转移因子的研究进展

2017-04-05栾业俊仲亚娜黄迪海张再辉秦卓明

山东畜牧兽医 2017年8期

成杰栾业俊仲亚娜黄迪海张再辉秦卓明⑥ 刘霞*

文献综述

转移因子的研究进展

成杰①栾业俊②仲亚娜③黄迪海④⑤张再辉④⑤秦卓明④⑤⑥刘霞④⑤*

（①山东省龙口市诸由观镇畜牧兽医工作站 265701 ②山东省龙口市七甲镇畜牧兽医工作站③山东省龙口市新嘉街道畜牧兽医工作站 ④山东省健牧生物药业有限公司山东济南⑤山东省济南市动物生物药品工程技术研究中心 ⑥山东省农业科学院家禽研究所山东济南）

转移因子是由多肽和低聚核苷酸组成的一类可溶性、可透析、可超滤的小分子多肽。可传递免疫信息、激发免疫细胞活性、增强机体特异性和非特异性免疫功能，对于某些病毒病、细菌性疾病、寄生虫病以及免疫缺陷病和癌症的防治发挥了重要的作用。由于其具有分子量小、无毒性、无抗原性、不引起过敏反应和不产生对抗抗体且可超越种系界限应用等优点，因而是一种具有广泛应用前景的免疫增强剂。本文着重介绍转移因子的成分、研制方法及新剂型的研究进展。

转移因子(transfer factor, TF)是一类具有免疫活性的可透析的小分子多肽，由活性T淋巴细胞释放，并携带有致敏淋巴细胞的特异免疫信号，并且能够将其递呈给未致敏的受体淋巴细胞，非特异性增强受体免疫功能。上世纪五十年代Lawrence等首次发现能诱导迟发型超敏反应的白细胞可透析物质(DLE)，并将这种物质称为转移因子。越来越多的研究表明TF作为是一种免疫活性肽，具有传递免疫信息、激发免疫细胞活性、增强机体特异性和非特异性免疫功能等作用[1]，故在临床应用中常用作免疫增效剂，对于某些病毒病、细菌性疾病、寄生虫病以及免疫缺陷病和癌症的防治发挥了重要的作用。

1 TF的活性成分

（1）TF是由多肽和低聚核苷酸组成的一类可溶性、可透析、可超滤的小分子多肽。分子量约为2000～5000道尔顿，能自由通过半透膜。TF不被胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、DNA酶和RNA酶等分解，对紫外线有吸收特性，不耐热。由于TF分子质量小、无毒、不具有抗原性、应用后不刺激机体产生抗体、不产生过敏反应。（2）不同物种来源的TF无种属特异性，因此人与动物之间均可以通过TF交叉转移细胞免疫[4]。凌红丽[5]等采用Sephadex G-25柱层析法分离提取鸡、猪脾转移因子各组分，发现不同来源的猪脾和鸡脾TF各组分及原液对正常小鼠的淋巴细胞均表现出一致的免疫活性。赵满达[6]等研究表明不同动物来源TF对樱桃谷鸭T细胞的转化增殖均有显著的影响。（3）山东省健牧生物药业有限公司采用液相色谱－质谱联用法(LC-MS法)初步揭示转移因子多肽组成[25]，测得多肽分子量为800-7476Da，含有581种多肽，包括T细胞凋亡抑制相关蛋白(TIAL1)、胸腺肽β4 (TMSB4X)、杀菌/通透性增加蛋白(BPIL3)、抑制因子活化蛋白(RAP1Ab)、抗菌肽(Cathelicidin-2)、细胞色素C(Cytochromec)等多种生物活性蛋白。

2 转移因子的功能与作用机理

2.1 增强细胞免疫功能细胞免疫主要通过T淋巴细胞实现，马风龙[7]等发现鸡TF与新城疫I系活疫苗和油乳剂灭活苗在首免和加强免疫时均具有协同作用，能显著提高免疫接种鸡淋巴细胞转化率，证明鸡脾脏TF对鸡的细胞免疫有促进作用，可促进T淋巴细胞的增殖与成熟，增强机体的细胞免疫应答能力。淋巴细胞转化率的提高，表现为E玫瑰花环形成率显著提高，白细胞吞噬能力增强和游走活性提高，外周血液T淋巴细胞比值(Tc)升高以及受体的抗体水平增高等。张光曙等[8]研究表明，经ConA或LPS诱导的小鼠脾细胞受胎盘特异性TF作用后，可增强T细胞的增殖效应。陈德坤等[9]研究发现，给健康小鼠注射和口服猪脾脏TF可增强外周血液中性粒细胞对葡萄球菌的吞噬率和腹腔巨噬细胞对红细胞的吞噬率。张佩君等[10]把不同浓度的猪转移因子加入不同时期分离的犬外周血中粒细胞与E.coli共培养，结果发现猪转移因子不仅能够增强犬中性粒细胞的杀茵活性，还能增加犬外周血中性粒细胞的数量。

2.2 增强体液免疫功能大量的试验研究表明，转移因子对活疫苗和油乳剂灭活苗均具有协同作用，能显著提高机体细胞免疫水平，缩短机体免疫应答期，促进抗体的产生，并延长抗体高峰期，使之维持更长的时间。PTF与猪细小病毒油乳剂疫苗同时使用，能增强小鼠免疫机能，血清中IFN-γ、IL-6和IL-4水平上升，因此TF可做为疫苗的有效佐剂[11]。孙宏鑫等研究表明禽流感病毒H5N1型特异性转移因子对禽流感病毒灭活疫苗具有明显的增效作用，且发现口服途径给药的疫苗免疫增效作用优于注射途径给药[12]。黄丽华等[13]用蛋白胨致热法建立小鼠发热病理模型探讨免疫增强剂抗流感特异性转移因子(STF)对试验性小鼠发热的预防效果。结果发现经STF处理的小鼠血清检测有到抗流感抗体的产生，证明抗流感特异性转移因子对试验性发热小鼠有预防作用。

