急性冠脉综合征患者血浆miR-122和miR-3149表达的临床意义

吴霞，王学法，金鑫

(1 新矿集团莱芜中心医院，山东莱芜 271103；2 济宁医学院附属医院)

急性冠脉综合征患者血浆miR-122和miR-3149表达的临床意义

吴霞1，王学法1，金鑫2

(1 新矿集团莱芜中心医院，山东莱芜 271103；2 济宁医学院附属医院)

目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血浆miR-122和miR-3149的表达变化及意义。方法 随机选取急性心肌梗死(AMI)患者46例，不稳定心绞痛(UA)患者45例作为ACS组，并随机选取冠脉造影阴性者40例作为对照组，采用实时荧光定量技术检测各组血浆中miR-122和miR-3149，绘制受试者工作特征(ROC)曲线，分析血浆miR-122对ACS的诊断价值。结果 与对照组比较，ACS组血浆miR-122水平明显升高，且AMI患者明显高于UA患者(P均<0.05)；血浆miR-3149水平ACS组与对照组、AMI患者与UA患者比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。ROC曲线下面积为0.81(95%CI：0.725～0.888，P<0.01)。相关性分析显示AMI患者miR-122和miR-3149表达水平与cTnI水平均无相关性(P均>0.05)。结论 miR-122在急性冠脉综合征患者血浆中表达上升，对ACS的诊断具有一定的价值。

miR-122；miR-3149；急性冠脉综合征；血管内皮细胞，增殖，迁移

急性冠状动脉综合征(ACS)是世界范围内导致心血管疾病患者死亡的主要疾病之一[1]。如果患者在急性心梗发病后的3 h内接受到及时救治，病死率可大幅度降低[2]。研究发现，MicroRNAs(微小RNA，miRNAs)在血管生成和心血管疾病的发生中发挥重要作用，在RNA酶存在的情况下，其在心血管疾病患者体液中可稳定存在而不被降解[3,4]，提示外周血miRNAs有可能成为心血管系统疾病早期诊断和判断预后的潜在标志物。研究发现，在猪心肌梗死动物模型中结扎冠脉阻断血流后，动脉模型血浆中miR-122和miR-3149快速升高[5]，推测miR-122和miR-3149与冠心病有着一定的关系。本研究探讨miR-122和miR-3149在ACS患者血浆中表达的变化及意义。

1 资料与方法

1.1 基本资料 收集2012年10月～2014年9月于济宁医学院附属医院和新矿集团莱芜中心医院就诊并确诊为ACS的91例患者作为ACS组，男46例、女45例，年龄34～82(55.4±5.9)岁；AMI患者46例，不稳定心绞痛(UA)患者45例；均符合美国心脏协会(AHA)/美国心脏病学会(ACC)2009心血管诊疗指南[6]制定的ACS制定标准。伴高血压15例、糖尿病8例、高血压合并糖尿病4例、高血脂11例，吸烟(每日>20支，时间>10年)15例；血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)为(6.98±2.91)ng/mL。收集同期表现为非心源性胸痛或者胸闷入院后冠脉造影阴性者40例作为对照组，男19例、女21例，年龄36～80(56.6±2.4)岁；伴高血压6例、糖尿病3例、高血压合并糖尿病1例，高血脂5例，吸烟6例；血清cTnI为(0.01±0.01)ng/mL。两组年龄、性别比例、伴发疾病及吸烟等差异无统计学意义(P均>0.05)。ACS组血清cTnI水平明显高于对照组(P<0.05)，ACS组AMI患者血清cTnI水平明显高于UA患者(P<0.05)。本研究经本院伦理委员会批准，两组研究内容均知情并签署知情同意书。

1.2.1 血浆miR-122和miR-3149 mRNA水平 两组均取肘静脉血5 mL[观察组于胸痛发作后(5.5±1.6)h采血)]，放入含柠檬酸钠抗凝的采血管，采血2 h内离心(3 000 r/min， 15 min)分离血浆和细胞组分，血浆成分置于-80 ℃冰箱保存。采用SYBR Green定量PCR法 检测miR-122和miR-3149 mRNA表达，2-ΔΔCt法计算miRNA相对表达量，实验重复3次，取平均值。结果显示，ACS组血浆miR-122水平明显高于对照组，AMI患者明显高于UA患者(P均<0.05)；血浆miR-3149水平ACS组与对照组、AMI与UA患者比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表1。

表1 两组血浆miR-122和miR-3149相对表达量比较

注：与对照组比较，*P<0.01；与UA比较，#P<0.01。

1.2.2 AMI患者血浆miR-122和miR-3149表达与血清cTnI水平的相关性 采用Pearson线性相关分析法分析。结果显示，AMI患者血浆miR-122和miR-3149表达与cTnI水平均无相关性，r分别为-0.121和0.078，P均>0.05。

1.2.3 血浆miRNA-122对ACS的诊断价值评估 绘制受试者工作特征(ROC)曲线，计算曲线下面积，分析miRNA-122对ACS的诊断价值。结果显示，ROC曲线曲线下面积为0.81，95%CI：0.725～0.888，P<0.01。见图1。

