参梅健胃胶囊制备工艺研究

陈衍斌 张晓红 刘 峰

(1 陕西国际商贸学院，咸阳，712000； 2 陕西步长制药有限公司，西安，710075)

参梅健胃胶囊制备工艺研究

陈衍斌1,2张晓红2刘 峰1,2

(1 陕西国际商贸学院，咸阳，712000； 2 陕西步长制药有限公司，西安，710075)

目的：对参梅健胃胶囊制备工艺进行研究。方法：采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，以挥发油收率为指标，考察浸泡时间、加水量、蒸馏时间对提取工艺的影响。采用L9(34)正交试验，以出膏率、柚皮苷含量为考察指标，对水煎提取工艺的主要因素—加水量、煎煮次数、提取时间进行考察。结果：药材加水5倍，浸泡4 h，蒸馏7 h提取挥发油；水煎工艺为煎煮2次，加水量分别为6倍、4倍，时间为2 h。结论：研究结果能够作为参梅健胃胶囊的制备工艺，并可以应用于产业化中。

参梅健胃胶囊；制备工艺；正交试验

慢性胃炎是临床最常见的疾病之一，也是中医治疗的优势病种[1-3]。中医辨证多为胃脘痛，可见于任何年龄段，该病不但危害人类身体健康，更严重影响了患者的生活质量。胃脘痛属于慢性疾病，反复发作，以肝胃不和以及脾胃气虚、胃阴不足最具代表性[4-7]。参梅健胃胶囊由党参、白芍、肉桂、枳壳等14味中药组成，功能主治为健脾益气，温中和胃，行气止痛，临床上主要用于慢性浅表性胃炎(胃脘痛脾胃虚寒证)。该方为中国中医研究院名老中医经验方，临床应用治疗胃脘痛数十年，疗效显著。为更广泛地在临床应用，经过系统研究，将其开发为便于服用的胶囊制剂，为广大胃脘痛患者提供安全有效治疗药物。

本方由14味中药组成，根据各药材中所含的成分与功能选择不同的工艺，并选定不同的考核指标[8]。其中白芍等3味药材以细粉入药，肉桂等8味药材均含有挥发油，需要提取挥发油后与党参等3味药材进行合并煎煮提取。

1 材料与方法

1.1 实验处方 由党参、白芍、肉桂、枳壳等14味中药，均购自安徽海鑫药业有限公司，经检验，所有药材均符合《中华人民共和国药典》2010年版的各项规定。

1.2 实验仪器 粉碎机(FW135，天津市泰斯特仪器有限公司)；电子分析天平(AR1140、DV215CD，梅特勒-奥豪斯)；电子调温电热套(MH-1000，北京科伟永兴仪器有限公司)；高效液相色谱仪(2010AHT，日本岛津)；超声波清洗机(KQ-250V，江苏昆山市超声仪器有限公司)；电热恒温水浴锅(HH-6，上海浦东物理光学仪器厂)；电热恒温鼓风干燥箱(101-1BS，上海博泰)。

1.3 受试药物 柚皮苷对照品(中国药品生物制品检定研究院，110722-200610，含量测定用，纯度100%)；乙腈(色谱纯)；水(自制，高纯水)；甲醇(分析纯)；磷酸(分析纯)；聚酰胺(分析纯)。

1.4 试验方法

1.4.1 挥发油提取工艺考察 参梅健胃方中肉桂等八味药材均含有挥发油类成分，采用水蒸汽蒸馏法进行提取，考察浸泡时间、加水量、蒸馏时间3个影响挥发油提取率的主要因素，确定最佳提取工艺。

1.4.2 浸泡时间考察 按照处方比例称取肉桂等八味药材15份，每份780 g。根据经验加入7倍量水，浸泡时间分别为0 h、2 h、4 h、6 h、8 h，分别蒸馏提取挥发油，测定挥发油量。

1.4.3 加水量考察 按照处方比例称取肉桂等八味药材12份，每份780 g。加水浸泡4 h后，按3倍、5倍、7倍和10倍加水量操作并蒸馏10 h，测定挥发油量。

1.4.4 蒸馏时间考察 按照处方比例称取肉桂等八味药材30份，每份780 g。每份加水5倍量，浸泡4 h后，提取挥发油，考察加热至沸腾后2～12 h所得挥发油量。

1.5 柚皮苷测定方法

1.5.1 色谱条件及适应性 参照《中国药典》2010年版一部枳壳项下测定方法[9]。色谱柱C18(5 μm，4.0 mm×250 mm)，流动相：乙腈∶水(21∶79)，并以磷酸调pH至3。检测波长：283 nm；柱温25 ℃；流速：1.0 mL/min，理论塔板数不低于3 500。在此条件下，柚皮苷对照品与样品均可得到良好分离，缺枳壳空白样品在柚皮苷峰处无吸收。

