不同储存条件对血常规检测结果的影响

刘茜，豆虎

(重庆医科大学附属儿童医院检验科·重庆市儿科学重点实验室·儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室，重庆 400014 )

不同储存条件对血常规检测结果的影响

刘茜，豆虎

(重庆医科大学附属儿童医院检验科·重庆市儿科学重点实验室·儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室，重庆 400014 )

目的：了解静脉血标本放置时间及储存温度对主要检测结果的影响。方法：本院住院患儿EDTA-K2抗凝静脉血标本77例，其中20例放25 ℃室温，20例放4 ℃冰箱，17例放10 ℃坏境，20例放37 ℃水浴箱，每个标本于2 h、4 h、6 h、8 h、24 h、48 h、72 h用Sysmex-XE2100全自动血液分析仪进行检测仔细记录不同时段测定结果并进行统计学分析。结果：室温条件下，仅血小板平均体积在6 h检测结果变化有显著性差异(P<0.05)，白细胞计数于24 h、红细胞计数于24 h、血小板计数于24 h、红细胞压积于48 h开始有显著性差异(P<0.05)，血小板平均体积和血小板分布宽度的测定结果最不稳定。4 ℃条件下标本可稳定更长时间,10 ℃条件下相对稳定，37 ℃水浴箱各个项目都不稳定。结论：血细胞计数应在6 h内尽快完成 ,如不能及时送检或检测，应该保存在4 ℃条件下。

血液标本；保存时间；存放温度；血细胞计数

随着血液检验技术的发展及全自动血液细胞分析仪在临床上的推广使用，血常规检验被临床广泛应用[1]。其准确性直接影响临床诊断，因此对于血液标本的存放时间和条件都提出了更高的要求。血常规的检测一般受到温度、时间、抗凝剂、采集方式等多种因素的影响[2]。这就要求必须对标本层层把关，以便得到最准确的实验结果,本实验旨在研究放置时间及储存温度对主要检测结果的影响，分别对4个储存温度下的静脉血标本进行检测和对比，初步得出静脉血标本的放置时间及存储温度对检测结果的影响，为标本保存或结果复查做出指导。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 重庆医科大学附属儿童医院住院部患儿标本77例，年龄2个月～12岁 ,性别未计。

1.1.2 仪器与试剂 Sysmex-XE2100全自动血细胞分析仪及配套试剂和质控物。近几年参加卫生部室间质评成绩优秀。静脉血采血管为BD紫头管。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 静脉血穿刺采集血液标本1.5～2 mL,采血后将紫头真空采血管颠倒7～8次，使抗凝剂与血液充分混合。

1.2.2 检测方法 77例标本分为4组。室温组:标本20例,每份标本在送往检验科后即刻、2 h、4 h、6 h、8 h、24 h、48 h、72 h进行测定；4 ℃组标本20例、10 ℃组标本17例、37 ℃组标本20例,操作同室温组。每次检测完毕立即存入4 ℃冰箱、10 ℃环境、37 ℃水浴箱中，下次检测前10 min拿出，恢复至室温再检测。本次试验探讨项目包括白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞分布宽度(RDW)、血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)10项，检测结束后做好记录。

1.3 统计学分析

各个检测项目均以即刻检测结果作为参考，进行组间配对t检验，以P<0.05表示为差异具有统计学意义。

2 实验结果

2.1 室温条件下

WBC在即刻、2 h、4 h、6 h、8 h的结果变化率较小，总体趋于稳定，即刻过后，结果有增高的趋势，1～4 h检测最稳定，直到24 h开始，差异具有统计学意义(P<0.05)。PLT在所统计的72 h内，随着时间延长先逐渐降低后缓慢升高，但波动的趋势不大，直至第24 h，差异具有统计学意义(P<0.05)。MPV随放置时间延长逐渐增高，在6 h时检测结果与即刻测定相比便具有显著性差异(P<0.05)，是最先出现统计学意义的项目。PDW可以稳定48 h。RBC总趋势为下降，24 h内变化无统计学意义，直到24 h时差异开始具有统计学意义(P<0.05)。MCV可以稳定24 h，RDW可以稳定48 h。MCH 随时间的变化也不大，可以稳定48 h。HCT在72 h内总体呈下降趋势，48h内无统计学意义，48 h开始差异显著。HGB总体变化不大 72 h时差异开始显著。见表1-表3。