2.3 促进细胞因子的活性转移因子是一种新型细胞因子类佐剂，不仅可以调节淋巴细胞mRNA的合成，调节机体免疫功能，还可以促进其他细胞因子的合成和活性。TF可以促进巨噬细胞呈递抗原，刺激巨噬细胞产生淋巴细胞激活因子，诱导巨噬细胞产生干扰素。张方信等[14]应用特异性TF免疫治疗肿瘤病人后发现各细胞因子活性显著增强，WBC明显增加，且IL-1、IL-2活性及WBC的增加明显高于化疗者。表明TF作为细胞调节剂，可有效调节肿瘤病人的细胞因子水平。

2.4 促进生长作用王建文等[15]用0.5～1.0ml TF粗制品给雏鸡口服，7d后与未TF的雏鸡相比较，增重明显，因此口服TF能显著促进雏鸡生长发育。江青艳[16]等在试验中发现，注射脾脏TF对粤黄鸡增重也有明显的效果。同时，注射不同浓度TF的鸡组在8周龄时，血液中T4和GH的水平均高于对照组，可能与脾脏转移因子促进粤黄鸡的生长发育有关。

3 转移因子在畜禽疾病防治中的应用

3.1 TF在猪病防治中的应用转移因子对猪的各种细菌、病毒性疾病的治疗效果显著，可以根据情况应用转移因子治疗猪的各种疾病。张广英[26]等报道了正常P-TF与特异性P-TF不仅对增加T细胞比值有显著作用，而且对提高受体的抗体水平亦有显著作用，表明P-TF具有提高受体细胞免疫和体液免疫的作用。郭定宗[17]等用猪传染性胃肠炎弱毒疫苗分2次接种猪，取其脾脏制备特异性猪传染性胃肠炎转移因子TGE-TF，试验结果表明，TGE-TF能非特异性地增强小鼠吞噬细胞的吞噬功能。李犹平等[18]通过健康牛脾制备的转移因子与猪繁殖与呼吸综合征疫苗联合应用具有协同作用，可显著提高机体的免疫功能，提高疫苗免疫后的抗体水平。乔宏兴等[19]对猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎分别使用TF(0.2、0.1、0.05ml/ kg)和氟本尼考与阿托品进行治疗，结果表明使用0.1ml/kg TF的剂量效果较好。而体外抑菌试验结果表明，转移因子对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌具有明显的抑菌作用，说明转移因子对细菌病的预防和治疗也能起到一定的作用。

3.2 TF在禽病防治中的应用（1）王成森[20]将猪脾转移因子与鸡新城疫疫苗配合应用，结果表明应用TF试验组的淋巴细胞转化率和血清抗体效价与单独接种疫苗对照组相比较，差异显著，说明TF与疫苗配合应用时具有协同作用，可显著地提高机体的细胞免疫和体液免疫功能，增强疫苗的免疫效果。（2）李富桂[21]等研究不同免疫增效剂对鸡新城疫免疫效果的差异，发现鸡TF和灵芝的效果最明显，提高了疫苗对动物疾病防治机体的保护率，且对减蛋综合症具有很好的作用，因此在临床上首选鸡TF为免疫增效剂。王进轶等[22]制备新城疫特异性转移因子(ND-STF)单独或与LaSota弱毒疫苗协同感染试验鸡，结果表明ND-STF能够增强鸡的细胞免疫和体液免疫能力，且口服效果最好。人工感染禽流感，同时肌注转移因子，淋巴细胞的转移率明显高于对照组，而抗体产生的也更快更高，且临床症状减轻，死亡减少，病程缩短。

3.3 TF在其他动物防治中的作用人用转移因子对幼年实验猕猴的部分生理生化指标有显著的影响，为合理利用TF和开展动物专属制品研究提供了基础[23]。张广英等[24]用羊毛脂、液体石蜡制成一定比例再与猪转移因子混合接种家兔，发现应用 TF－P 预防兔瘟获得满意的效果，从而为兔瘟的防治开辟了新的途径。

4 转移因子研制和新剂型研究进展

4.1 转移因子研制方法目前国内生产注射用猪脾转移因子的厂家很多，提取工艺也不尽相同，有超离心、超滤、透析冻干、葡萄糖凝胶层析、冷乙醇抽提等方法。国外已上市的转移因子产品剂型有胶囊、粉针剂、水针剂、口服液、嚼片、口腔喷雾剂及外用软膏等。而国内上市的产品仅有粉针剂、水针剂、胶囊、口服溶液。

4.2 转移因子在兽医领域中的应用现状及应用前景 TF作为一种免疫制剂，其临床效果已得到肯定。大量的试验研究表明，转移因子对活疫苗和油乳剂灭活苗均具有协同作用，能提高机体细胞免疫水平，缩短机体免疫应答期，促进抗体的产生，并延长抗体高峰期，使之维持更长的时间。转移因子安全，作用迅速，效果显著，无药物残留，无明显毒副作用，无抗原性，再加上来源广，价格便宜等优点对于目前用抗菌素或免疫球蛋白无法控制的某些动物疾病的防治发挥了重要的作用。

家禽脾脏转移因子作用效果与哺乳动物的无显著差别，我国肉禽养殖业发达，禽类的脾脏在屠宰中一般作为废物处理。因此，开发禽类的转移因子产品有着极为广阔的市场前景。TF在动物疾病防治中的巨大作用，将使其在兽医临床上的应用更加广泛，将对我国畜牧业的发展发挥更大的作用。

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