各重复之间差异不显著。进一步多重比较结果表明,L-2与L-1、
L-3之间差异极显著,L-2与L-4之间差异显著,L-1与L-3、L-4之间,L-3与L-4之间差异不显著。可以看出,处理L-2马来甜龙竹试管苗叶片的生长情况较好。
3 结论与讨论
综合上述各处理中试管苗的平均生根数、平均株高和平均叶长数据结果的统计分析,可以得出本试验中较适宜诱导马来甜龙竹试管苗生根的培养基配方为1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5 mg/L+0.7%琼脂+30 g/L蔗糖,pH值5.8。在此培养基的诱导培养下,马来甜龙竹试管苗在生根情况及植株整体的生长情况、植株的高度和叶片长度等方面均有较大的优势。除生根率可高达85%以外,同时也更利于之后试管苗的驯化移栽。
4 参考文献
[1] 刘荣辉,杨大应,吴晓荣. 马来甜龙竹组织培养技术研究初探[J].六盘水师范高等专科学校学报,2005,17(6):10-13.
[2] 龚力波,郑思乡,肖龙骞,等.马来甜龙竹的组织培养繁殖试验[J].云南林业科技,2003(1):5-7.
[3] 苏海,钟明,蔡时可,等.马来甜龙竹的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯,2004,40(4):468-469.
[4] LIN C S,CTIANG W C.Micropropagation of Bambusa edulis through no-dal explants of field-grown culms and flowering of regenerated plantlets[J].Plant cell Reports,1998,17(8):617-620.
[5] SAXENA S.In vitro propagation of the bamboo(Bambusa tulda Roxb.)through shoot proliferation[J].Plant Cell Reports,1990,9(8):431-434.
[6] 张有珍,刘倩倩,何冬冬,等.铺地竹试管快速繁殖研究[J].浙江农林大学学报,2012(1):151-154.