1.5.2 对照品溶液制备 精密称取柚皮苷对照品15.5 mg，加甲醇溶解并定容至100 mL容量瓶中，得柚皮苷对照品溶液(浓度为0.155 mg/mL)。

1.5.3 供试品溶液制备[10-12]精密吸取提取液3 mL，加于已处理好的聚酰胺柱(4 g，内径1.9 cm，湿法装柱)，先以80 mL水洗脱，弃去水液后，再用100 mL甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩并定容于25 mL量瓶中，离心，滤过，作为供试品溶液。

1.5.4 标准曲线 分别精密吸取对照品溶液3、5、10、15和20 μL，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，结果见表1，以峰面积值为纵坐标(Y)，柚皮苷量为横坐标(X)，计算回归方程为：Y=1 584 222X+68 102(r=0.999 7)，标准曲线见图1，柚皮苷在0.465 μg～3.10 μg范围内呈良好的线性关系。

表1 线性关系考察结果

图1 标准曲线

1.5.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，结果平均峰面积2 547 657，RSD为1.6%(n=5)，表明方法的精密度良好。

1.5.6 重复性试验 精密吸取正交试验中试验号为5的提取液5份，按供试品溶液制备方法制备，进样10 μL，测定，计算含量，结果柚皮苷平均含量为1.12 mg/mL，RSD为0.69%(n=5)，表明重复性良好。

1.5.7 回收率试验 取5号试验的提取液1.5 mL，加入适量的对照品，按供试品溶液制备方法制备，测定含量，计算回收率，结果见表2，平均回收率为97.36%，RSD为0.98%，表明回收率良好。

表2 回收率试验结果(n=5，%)

回收率(%)=(测的总量-样品含量)/对照品加入量×100%

1.6 水煎煮提取工艺考察 党参等3味药材与肉桂等八味药材合并煎煮，以出膏率、枳壳中柚皮苷含量为考察指标，采用L9(34)正交试验，对影响水煎提取工艺的主要因素——加水量、煎煮次数、提取时间进行考察。

1.6.1 浸泡时间考察 按照处方比例称取药材并加入多量水，每隔30 min观察一次，至全部药材浸透后。结果浸泡4 h后全部药材浸透，因此浸泡时间确定为4 h。

1.6.2 吸水量考察 按照处方比例称取药材并加入多量水，至全部药材浸泡透心后，过滤，至不再沥水为止，然后称重，以增加的重量为吸水量。结果药材吸水率为192%，故水煎工艺中首次提取时需多加2倍量水。

1.6.3 最佳提取工艺考察[13-14]重点考察影响水煎提取工艺的主要因素——加水量(A)、煎煮次数(B)、提取时间(C)，采用L9(34)正交试验对这3个因素进行考察，因素水平表见表3，以出膏率(干膏)、柚皮苷含量为考察指标。

表3 L9(34)煎煮正交试验因素水平表

注：首次多加水2倍；肉桂等八味药材在挥发油提取后加入。

按比例称取1/10处方量药材，共9份，按表6正交试验方案进行煎煮，最后将1-9号试验所得的提取液浓缩并定容至250 mL量瓶中，摇匀，备用。测定9份样品的出膏率及柚皮苷含量并进行分析。

2 结果

2.1 挥发油提取工艺考察

2.2 浸泡时间考察 结果见表4。结果表明，浸泡时间对挥发油的收率有一定影响，随浸泡时间的延长，挥发油收率在增加，但浸泡4 h同6 h、8 h相比较，挥发油的收率差别不大，因此确定挥发油提取前以浸泡4 h为宜。

表4 浸泡时间对挥发油提取的影响(n=3)

2.3 加水量考察 结果见表5。结果表明，加水量对挥发油的收率有一定影响，随着加水量的增加，挥发油的收率也在增加，但5倍加水量同7倍、10倍相比较，挥发油的收率差别不大，因此确定挥发油提取时以加水5倍量为宜。

表5 加水量对挥发油提取的影响(n=3)

2.4 蒸馏时间考察 结果见表6。结果表明，蒸馏时间对挥发油的收率有明显的影响，随着蒸馏时间的延长，挥发油的收率也在增加，但蒸馏7 h同8～12 h相比较，所得的挥发油量差别不大；12 h所提取的挥发油按100%计，7 h所提取的挥发油量已达到95%，药材中的挥发油已基本提取完全；同时，考虑到大生产及产品成本等因素，确定挥发油提取蒸馏时间以7 h为最佳。

表6 蒸馏时间对挥发油提取的影响(n=3)

