2014年某院临床常见病原菌的分布及耐药性分析

黄萍 袁敏

2014年某院临床常见病原菌的分布及耐药性分析

黄萍 袁敏

目的 了解本院2014年临床分离菌对常见抗生素的耐药状况，为临床医生合理选择抗菌药物提供参考依据，减少和延缓耐药菌的产生。方法采用珠海迪尔公司DL-96全自动细菌鉴定/药敏分析仪，对2014年各科室送检标本中培养分离出的1 221株条件致病菌进行回顾性分析。结果1 221株临床分离菌中革兰阳性球菌440株（占36.04%），革兰阴性杆菌781株（占63.96%）；革兰阳性球菌中排列前3位的分别是金黄色葡萄球菌149株（12.20%）、凝固酶阴性葡萄球菌123株（10.07%）、肠球菌124株（10.16%）；革兰阴性杆菌中肠杆菌科细菌排列前2位的分别是大肠埃希菌245株（20.06%）、肺炎克雷伯菌162株（13.27%）；非发酵菌中以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌最常见，分别为143株（11.71%）和122株（9.99%）。葡萄球菌属中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率分别占金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的76.71%和81.4%，未发现耐万古霉素和替考拉宁的葡萄球菌。在革兰阴性杆菌中产超广谱内酰胺酶（ESBLs）检出率占大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的77.2%和26.0%，均对碳青霉烯类具有很好的敏感性。结论2014年度院内病原菌以革兰阴性杆菌居多，且细菌多重耐药日趋严重，因此开展细菌耐药监测和掌握细菌耐药变迁动态，对指导临床合理应用抗菌药物和有效控制院内感染具有重要意义。

细菌耐药性 抗菌药物 革兰阴性杆菌 革兰阳性球菌

随着广谱抗菌药物的广泛应用，细菌耐药现象日趋严重，甚至出现了多重耐药和高度耐药菌株，细菌耐药已成为全世界医疗领域中备受瞩目的问题之一[1]，给临床治疗造成极大的困难。为全面了解本院临床细菌耐药性的发生情况，给临床用药提供参考，现对本院2014年临床分离的致病菌及药敏情况进行回顾性分析。

材料与方法

1 菌株来源 取自2014年1～12月住院患者送检的各类标本共6 760份，按常规方法分离鉴定，得到致病菌共1 889株，去除同一病例从相同部位标本中所获重复菌株，去除真菌后，纳入1 221株进行分析。

2 细菌鉴定与药敏试验 按《全国临床检验操作规程》的要求对所收集标本进行分离培养[2]，病原菌鉴定及药敏试验采用珠海迪尔公司DL-96全自动微生物鉴定/药敏分析仪及配套微生物检测试剂。

3 质控菌株 大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212。

4 数据处理 药敏结果判读依据美国临床实验室标准化研究所（CLSI）最新标准，数据统计分析应用WHONET5.6软件。

结 果

1 细菌分布

1.1 科室分布：分离的1 221株细菌全部来自住院患者，其中干部病房送检标本分离的菌株最多，为537株（17.28%），其他依次为ICU病房321株（15.39 %）、呼吸内科282株（14.06 %）、消化内科228株（11.86%）、神经内科203株（11.31 %）、泌尿外科122株（ 9.66 %）、普外科132株（9.12%），其他科室144株（11.31%）

1.2 标本分布：自痰液中分离的致病菌最多，共482株，占39.47%，其次为中段尿363株（29.73 %），分泌物268株（21.95% ），血液99株（8.10% ），其他9株（0.73%）。

1.3 病原菌的构成比：1 221株病原菌中，革兰阳性球菌440株，占36.04%，革兰阳性球菌中最常见的是金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和肠球菌。革兰阴性杆菌781株，占63.96%，革兰阴性杆菌中以大肠埃希菌最多见，其他依次为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食假单胞菌等，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs分别占二者总数的77.2%和26.0%。主要病原菌分布详见表1。

2 细菌耐药性分析

2.1 常见革兰阳性球菌耐药情况：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为76.71%，未发现耐万古霉素和替考拉林的葡萄球菌，整个葡萄球菌对β-内酰胺类、喹诺酮类和大环酯类的耐药率均在50%以上。在分离的124株肠球菌中粪肠球菌占52.41%，屎肠球菌占47.58%。未发现耐万古霉素和利奈唑胺的肠球菌、屎肠球菌对各种抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌。常见革兰阳性球菌的耐药率详见表2。

