一例鸽流感H9亚型病例分析
2017-02-07山东省泰安市动物卫生监督所271000
赵 翠 (山东省泰安市动物卫生监督所 271000)
常维山 (山东农业大学动物科技学院 山东 泰安)
一例鸽流感H9亚型病例分析
赵 翠 (山东省泰安市动物卫生监督所 271000)
常维山 (山东农业大学动物科技学院 山东 泰安)
鸽流感不是H5N1禽流感,是由粘病毒科A型流感病毒引起的传染病。自1999年发现病根以来,很多地方发生过鸽的流感病。有资料表明,所有禽类都是易感动物。前不久,根据有关药业饲资料标明,当前起危害作用最严重而常见的流感病毒现分为两种类型:一是H5型;二是H9型。近几年来各地鸽棚处寄来的病例资料表明,鸽出现的急性突发性的“咳嗽、眼肿流泪、甩头曲颈、头部肿胀、鼻流浆性液体、突然死亡、双翅下垂、双腿软弱无力”的症状,都是流感病毒在鸽身上的表现。2015年12月30日,接到一例鸽发病案例,经流行病学调查、病理剖检和实验室诊断,最后确诊为一起鸽流感H9病例。
1 发病情况
一个始建于2012年,由鸡舍改造而成的鸽场的鸽子突然发病,该场饲养青年鸽和成年鸽大约2000对左右,都免疫过新城疫,鸽痘等疫苗。青年鸽首先出现采食量下降,又出现呼吸道症状,继而咳嗽,畜主用安莫西林大群饮水,病情严重的鸽子肌注柴胡注射液,仍未见好转,之后出现死亡,然后畜主带濒死鸽2只,病死鸽2只前来就诊。
2 临床症状
病鸽呈现出精神萎靡,食欲减退,不爱活动,低头缩颈,体温略有升高,体重下降,对周围环境刺激反应迟钝,饮水增加。病鸽两眼肿胀,并流出胶状分泌物,流鼻涕、鼻阻塞、打喷嚏。因呼吸急促发出罗音,有的呼吸困难,严重的可窒息死亡,口、鼻流粘液,随着病程的延长,有些病鸽出现头颈扭转、转圈、运动失调、不能站立等神经症状。常常扭动脖子,羽毛松乱,双足冰冷,因怕冷而蜷缩于鸽舍一角。有的病鸽头部、颈部和胸部水肿。发病后1~5d左右死亡,死亡率可达50%~100%。
3 病理剖检
颈部皮下弥漫性淤血、出血,喉部、气管出血,嗉囊内充满粘稠液体,肺轻微出血、淤血,胸腺出血肿大,肝脏肿大,腺胃乳头出血,肌胃和腺胃交界处有条状出血斑,肌胃角质层下有点状出血;肠道出血,特别是十二指肠黏膜有出血斑点,盲肠扁桃体肿大出血。
4 实验室诊断
4.1 细菌分离鉴定 无菌操作采取病鸽肝脏,分别接种于LB营养琼脂及麦康凯琼脂上,37℃,过夜培养,发现并无细菌生长。其次,取部分肝脏组织涂片,进行瑞士和革兰氏染色镜检均未见明显细菌。
图1 腺胃乳头出血
图2 肠道出血
图3 胸腺出血
4.2 新城疫、禽流感抗原检测 (1)无菌采集病死鸽和患病鸽的病变气管,将组织研磨提取RNA,并反转录为cDNA,进行分子生物学检测。(2)根据GenBank上公布的H9亚型禽流感病毒HA序列和新城疫病毒序列设计两对引物,H9亚型禽流感病毒HA序列的上游序列:CAAGACGCCCAATACACAAATAA,下游序列:CCCTGACCAACCTCCCTCTA,扩增大小为550bp,PCR反应条件:94℃5min、94℃30S、60℃30S、721min℃、727min℃、4℃保存,33个循环。(3)新城疫病毒的上游序列:ATGGGAGGCTAGGATTTGATGGA,下游序列:ACTGCCCCTCTTGCCTTTTGTCT,扩增大小为186bp,PCR反应条件:94℃5min、94℃30S、54℃40S、72℃1min、727min℃,4℃保存,33个循环。(4)PCR产物于0.8%琼脂糖凝胶上进行电泳检测,在紫外分析仪下观察发现,两个样品都在550bp处有条带,与目的片段大小一样,而在新城疫检测为阴性,确定为H9亚型禽流感(见图4)。
图4 新城疫、禽流感抗原PCR鉴定
4.3 诊断结果 根据临床表现和实验室诊断,最后确诊此病是H9流感病例。天气变冷,冷空气入室是此次发病的诱因。发病后误诊为新城疫断,加重了疾病,导致鸽群发病率及死亡率迅速升高。鸽群感染流感H9后往往引起其免疫应答水平低下,机体的抵抗力弱。
5 治疗
(1)将病鸽全部淘汰,立即严密封锁场地,进行全面彻底消毒,避免继发感染,采用抗病毒及提高鸽群机体抵抗力的综合性防治措施。(2)抗病毒药物:能有效抑制病毒在易感动物细胞中生长繁殖,彻底杀灭病毒。(3)提高鸽群抵抗力:饲料或饮水中添加多维素等药物,提升鸽群自身抵抗力。
6 讨论
(1)本次实验室诊断确诊了一例鸽子感染H9的病例,由于该病在实际中与新城疫的症状及剖检变化有相似之处,容易误诊,应用RT-PCR和PCR技术能够将两种病毒进行准确的诊断,因此在平时的检测中应将常规方法和分子学实验相结合,为准确的检测疾病提供依据。(2)当气候突变和饲养密度过大时容易促使本病的发生。本病可通过消化道或接触性传染,有资料显示一些康复鸽仍带毒,能在天气突变等应激条件下传播此病,因此,应当做好天气突变时的防护工作。(3)由于针对本病的防治目前尚无特效疫苗和药物,因此在平时应当加强饲养管理,保持合理的密度,并做到饲养室通风良好,阳光充足,清洁干燥,做好防寒保温工作,做好三防工作(防风、防湿、防拥挤)很关键。冬天可在鸽子的饮水中放点辣椒粉或高粱汁,以使鸽经常保持兴奋状态,这对耐寒是很有效的。(4)坚决不要在有本病疫情的鸽场引进新鸽,同时建设鸽舍也要远离鸡舍,否则会促进疾病的水平传播。如附近鸽场有本病发生,应该果断地采取严密封锁消毒工作,以免疫情累及本场。
S858.39
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1007-1733(2017)01-0038-02
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