2.2 4 ℃冰箱组

结果稳定时间较长，WBC于72 h，PLT于72 h，MPV于24 h，PDW 于48 h，RBC于72 h，MCV于72 h开始有显著差异(P<0.05)。RDW在72 h内差异均无统计学意义。MCH 72 h内均稳定。HCT 72 h随着时间延长无规律波动，变化均无统计学意义，结果也较为稳定。HGB 72 h内结果变化较小，结果稳定。见表1-表3。

2.3 10 ℃保存条件下

标本相对较稳定，WBC于72 h， PLT于48 h，MPV于24 h，PDW 于48 h， MCV于72 h开始有显著差异(P<0.05)。RBC随着时间延长有轻微减少，72 h内差异不大，无统计学意义；RDW、 MCH、HCT在72 h内差异均无统计学意义，结果也较为稳定。HGB 72 h内结果变化较小，结果稳定。见表1-表3。

2.4 37℃水浴箱组

各项检测指标都不稳定， WBC呈下降趋势，于8 h与即刻检测有统计学意义； PLT随着时间逐渐下降，2 h有显著差异，MPV、PDW于48 h后有统计学意义； RBC于8 h，MCV于2 h，HCT于2 h,MCH于8 h,RDW于2 h开始有显著差异(P<0.05)。HGB总体变化不大，72 h差异有统计学意义。见表1-表3。

表1 WBC、HGB及HCT检测结果与即刻检测差异分布

注：“*”表示该检测结果与即刻检测有统计学意义(P<0.05)；“-”代表此刻检测结果与即刻检测无统计学意义(P>0.05)。

表2 PLT及相关参数检测结果与即刻检测差异分布

注：“*”表示该检测结果与即刻检测有统计学意义(P<0.05)；“-”代表此刻检测结果与即刻检测无统计学意义(P>0.05)。

表3 RBC及相关参数检测结果与即刻检测差异分布

注：“*”表示该检测结果与即刻检测有统计学意义(P<0.05)；“-”代表此刻检测结果与即刻检测无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

在本次研究中，随着时间的延长，标本检测结果在不断地变化。时间越长，血细胞形态改变的可能性就越大，使检测指标出现误差[3]；另外血细胞的代谢活动、微生物、化学反应都会对血液样本质量造成很大的影响[4]。无论是在中低温(4～25 ℃)，还是在高温(37 ℃)条件下，血小板相关参数变化最快，特别是在高温(37 ℃水浴箱)条件，PLT在2 h时与即刻有显著统计学差异，说明血小板相关参数最易受温度和时间的影响。这与艾卫军等[5]研究相符,可能与血小板本身生理机制和结构有关[6]，血小板离开机体环境后，由于渗透压、温度、抗凝剂及试管壁等影响，形态结构发生改变，随着保存时间的延长，标本出现巨大PLT，血小板聚集， PLT碎片，裂片红，而血液分析仪根据电阻抗原理无法正确区分这些成分，从而导致血小板相关参数不稳定，此种情况只有靠有经验的检验者在显微镜下区分。

红细胞在不同存放条件下，相关参数也在不断的变化。红细胞处在不同的渗透压皱缩变形、肿胀、破碎，不被仪器识别，导致计数结果下降[7]。红细胞皱缩、红细胞碎片、红细胞肿胀导致红细胞大小不均，使得红细胞分布宽度(RDW)变大、MCV也不断变化,RDW结合MCV对贫血分类诊断和鉴别有重要临床意义[8]。血红蛋白(HGB)较稳定，变化很小,是血常规中最为稳定的一个指标。