表1 1 221株细菌检出构成比（%）

2.2 常见革兰阴性杆菌耐药情况：肠杆菌科细菌均对碳青霉烯类抗生素高度敏感，对大部分β-内酰胺类、磺胺类和喹诺酮类的耐药率较高，均大于50%，但对阿米卡星和第四代头孢类抗生素头孢吡肟有较好的敏感性。在非发酵菌中以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌最常见，鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率均较高，除对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率在50%以下，其余抗菌药物耐药率均在50%以上。常见革兰阴性杆菌耐药情况详见表3。

讨 论

2014年本院监测的1 221株临床分离细菌中，仍以革兰阴性杆菌为主，占63.96%；革兰阳性球菌占36.04%，与目前国内的细菌流行病学调查结果基本一致[3]。

表2结果显示，葡萄球菌对青霉素类、喹诺酮类及大环酯类耐药率都很高，对头孢菌素和氨基糖苷类抗生素的耐药率也逐年增加，但未发现耐万古霉素的菌株。因此临床治疗葡萄球菌感染时不可仅凭经验用药，而应参考药敏实验结果。

本研究亦显示MRSA的检出率为76.71%，高于2009年中国CHINET细菌耐药性监测中心的MRSA检出率52.7%，这可能与地域、患者病情、医生用药习惯等有关。革兰阳性球菌中MRSA耐药机制主要是mecA基因通过R质粒或转座子转入金黄色葡萄球菌，编码一个78 kD的青霉素结合蛋白2a（PBP2a），其与β-内酰胺类抗菌药物的亲和力极低，使药物不能阻碍MRSA细胞壁肽聚糖层合成，从而产生耐药，表现为多重耐药性和异质性，被列为目前世界范围内最难解决的感染性疾病之一。在我国对于MRSA、MRCNS引起的最后

防线，应采取谨慎、合理的措施，保护使用万古霉素类药物，对推迟耐药菌出现很必要。

表2 常见革兰阳性球菌耐药率（%）

表3 常见革兰阴性杆菌耐药率（%）

对肠球菌感染可选用呋喃妥因、万古霉素、替考拉林。由于呋喃妥因用药后40%以原型自尿中排出，所以对于尿液中分离出粪肠球菌的感染，建议首选呋喃妥因。此次调查未发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和肠球菌，但仍需引起重视，加强对万古霉素使用的管理及细菌耐药性监测，因为目前对MRSA、VRE尚无理想的治疗方法[4]。

本次监测显示，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs株分别为77.2%和26.0%，与国内相关文献报道基本一致[5]。肠杆菌属细菌尤其是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌因产ESBLs而对β-内酰胺类、三代头孢类、喹诺酮类耐药较严重，给临床治疗带来较大困难，与ESBLs的特性有关。产ESBLs的细菌不仅对第3代、第4代头孢类抗菌素产生耐药性，而且由于细菌携带的质粒中除ESBLs外，还带有对氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类抗菌剂的耐药基因，极易对常用抗菌剂产生耐药。从表3中可见此类细菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感，对含酶抑制剂的复合物抗菌药物如哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦也保持较高的抗菌活性，因此可作为治疗这两种细菌感染最理想的抗生素，特别是对重症感染仍作为首选药物[6]。非发酵菌呈多重耐药及广泛耐药菌株，铜绿假单胞菌和不动杆菌是院内感染常见的条件致病菌，耐药机制复杂且铜绿假单胞菌极易形成生物被膜，一旦感染则难以清除[7]。本次调查显示，铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率较高，分别为43.4%和26.6%，对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星最为敏感，因此临床上针对铜绿假单胞菌导致的严重感染可考虑选择联合应用β-内酰胺类抗假单胞菌药与氨基糖苷类（如阿米卡星）或氟喹诺酮类药物。

从本次结果可见，鲍曼不动杆菌在临床标本中的分离率仅次于铜绿假单胞菌，居痰液中分离的条件致病菌种首位，其对大多数头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类的耐药率均大于50%，可作为临床选用的敏感性较高的抗菌药物仅有阿米卡星、多粘菌素和头孢哌酮/舒巴坦等。对美罗培南和亚胺培南的耐药率分别为44.6%和52.7%，这可能与近几年碳青霉烯类抗菌药物广泛应用，从而诱导耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌增长有关[8]。