图1 血浆miR-122表达对ACS的诊断价值

2 讨论

血清cTnI是诊断AMI的特异和灵敏标志物之一，但AMI患者cTnI水平在心肌梗死4～8 h后才开始升高，早期诊断灵敏度不高[7]，且其对AMI与UA的鉴别无参考价值。目前已有研究报道miR-1、miR-195、miR-30a、miR-499等miRNAs具有优于肌钙蛋白成为AMI标志物的潜在可能[8～12]，但目前其研究主要集中在AMI方面，在ACS范围内的研究相对较少。

近期Li等[5]在猪心肌梗死模型的研究中发现，冠状动脉结扎后血浆中miR-122含量在180～240 min内持续升高，miR-3149表达水平亦在30～240 min升高；截止到240 min检查结束，血浆中cTnI水平仍未明显升高。本研究结果显示，ACS组血浆miR-122水平明显高于对照组，且AMI患者明显高于UA患者；提示miR-122在冠心病的发生、发展中起一定作用，对ACS与非冠心病、AMI与UA的鉴别有一定价值。miR-122是在肝脏特异高表达的一种miRNAs[13],在脂类代谢中起着重要的作用[14]。Gao等研究中发现高脂血症患者血浆miR-122水平明显升高，并且与冠心病的严重程度密切相关[15]。动物实验研究表明，miR-122在心脏中表达无表达或者低表达，在大鼠梗死心肌组织中表达明显升高[16]。但miR-122在冠心病的发生、发展中作用的具体机制尚不明确，有待于进一步的实验证实。本研究ROC曲线分析结果显示，miR-122对ACS有较高的诊断价值。以往研究报道，AMI患者血浆中某些miRNAs与cTnI水平相关[17]。本研究发现，AMI患者血浆中miR-122和miR-3149水平与cTnI水平均无相关性。但本研究尚存在一些局限性，从生物标志物研究看，样本量偏小，且为横断面研究，有必要开展大样本、多中心、随机对照研究进一步研究证实。

综上所述，miR-122在急性冠脉综合征患者血浆中的表达水平明显升高，对ACS的诊断具有一定的价值。

[1] 段樱,谭兵,刘树业,等.两种心脏标志物诊断急性冠脉综合征的对比研究[J].山东医药,2014,54(16):90-91.

[2] Hamm CW, Bassand JP, Agewall S, et al. ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation: The Task Force for the management of acute coronary syndromes (ACS) in patients presenting without persistent ST-segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC)[J]. Eur Heart J, 2011,32(23):2999-3054.

[3] 贾克刚,刘晓程.循环微小RNA在心血管疾病中应用的研究进展[J].中华检验医学杂志,2012,35(10):884-889.

[4] Widera C, Gupta SK, Lorenzen JM, et al. Diagnostic and prognostic impact of six circulating microRNAs in acute coronary syndrome[J]. J Mol Cell Cardiol, 2011,51(5):872-875.

[5] Li X, Yang Y, Wang L, et al. Plasma miR-122 and miR-3149 Potentially Novel Biomarkers for Acute Coronary Syndrome[J]. PLoS One, 2015,10(5):e0125430.

[6] 杨跃进, 杨进刚. AHA/ACC 2009年ST段抬高心肌梗死和经皮冠状动脉介入治疗指南更新解读[J].心血管病学进展,2010,31(2):159-161

[7] 聂宇,刘哲,陈曦,等.循环microRNA与心血管疾病临床诊断[J].中华心血管病杂志,2011,39(4):377-382.

[8] 徐冬梅,于立成,楚新梅,等.血清微小RNA可能是急性心肌梗死的标志物[J].山东医药,2011,51(36):14-16.

[9] Olivieri F, Antonicelli R, Lorenzi M, et al. Diagnostic potential of circulating miR-499-5p in elderly patients with acute non ST-elevation myocardial infarction[J]. Int J Cardiol, 2013,167(2):531-536.

[10] Sayed AS, Xia K, Yang TL, et al. Circulating microRNAs: a potential role in diagnosis and prognosis of acute myocardial infarction[J]. Dis Markers, 2013,35(5):561-566.

[11] Yao Y, Du J, Cao X, et al. Plasma levels of microRNA-499 provide an early indication of perioperative myocardial infarction in coronary artery bypass graft patients[J]. PLoS One, 2014,9(8):e104618.

[12] Long G, Wang F, Duan Q, et al. Circulating miR-30a,miR-195 and let-7b associated with acute myocardial infarction[J]. PLoS One, 2012,7(12):e50926.

[13] Girard M, Jacquemin E, Munnich A, et al. miR-122, a paradigm for the role of microRNAs in the liver[J]. J Hepatol, 2008,48(4):648-656.

[14] Fernandez-Hernando C, Suarez Y, RaynerKJ, et al.MicroRNAs in lipid metabolism[J]. Curr Opin Lipidol, 2011, 22(2):86-92.

[15] Gao W, He HW, Wang ZM, et al. Plasma levels of lipometabolism-related miR-122 and miR-370 are increased in patients with hyperlipidemia and associated with coronary artery disease[J]. Lipids Health Dis, 2012,11:55.

[16] Corsten MF, Dennert R, Jochems S, et al.Circulating MicroRNA-208b and MicroRNA-499 reflect myocardial damage in cardiovascular disease[J]. Cir Cardiovasc Genet, 2010,3(6):499-506.

[17] Papoutsidakis N, Deftereos S, Kaoukis A, et al. MicroRNAs and the heart: small things do matter[J]. Curr Top Med Chem, 2013,13(2):216-230.

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.04.030

R541.4

B

1002-266X(2017)04-0088-03

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