玉簪繁殖与组织培养技术的研究

隋昌海+王琳+徐丽萍+李国华

摘要：玉簪是重要的园林绿化植物，本文概述了玉簪的繁殖方式及影响玉簪植物组织培养的各种因素。主要评述了玉簪组织培养过程中的外在因素和内在因素两方面影响。为大量获得同步化玉簪苗木提供了新的思路。

关键词：植物组织培养；愈伤组织；玉簪

中图分类号：S682.19文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2016） 10（c）-0000-00

玉簪是重要的荫生地被绿化植物，具有丰富的叶型、株型，且部分种（品种）的花拥有芳香气味，是优秀的城市生态、园林建设植物。

野生玉簪属植物资源主要存在于东亚的温带与亚热带地区，原产于我国的东部和南部及朝鲜、日本和俄罗斯远东地区。目前分布情况是仅在北半球的亚温带和亚热带地区连续分布，主要包括中国、日本和朝鲜半岛，俄罗斯远东地区。

1.玉簪属植物常规繁殖方式

1.1种子繁殖

玉簪属植物种子结实率低，我国东北地区一般不结种子。种子萌发率在80%-85%之间，幼苗需在无阳光直射处生长。种子繁殖的植株3-4年才能开花，繁殖速度慢，因此实际生产中基本不以种子进行繁殖。

1.2分株繁殖

在玉簪的生产中最常用分株繁殖。一般玉簪每年可分蘖3-5个芽，分株时要将植株整体挖起，以一个芽或者2-3个芽为一株切分并栽培，栽培后要浇透水，并保持土壤湿而不涝。当年即可开花。但季节影响较大，只能于春秋两季进行。目前还有罗斯法、割冠法等。分株法速度慢使其无法短时间提供大量种苗。

2.植物组织培养

植物组织培养是指在无菌的条件下，以植物的组织、器官或者原生质体为外植体，在人工培养基中进行培养，调整适当的培养条件，短时间内生长成完整植株的过程。利用植物组织组培技术进行植物快繁，具有的优势明显，①能高度保持遗传性状稳定，②繁殖系数高，③生产周期很短，④生产过程中占地面积小等，该技术在花卉植物生产中受到越来越多的重视。

3.玉簪组培的影响因素

玉簪离体培养时影响因素众多。根据文献报道，分为外在与内在两种因素，外在因素主要有培养基成份、激素种类与用量等方面；内在因素主要有外植体取材部位、取材时间等。

3.1外在因素

3.1.1 培养基选择 培养基种类的选择直接决定了植物组织培养的成败，不同种类的植物需要使用不同的培养基。目前常用的基本培养基包括B5、N6、SH、White及MS等。不同培养基的主要区别是无机盐含量不同，选择时主要关注其离子的种类以及浓度，特别是硝态氮氨态氮的比例。植物组织培养中最常用的是MS培养基，MS的特点是钾、氮、硝酸盐、铵盐含量高。文献报道玉簪的组织培养多以MS培养基为主。

3.1.2 激素的选择 植物组培过程中，激素的种类、组合及使用浓度发挥着不同的效应，文献报道，玉簪的组织培养的过程中，激素较常用的细胞分裂素有KT-30、BA、TDZ，ZT。常用的生长素有2，4-D、IBA、NAA、IAA。

玉簪的组培中最常用的是BA与NAA组合。如郝砚英等以花叶玉簪甜心、王冠以及法兰西等的芽为外植体进行培养使用的BA与NAA组合。顾德峰等以白玉簪的茎芽为外植体，使用ZT、BA与NAA三种激素组合进行诱导增殖。冯慧等利用法兰西和白玉簪的花作为外植体，用了BA与NAA。王春婷发现对芽、幼花及花葶的诱导诱导和增殖，最佳的激素也是BA与NAA的组合。张洪娣等以紫萼根茎为外植体进行愈伤组织的诱导及分化，发现BA、NAA及2，4-D是最适当的激素组合。

3.1.3 培养条件 培养条件主要包括外在的环境因素及内在的继代周期和继代次数，环境因素主要有光照强度、温度、pH、湿度等。光的主要作用是在培养过程中的形态建成，其中光照强度、光照时间的不同会对外植体材料的培养产生不同的影响，文献指出应根据培养材料的不同，选择不同的光照时间和光强进行培养。大多数植物材料适宜的培养温度约24±2℃。培养基中琼脂用量，直接影响培养瓶中的湿度大小，并影响苗的生长，外植体材料的大小，光照强度与时间及温度的高低等都是影响瓶内湿度的重要因素。培养瓶内湿度太大培养物容易出现玻璃化现象，或者抑制培养材料生长，故应该控制瓶内湿度。瓶内的空气质量及组成直接影响材料的生长及分化，幼苗在瓶内长时间生长会出现生长缓慢甚至叶片发黄脱落，这是由于瓶内的乙烯累积过多造成的。还有的材料继代后或者继代培养时间长些会出现褐化死亡，这主要是培养基中累积的醌类物质对材料的毒害作用引起的。一般情况下，继代周期的延长和继代次数的增加会导致变异频率的上升。

3.1.4 污染的影响 污染主要分为细菌性污染和真菌性污染。细菌性污染在培养的1-3d即可发现，真菌性污染一般3d-15d才有症状出现，主要由霉菌引起。操作不规范、接种室空气不清洁、外植体消毒不彻底、培养基灭菌不完全、接种用具灭菌不彻底、外植体含有内源真菌等均可引发污染。这类污染可通过规范的操作及调整外直体灭菌时间来避免。

3.2内在因素

3.2.1 基因型的影响 在植物组织培养的过程中发现，不同基因型的培养材料在诱导及增殖过程中所需要的激素浓度不同。以3个玉簪品种的花蕾建立快繁体系的研究中，杨丹等发现不同品种在增殖过程中最佳激素配比不同，最佳生根配比也不同。魏进莉等以2个品种大花萱草的花梗、花蕾为外植体，研究其组织培养的最佳激素配比，发现品种不同在愈伤增殖及芽形成过程中对激素的配比需求也不同。因此，玉簪的组织培养中花叶嵌合体品种不宜使用叶片和花序为外植体，而应采用茎尖或腋芽作为外植体，对普通绿叶品种来说不存在这种问题。

3.2.2 外植体的选择与取材时期 在组织培养过程中，最好选择生长旺盛、木质化程度低、具有较强分化能力的幼嫩外植体。文献报道玉簪最早使用的外植体是腋芽，后来发展到以花器官（花蕾、花葶、子房、花梗）、胚、叶片等为外植体进行组织培养，且都成功获得培养体系。

4.展望

近年来随着对植物组织培养技术的发展，特别是对玉簪属植物组织培养的研究改善了玉簪繁殖的瓶颈，提高了玉簪繁殖的速度。目前高速发展的植物组织培养技术为玉簪大量获得同步化苗木的繁殖提供了新的研究思路了和广阔前景。

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