目前，细菌耐药性已成为世界抗感染治疗领域面临的重大问题，在中国，由于抗菌药物的长期滥用，细菌耐药的形势更为严峻[9]。细菌耐药的产生与细菌中存在诸多耐药基因和抗生素广泛应用的程度密切相关。随着广谱抗生素的广泛应用，出现大量多重耐药菌株，给临床治疗带来了极大威胁，为此有必要采取适当措施，合理应用抗菌药物、防止滥用，尤其是万古霉素、碳青霉烯类及其他对于耐药菌有良好疗效的药物，尽可能延长临床适用期，为人类健康造福。

1 温妙云，曾红科，黄伟平，等.重症监护病房血流感染患者细菌分布及耐药性分析［J］.中华危重病急救医学，2013，2（4）：215-218.

2 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京：东南大学出版社，2006：715.

3 李丽，田磊，陈中举，等.卫生部全国细菌耐药监测网2010年中南地区细菌耐药性监测［J］.中国临床药理学杂志，2011，27（12）：940-947.

4 胡方兴.尿路感染病原菌分布及耐药性分析［J］.实用预防医学，2010，17（1）：145-147.

5 胡付品，朱德妹，汪复，等，2011年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2012，12（5）：321-329.

6 产超广谱β-内酰胺类酶细菌感染防治专家委员会.产超广谱β-内酰胺类酶细菌感染防治专家共识［J］.中华实验和临床感染病杂志（电子版），2010，4（2）：207-214.

7 张连波，高庆国，张广. 铜绿假单胞菌生物被膜研究进展［J］.中国实验诊断学，2009，13（1）：138-139.

8 文海岸，司法启，周硕，等.我院2009-2011年临床常见病原菌耐药性分析［J］.中国药房，2013，24（2）：133-135.

9 张宏，马守江.抗菌药物的合理使用［J］实用医药杂志，2011，28（8）：715-717.

An Analysis of the Clinic Distribution and Drug-resistance of Pathogenic Bacteriain in Wuhan

HUANG Ping，YUAN Min. Department of Clinical laboratory，the Eleventh Hospital of Wuhan City，430010

Objective To investigate the drug-resistance of common pathogenic bacteria from a hospital in 2014 and to provide evidences for rational use of antibiotics in the clinic.Methods1 221 strains of bacteria were isolated from clinical specimens in 2014. The pathogens were identified and retrospectively analyzed statistically by Zhuhai Dl Medical Biotech L-96 automated microbial identification system.ResultsAmong all the 1 221 isolates，36.04%（n=440） were Gram-positive bacteria; 63.96% （n=781） were Gram-negative bacteria. The three major Gram-positive bacteria were Staphylococcus aureus （12.20%，n=149），Coagulase - negative Staphylococcus sp. （10.07%，n=123），and Enterococcus sp. （10.16%，n=124）; The top two Gram-negative bacteria were Escherichia coli （20.06%，n=245），and Klebsiella pneumoiae（13.27%）. The most common non-fermentative bacteria included Pseudomonas aeruginosa（11.71%，n=143） and Acinetobacter baumanii（9.99%，n=122）. In Staphylococcus，MRSA and MRCNS detection rates were 76.71% of S.aureus and 81.4% of Coagulase- negative Staphylococcus，respectively. No vancomycin and Teicoplanin resistant Staphylococcus had been found. In Gram-negative bacteria，detection rates of ESBLs were 77.2% of E. coli and 26.0% of K.pneumoiae，both were equally sensitive to carbapenems.ConclusionHospital’s bacterial drug resistance is increased ，among them the Gram-negative bacteria dominate. The constant surveillance and control of bacterial antibiotics resistance are crucial to the rational application of antibiotics and prevention of nosocomial infection.

Bacterial resistance Antibiotic drugs Gram-negative bacilus Gram-positive coccidia

R378

A

1671-2587（2017）01-0075-04

2016-08-13）

（本文编辑：王敏）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.01.021

430010 湖北省武汉市第十一医院检验科

黄萍（1969–），女，湖北武汉人，主管技师，学士，主要从事微生物检验工作，（Tel）18062519201（E-mail）764521174@qq.com。