2.5 水煎煮提取工艺考察 最佳提取工艺考察水煎提取工艺的正交试验结果见表7，表8。从表7直观分析，各因素对出膏率的影响以C>B>A，其中：因素A以K3>K1>K2，因素B以K2>K3>K1，因素C以K3>K2>K1，直观分析水煎提取工艺的最佳条件为A3B2C3组合；各因素对柚皮苷的影响以C>A>B，其中：因素A以K3>K2>K1，因素B以K3>K2>K1，因素C以K3>K2>K1，直观分析可知水煎提取工艺的最佳条件为A3B3C3组合。

从表8方差分析，因素C对出膏率、柚皮苷含量均有显著性影响，选择该因素最好水平C3；因素A对出膏率、柚皮苷含量均无显著影响，本着节约水源、降低成本的原则选择A1；因素B对出膏率、柚皮苷含量均无显著影响，但综合直观分析结果，出膏率结果B2为最佳水平，柚皮苷含量各水平无差异，在提取效率最佳的同时兼顾节约成本，选择B2为最佳工艺。综合考虑各种影响因素，我们选择水煎提取工艺的最佳条件应为A1B2C3组合；同时为了考察上述最佳工艺A3B3C3和A1B2C3的差异，我们对其进行了对比试验，结果见表9。

表7 L9(34)正交试验方案及结果

表8 方差分析结果

注：F0.05(2，2)=19.00;F0.01(2，2)=19.00。

表9 2种最佳水煎工艺的对比试验结果

注：同A3B3C3比较，P>0.05。

对比试验结果表明，2种水煎工艺在出膏率、柚皮苷含量、柚皮苷转移率方面差异没有统计学意义，表明选择最佳水煎工艺为A1B2C3是合理的。确定水煎工艺为水煎2次，加水量分别为6、4倍(首次已多加2倍量水、浸泡4 h)，煎煮时间为2 h。

3 讨论

通过本实验研究确定挥发油和煎煮的最佳提取工艺，又对煎煮液的分离、浓缩、干燥工艺以及制剂的成型工艺进行了研究，最终建立了参梅健胃胶囊制备工艺。参梅健胃胶囊的制备工艺为：14味中药净选、炮制；白芍等3味粉碎成细粉，过筛，混匀，备用；肉桂等8味加水5倍，浸泡4 h后，蒸馏提取挥发油7 h，滤过，分取挥发油，加入等量乙醇制成挥发油溶液，滤液和药渣分别另器收集，备用；药渣与其余党参等3味加水煎煮3次，第1次加水6倍，浸泡4 h，煎煮2 h，第2次加水4倍，煎煮2 h，滤过，滤液与上述滤液合并，滤液减压浓缩至相对密度为1.10～1.15(70 ℃)的清膏，喷雾干燥，细粉加入白芍等3味药材细粉，混匀，制粒，过筛，低温干燥，整粒，喷入挥发油溶液，密封放置2 h，装入0号空心胶囊，制成1 000粒，既得。

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(2016-03-28收稿 责任编辑：张文婷)

Preparation Research on Shenmei Jianwei Capsule

Chen Yanbin1,2, Zhang Xiaohong2, Liu feng1,2

(1ShaanxiInstituteofInternationalTrade,Xianyang712000,China; 2ShaanxiBuchangPharmaceuticalco.,LTD.,Xi′an710075,China)

Objective:To study Shenmei Jianwei capsule preparation technology. Methods:The volatile oils were extracted by steam distillation. The volatile oil yield was taken as examining index to investigate the influence of soak time, additive quantity of water and distillation time on extraction process. In order to extract rate and the content of naringin as examining index, main factors of water decoction extraction process, water content, decoction time and extraction time were examined By L9 (34) orthogonal test. Results:Add 5 times of water than herbs, then soak the herbs for 4 hours and distillate them 7 hours to extract the volatile oil. Water extraction 2 times, add water 6 times and 4 times higher than the amount of herbs respectively. Extraction lasts 2 hours. Conclusion:The results can be used in preparing Shenmei Jianwei capsule, and can be applied to production.

Shenmei Jianwei capsule; Preparation process; Orthogonal experiment

陕西省科技计划社发攻关项目(编号：2014K14-03-05)；陕西省创新人才推进计划(编号：2015KCT-19)；陕西省创新药物研究中心(编号：2015SF2-09)

陈衍斌(1980.12—)，男，硕士，主管药师，研究方向：从事中药大品种技术升级及二次开发研究，E-mail：50713751@qq.com

刘峰(1968.09—)，男，博士，主任药师、教授，硕士研究生导师，中药制剂专业，研究方向：从事中药新药研究、大品种技术升级及二次开发研究，E-mail：cybbjm@163.com

R284.2

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2017.01.042