精草铵膦原药高效液相色谱分析方法研究

张 寒，肖 鸣，徐 永，俞 婷

（浙江省农药检定管理所，杭州 310020)

◆农药分析◆

精草铵膦原药高效液相色谱分析方法研究

张 寒，肖 鸣*，徐 永，俞 婷

（浙江省农药检定管理所，杭州 310020)

精草铵膦是一种广谱触杀型除草剂。采用高效液相色谱法，以硫酸铜＋乙腈＋水为流动相，使用SUMICHIRAL OA-5000L为填料的不锈钢柱和二极管阵列检测器，在254 nm波长下对精草铵膦原药进行分离和定量分析。结果表明，该分析方法的线性相关系数为0.994 4，标准偏差为0.032，变异系数为0.035%，平均回收率为99.50%。

精草铵膦；原药；高效液相色谱；分析

草铵膦是由Hoechst公司开发并首先上市的高效、低毒、非选择性除草剂。其抑制谷氨酰胺合成，造成铵离子累积从而抑制光合作用，起到除草效果[1]。其多用于果园、葡萄园、非耕地等防除一年生和多年生阔叶及禾本科杂草[2]。草铵膦杀草谱广，持效期较长，可有效减少用药次数，降低人工成本，而且草铵膦对土壤、作物根系和后茬作物影响小，一定程度上缓解了百草枯毒性和草甘膦抗性的问题。精草铵膦（glufosinate-P）是在草铵膦的基础上，通过定向合成得到的草铵膦L型手性异构体，药效为草铵膦的2倍[3]。

目前关于精草铵膦原药的分析方法未见公开报道。本文采用高效液相色谱法，通过手性柱，对精草铵膦原药进行定性、定量分析。该方法操作简便，分离效果好，准确度和精密度均能达到定量分析的要求，可以作为企业生产过程质量控制和质检机构分析检测的参考方法。

1 试验部分

1.1 试剂与仪器

乙腈：色谱纯；超纯水：电阻率18.2 MΩ·cm （25℃）；硫酸铜：化学纯；精草铵膦标样（99.9%）、精草铵膦原药，浙江永农化工有限公司。

Agilent 1260高效液相色谱仪，具二极管阵列检测器和自动进样器；Agilent色谱工作站；Milli-Q reference超纯水制备系统；不锈钢色谱柱：150 mm×4.6 mm，内装SUMICHIRALOA-5000L（5μm）填充物。1.2 液相色谱操作条件

流动相制备：称取0.5 g硫酸铜，加入3 mL乙腈，用水定容至1 000 mL。流速：0.5 mL/min；柱温：室温；检测波长：254 nm；进样体积：5 μL。保留时间：精草铵膦（草铵膦L型）约3.3 min，草铵膦D型约2.9 min。

精草铵膦标样的高效液相色谱图见图1。

图1 精草铵膦标样高效液相色谱图

1.3 测定步骤

1.3.1 溶液的配制

分别准确称取精草铵膦标样和原药各0.02 g（精确至0.000 2 g），置于2个50 mL容量瓶中，用流动相溶解定容，摇匀备用。

1.3.2 测定与计算

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针中精草铵膦的响应值相对变化＜1.0%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中精草铵膦峰面积分别进行平均，按下式计算试样中精草铵膦的质量分数w（%）。

式中：A1—标样溶液中精草铵膦峰面积的平均值；A2—试样溶液中精草铵膦峰面积的平均值；m1—标样的质量，g；m2—试样的质量，g；P—标样中精草铵膦的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

通过HPLC的二极管阵列检测器（DAD）进行全波长扫描，得到精草铵膦的紫外波长扫描图。精草铵膦在225～260 nm间有较大的吸收。考虑到杂质响应值的影响，将检测波长定为254 nm。

根据精草铵膦理化性质，选择以乙腈＋水溶液为流动相，以SUMICHIRAL OA-5000L手性柱为色谱柱，将不同体积比的流动相在色谱柱上进行试验。当以0.5 g硫酸铜、3 mL乙腈用水定容至1 000 mL的混合液作流动相，流速为0.5 mL/min时，草铵膦L型与草铵膦D型能较好分离，且基线平稳，峰形对称。

2.2 分析方法的线性相关性试验

分别称取精草铵膦标样0.008 2 g、0.015 2 g、0.026 3 g、0.031 2 g，0.043 4 g于50 mL容量瓶中，按1.3方法进行测定，测定结果见表1。以精草铵膦质量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得线性方程y=98 443 x＋162.64，其线性相关系数为0.994 4。

表1 分析方法的线性关系试验结果

2.3 分析方法的精密度试验

准确称取5个精草铵膦原药试样，按1.3方法进行测定，测得精草铵膦的标准偏差为0.032，变异系数为0.035%（表2）。

表2 分析方法的精密度试验结果

2.4 分析方法的准确度试验

从已知质量分数的精草铵膦原药样品中称取5个试样，分别加入一定量的精草铵膦标样（99.9%），按1.3方法进行测定。测得精草铵膦的平均回收率为99.50%（表3）。

表3 分析方法的准确度试验结果

3 结论

试验结果表明，本方法检测精草铵膦原药有较高的准确度和精密度，线性关系良好。方法具有简单、快速、准确及分离效果好的优点，是进行产品质量检测较理想的分析方法。

[1]顾林玲,王欣欣.全球除草剂市场、发展概况及趋势(Ι)[J].现代农药,2016,15(2):8-12.

[2]佘晓云,石岩.灭生性除草剂草铵膦的应用研究[J].耕作与栽培, 2016(1):69-72.

[3]楼亿圆,林志坚,郑仁朝,等.生物法合成L-草铵膦的研究进展[J].现代农药,2009,8(3):1-4;10.

（责任编辑：顾林玲）

Analytical Method for Determination of Glufosinate-P TC by HPLC

ZHANG Han,XIAO Ming*,XU Yong,YU Ting
(Institute for the Control of Agrochemicals of Zhejiang Province,Hangzhou 310020,China)

Glufosinate-P is a kind of non-selective contact herbicide,used for control of a wide range of weeds.A method for separation and quantitative analysis of glufosinate-P was established by HPLC,using acetonitrile,copper sulphate and water as mobile phase,on SUMICHIRAL OA-5000L chiral column and DAD at 254 nm wavelength.The results showed that the linear correlation coefficient of the method was 0.994 4,the standard deviation was 0.032,the variable coefficient was 0.035%,and the average recovery was 99.50%.

glufosinate-P;TC;HPLC;analysis

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.02.010

2016-08-09；

2016-09-08

张寒(1988—)，男，浙江省丽水市人，硕士研究生，主要从事农药质量检测工作。E-mail：figols@126.com

肖鸣（1984—），女，杭州市人，中级农艺师，主要从事农药质量检测工作。E-mail：123481180.xm@163.com