小反刍兽疫荧光PCR 诊断

凌洪权，黎朝燕，黄 恒，李 泰，陈忠琼，董春霞，姚 璐

（1.重庆市动物疫病预防控制中心，重庆 渝北 401120；2.重庆市璧山区来凤畜牧兽医站，重庆 璧山 402763）

小反刍兽疫荧光PCR 诊断

凌洪权1，黎朝燕2，黄 恒1，李 泰1，陈忠琼1，董春霞1，姚 璐1

（1.重庆市动物疫病预防控制中心，重庆 渝北 401120；2.重庆市璧山区来凤畜牧兽医站，重庆 璧山 402763）

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的发生于小反刍动物的一种急性、烈性、高度接触性传染病，主要在绵羊和山羊中流行，其对幼龄动物的致死率可达50%～80%。

一步法荧光定量RT-PCR方法已用于对本病的检测。

1 材料与方法

1.1 样品 4份样品 S1、S2、S3、S4均为病羊鼻腔拭子。在装有病羊鼻腔拭子的离心管中加入1mL PBS液后，离心管在混匀器上振荡混匀2 min，5000r/min离心2min，然后取上清液0.2mL备用。

1.2 检测仪器 全自动核酸提取纯化仪；荧光PCR仪，BIO-RAD。

1.3 试剂 核酸提取试剂盒（磁珠法），小反刍兽疫通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒。

1.4 检测方法 参照核酸提取试剂盒说明书进行小反刍兽疫病毒RNA提取。

反应条件：42℃5min，95℃ 10s，循环95℃5s，60℃ 35s，共40次，在循环第二步（60℃ 35s）收集荧光信号。

2 检测结果

按照小反刍兽疫通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒使用说明进行结果判定。结果样品S1、S2、S3和S4均测出小反刍兽疫病毒核酸特异性荧光曲线，其检测结果呈阳性。

3 小结

小反刍兽疫是一种传染性极强的病毒性疾病，是世界动物卫生组织规定必须上报的疾病之一。

山羊和绵羊是该病毒的自然宿主，山羊比绵羊更易感，尤其是3～8月龄的山羊，而哺乳期的动物抵抗力较强。

当前小反刍兽疫主要分布在撒哈拉和赤道之间的非洲地区，中东（阿拉伯半岛、以色列、叙利亚和约旦）、南亚次大陆（印度、尼泊尔、孟加拉国、巴基斯坦和阿富汗）。小反刍兽疫在这些地区造成了严重的经济损失，成为这些地区影响小反刍兽类家畜生产的重要疾病。

目前对小反刍兽疫没有有效的治疗手段，接种疫苗是一种有效的控制小反刍兽疫的方法。在免疫接种的同时，应加强对引进羊只的检疫并做好隔离、消毒工作，以防病原引入。

S854.4

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：1001-8964（2017）02-0048-01

2016-12-23