相比血小板，白细胞分类及计数相对比较稳定，在中低温组中白细胞计数及分类在24 h内无明显影响。虽然白细胞随放置时间的延长受渗透压的影响，体积也会发生不同程度的改变，但Sysmex-XE2100全自动血细胞分析仪的白细胞计数和分类，采用的是半导体激光流式细胞技术，结合核酸荧光染色技术[9]，这一技术有效地保证了白细胞参数的基本稳定。在室温和37℃条件下，白细胞计数分别可以稳定24 h和8 h，部分标本在48 h和24 h出现无法分类的情况。随着时间的延长，细胞分层，分层的细胞产生不同代谢产物，形成一个微环境，同时白细胞体积也会发生一些变化[10]；再者，本次标本主要来自于12岁以下的儿童，淋巴细胞较成人明显偏高，这是儿童正常生理现象。淋巴细胞在不同时间温度下，细胞核会发生变化，出现变异淋巴细胞[11]。而血液分析仪不能辨认这些变性的白细胞，从而无法准确分类。

不同的温度下标本稳定性也不一样，4 ℃和10 ℃标本都可以稳定24 h，但10 ℃时白细胞和血小板先于4 ℃开始有统计学差异。室温下标本放置6 h，各项检测参数还比较稳定，结果无显著差异，6 h开始MPV有显著差异，即血小板的形态已开始发生变化；24 h内除MPV外，其余各项检测结果均无显著性差异。37 ℃保存条件下标本最不稳定，但冷凝集标本在37 ℃短时间的温育，其血常规结果有所改善[12]。保存条件对血液标本中的各指标有重要的影响，良好的保存条件能减少其他因素的影响。送检过程的环境温度最好小于25 ℃，及时送检，能够有效的控制血常规测定中白细胞、红细胞、血小板及其各项参数的稳定性。因此血液标本采集后，应尽量缩短送检时间尽快检测，保证结果的准确性[13]。如果因为种种原因不能及时送检或不能及时检测，应将标本保存于低温条件下，待问题解决后立即检测。

综上所述，血常规标本在室温(25 ℃左右)下，血常规指标除MPV外均可稳定24 h，24 h内可以进行除MPV外其余指标的复检。在低温(4～10 ℃)条件下，血常规各项指标相对稳定，更有利于标本的保存。因此，血液分析静脉血标本必须在6 h内完成分析与复检，室温保存最多24 h，且只能进行部分指标的复检；4 ℃冰箱要求保存72 h，但只能进行HGB的复检及标本的溯源。

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(学术编辑：赵明才)

Effects of different storage conditions on blood routine test

LIU Xi， DOU Hu

(ClinicalLaboratoryinChildren'sHospitalofChongqingMedicalUniversity,KeyLaboratoryofPediatricsinChongqing,MinistryofEducationKeyLaboratoryofChildDevelopmentandDisorders,Chongqing,400014,China)

Objective：To investigate the effect of sample storage time and temperature on results of automatic blood sample analysis.Methods:77 cases blood samples with EDTA-K2 anticoagulant venous in our hospital,including 20 cases of 25 ℃ at room temperature,20 cases of 4 ℃ refrigerator,17 cases 10 ℃ environment,20 cases of 37 ℃ water bath box,each specimen use Sysmex-XE2100 automatic blood analyzer to detect carefully recorded results and statistical analysis at 2 h,4 h,6 h,8 h,24 h,48 h,72 h .Results:When whole blood specimens were stored at normal room temperature only MPV had significant difference (P<0.05) at 6 h.White blood cell count in 24 h,the red blood cell count in 24 h,the platelet count in 24 h,the red blood cells deposited in 48 h began to have significant difference (P<0.05),the determination results of mean platelet volume and platelet distribution width of the most unstable,when blood specimens were stored at 4 ℃,the objectives may be stable for a longer time,at 10 ℃,the specimen was relatively stable;and under 37 ℃ every project was not stable.Conclusion:Blood routine analysis should be completed with in 6 h.,if not ,it should be stored at 4 ℃condition.

Blood sample;Storage time;Storage temperature;Blood cell count

10.3969/j.issn.1005-3697.2017.01.014

重庆市卫生局课题(2012-2-100)

2016-09-21

刘茜(1988-)，女，检验师。E-mail:liuxi19881109@foxmail.com

豆虎,E-mail:375009808@qq.com

时间：2017-3-6 21∶07

http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170306.2107.028.html

1005-3697(2017)01-0049-04

R446.11

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