新囊宝（鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗La Sota株 + HQ株）对1日龄白羽肉鸡的免疫效果试验

王建栋/ 唐山市动物卫生监督所

郑健稳 张立颖/唐山市滦县动物疫病预防控制中心

新囊宝（鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗La Sota株 + HQ株）对1日龄白羽肉鸡的免疫效果试验

王建栋/ 唐山市动物卫生监督所

郑健稳 张立颖/唐山市滦县动物疫病预防控制中心

法氏囊病是一种急性高度接触性传染病，能引起雏鸡的免疫抑制，破坏法氏囊上B淋巴细胞的形成，目前成为危害养鸡业的主要疫病之一。由于法氏囊病毒的特殊性，强毒性疫苗引起的免疫抑制经常发生，增加了本病的预防难度。新囊宝作为一种新型全病毒灭活疫苗，可以减少鸡群排毒和环境污染，消除免疫抑制，为评价本疫苗在白羽肉鸡的免疫效果，本试验分别对新囊宝疫苗免疫后抗体水平监测及攻毒保护，现报告如下。

一、材料及方法

1.试验用疫苗。新囊宝（鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗La Sota株+HQ株）2016002批，由辽宁益康生物股份有限公司生产，1日龄白羽肉鸡颈背部皮下免疫0．2 mL。

新支剋星（鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗）2016004批，辽宁益康生物股份有限公司生产。

2.试验用鸡。1日龄白羽肉鸡，由沈阳耘垦牧业提供，按实验方案分组、免疫、采血及攻毒，其中攻毒试验鸡在负压隔离器内喂养。

3.免疫程序。1日龄颈背部注射新囊宝（新城疫、传染性法氏囊二联灭活疫苗），每只鸡0．2 ml，同时用新支 星每只鸡1羽份气雾免疫；7日龄，新流二联灭活疫苗每只鸡0．3 ml，新支剋星点眼。

4.抗体测定方法。免疫后按实验方案定期采血测定抗体。ND HI抗体测定按“中国兽药典”附录进行；IBD微量中和试验参照“中国兽药典”附录，在96孔微量细胞培养板上进行，采用固定抗原稀释血清的β微量法，抗原用200个TCID50/0．1ml，阴性血清的几何平均效价应≤1∶8。IBD定量琼扩试验按常规方法进行，中央孔加抗原，周边孔加倍比稀释的血清，血清原液为20，血清1∶2稀释为21。为了提高HI试验、中和试验或琼扩试验在不同实验条件下测定结果的可比性，使之逐步标准化，测定时一律采用了ND和IBD定量参照血清。

5.攻毒试验。按试验方案进行攻毒 IBD攻毒试验时，免疫组、对照组各取10只采血测定中和抗体，经口接种鸡传染性法氏囊病病毒BC6-85株强毒，每只0．2 ml（含2×104BID50），72 h后全部剖杀，检查免疫组和对照组法氏囊病的病变，要求对照组鸡至少9/10有病变。

6.实验方法。1日龄白羽肉鸡分为2组，新囊宝免疫组7 000只，于1日龄每只注射二联灭活疫苗0．2 ml；同时设不免疫对照组200只。1日龄起每隔7天采血20只，进行新城疫HI抗体检测和法氏囊的中和抗体检测，并于28、42、56日龄时分别用BC6-85株强毒株进行攻毒。免疫组囊体比的检测，于7日龄、14日龄、21日龄、28日龄、35日龄各取5只鸡称体重后放血致死，取法氏囊，称法氏囊重量，计算囊体比。（囊体比=囊重/体重X100）

二、结果

1.1 日龄白羽肉鸡免疫二联苗免疫效果。1日龄有母源抗体的白羽肉鸡，按试验方案分别进行二联苗和活毒疫苗的免疫，且每隔7天采血测定抗体，结果见表1、2。

表1 1日龄免疫新囊宝后新城疫HI抗体监测结果（单位Log2）

表2 1日龄免疫新囊宝后法氏囊中和抗体监测结果（单位Log2）

2.1 日龄白羽肉鸡免疫后免疫攻毒结果(见表3 )。

3.免疫组囊体比测定结果(见表4 )。

表3 BC6-85株强毒株攻毒保护率

表4 免疫组囊体比检测结果

三、讨论与分析

1．新囊宝免疫母源抗体阳性的1日龄白羽肉鸡，前期表现与非免疫对照组相似，母源抗体水平缓慢下降，随着时间的延长，免疫组产生主动免疫，抗体水平迅速上升，到28日龄时已表现了较高抗体，至42日龄升至14．79 log2；从28日龄到56日龄，攻毒保护都在9/10以上，而对照组全部不保护，作为一种新型全病毒灭活苗，新囊宝表现了良好的免疫效果。由于采用1日龄注射，配合新支克星的喷雾使用，大大减化免疫程序，降低劳动强度，更适合肉鸡笼养模式的推广使用。

2．免疫组囊体比测定数据表明，鸡群法氏囊大小均无明显变化，发育状况良好，表明新囊宝作为一种灭活苗对雏鸡法氏囊没有任何损伤和毒害作用。鸡法氏囊做为鸡中枢免疫器官，在体液免疫中发挥着决定性作用，其健康发育对鸡群在新城疫，传支，腺病毒等其他疫苗的免疫应答影响巨大。相比较传统的鸡法氏囊中等毒力活疫苗以及抗原抗体复合物疫苗，新囊宝的使用对于鸡群后期免疫抑制的控制更有积极意义。

3．传染性法氏囊炎病毒是一种无囊膜的病毒，对外界温度，化学消毒剂抵抗力有很强的抵抗力。在传统中等毒力以上活疫苗以及抗原抗体复合物疫苗的使用，鸡群体外排毒造成了养殖环境的持续污染，并随着病毒的变异，造成法氏囊病在一些养殖场循环发生，难以控制和消灭。新囊宝灭活苗的使用，减小了病毒在场内循环扩散，杜绝了对外环境的微生物污染，配之以科学免疫的程序和综合性防控措施，可以逐渐实现鸡场的法氏囊病毒净化。

（略）