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一例肉鸭细菌病混合感染的诊断与治疗*

2017-01-31王苗利陈静肉先姑库尔班曹振山王士荣李玉杰刘丽平刘娜

家禽科学 2017年11期
关键词:革兰氏葡萄球菌卡片

王苗利 ,陈静 **, 肉先姑库尔班 ,曹振山 ,王士荣 ,李玉杰 ,刘丽平 ,刘娜

(1.山东省动物疫病预防与控制中心,山东 济南 250022;2.新疆喀什麦盖提县畜牧兽医站,新疆 麦盖提 844600)

一例肉鸭细菌病混合感染的诊断与治疗*

王苗利1,陈静1**, 肉先姑库尔班2,曹振山1,王士荣1,李玉杰1,刘丽平1,刘娜1

(1.山东省动物疫病预防与控制中心,山东 济南 250022;2.新疆喀什麦盖提县畜牧兽医站,新疆 麦盖提 844600)

龋齿罗氏菌(Rothia dentocariosa)为需氧或微需氧、不形成芽孢、无动力、多形态的革兰氏阳性菌,是人类口咽部的共生菌群,也是引起龋齿和牙周病的病原菌。通常认为,龋齿罗氏菌对人类具有低毒力,但现在已公认为成年人的机会致病菌,常与感染性心内膜炎有关[1],也可引起其他多种感染,如腹腔内感染、肺炎、脑脓肿、瓣膜周围脓肿、眼内炎以及细菌性动脉瘤等[2]。有人报道可以从猫抓病肿大淋巴结分离出龋齿罗氏菌[3]。未见有鸭感染该菌的报道。

缓慢葡萄球菌(Staphylococcus lentus)属于葡萄球菌属。该菌被Kloos等于1976年命名为松鼠葡萄 球 菌 缓 慢 亚 种 (Staphylococcussciurisubsp.lentus)[4],并由 Schleifer K H 等[5]在 1983 年将其划分为葡萄球菌属的一个独立的种,即缓慢葡萄球菌(S.lentus)。缓慢葡萄球菌属于凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase-negative staphylococci,CNS)[4]。CNS 曾被认为不具有致病性,但越来越多的资料表明CNS是人类或许多动物不可忽视的致病菌[6-10]。

施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)属于假单胞菌科假单胞菌属,假单胞菌广泛分布于土壤、淡水、海水以及生物体中。革兰氏阴性菌,细胞单个,多为直的或弯的杆菌,大小为 (0.5~1)um×(1.4~4)um,单鞭毛或多鞭毛,不产生鞘或突起物。生长温度范围较广,可在4~43℃生长,大多数菌的最适温度在30℃左右。生长的pH范围在pH7.0~8.5,大多数不能在pH6或6以下生长[11]。革兰氏大肠杆菌病是养鸭场最常见的细菌病之一。大肠杆菌既可以水平传播,也可以垂直传播,主要引起鸭的卵黄吸收不全、心包炎、气囊炎、肝周炎[12],本菌由于很容易产生耐药性,实际生产中感染途径及感染原因不一,临床治疗越来越复杂。

近年来,禽病感染发病原因越来越复杂,混合感染越来越常见,再加上抗生素的滥用,细菌的耐药性越来越强,给临床诊断带来了很大的困难。因此,根据实验室诊断以及科学的药敏分析,合理的指导用药治疗,成为今后发展的趋势,相信如果广大养殖用户都能科学、合理地用药,一定会改善抗生素滥用、细菌耐药性增强的现象,减少抗生素给禽以及人类带来的危害,更好地应对禽场的疫病防控。

1 发病情况

2017年4月,济宁市梁山县某鸭场出现鸭拉稀、瘫痪进而死亡的情况。经过询问调查,该场存栏量8000只左右,送检当日鸭日龄为30日龄,24日龄前鸭群正常,24日龄左右的鸭部分表现出拉稀现象,大约有5%的鸭表现出瘫痪。发病的鸭伴有轻微呼吸道症状,采食量略微下降,发病3d后死亡数量增加,8d内死亡700只左右鸭。免疫情况:1日龄免疫大华农生产的H5N2亚型灭活苗。用药治疗情况:24日龄使用环丙沙星、黄芪多糖饮水用3d,28日龄使用氟苯尼考饮水用4d,治疗效果不明显。

解剖病变情况,肝脏轻微肿大,心包内有少量液体,肺脏水肿,小肠出现卡他性肠炎,气管环出血,脾脏有坏死。实验室对送检的3只鸭进行实验室检测,检测项目为新城疫病原、禽流感病原、传染性支气管炎病原、细菌分离、生化鉴定及药敏分析,并根据检验结果指导用药,得到了良好的效果。

2 试验材料与方法

2.1 试验材料移液器、荧光定量PCR仪、核酸提取仪、奥林巴斯显微镜,梅里埃生化及药敏仪VITECII compact60、流感通用型荧光PCR检测试剂盒、新城疫荧光PCR检测试剂盒、传染性支气管炎荧光PCR检测试剂盒、显色培养基,营养琼脂,革兰氏染色液。

2.2 试验方法

2.2.1 病毒检测 选取送检病料的肝脏、淋巴结、脾脏、气管等部位组织样品,经过研磨处理后使用核酸提取仪提取病毒核酸,并根据检测试剂盒的操作步骤进行操作,通过荧光定量PCR仪进行PCR扩增,并读取结果。

2.2.2 细菌鉴定及药敏分析 选取送检病料的肝脏、肺脏在显色平板上进行接种,挑取显色平板上培养出的细菌进行革兰氏染色,100倍油镜观察细菌形态。结合镜检结果及培养基培养出的细菌颜色、形态的不同,挑取单菌落,三线划线法纯化到营养琼脂平板上,将营养琼脂平板倒置放于温箱中,37°C培养 18~24h。根据染色镜检结果,选择合适的鉴定、药敏卡片;无菌操作,分别挑取纯化的单菌落制备菌悬液,浓度控制在0.5~0.63Mc浓度,备装鉴定卡片;将鉴定卡片和药敏卡片分别插入制备好的菌悬液中,做好标记,装载上机,5~18h后读取结果。

3 结果与分析

3.1 病毒检测结果 通过病毒检测,新城疫病原、禽流感病原、传染性支气管炎病原检测结果为阴性。

3.2 细菌鉴定及药敏结果 经过温箱37°C培养18~24h后,根据菌落外观形态及革兰氏染色染色结果,初步判定平板上长出的细菌为四种,其中两种为革兰氏阳性球菌,另外两种为革兰氏阴性杆菌。

根据镜检结果,选择GP革兰氏阳性球菌鉴定卡片和GP67革兰氏阳性球菌药敏卡片、GN革兰氏阴性杆菌鉴定卡片和GN13革兰氏阴性杆菌药敏卡片,制备菌悬液并上机;经过鉴定和药敏分析,鉴定结果为龋齿罗氏菌、缓慢葡萄球菌、施氏假单胞菌、大肠杆菌,用药组合为替加环素、左氧氟沙星、黄芪多糖,肌肉注射。

4 讨论

结合此次药敏试验的结果,以及考虑较小的血药浓度,此鸭场选择替加环素、左氧氟沙星、黄芪多糖治疗,血药浓度控制在1μg/ml,防止滥用药、过度用药,造成微生物生态失衡、耐药菌株的增加的现象。通过用药治疗,很好控制了该鸭场病情。

另外,建议养殖场在日常中注意生物安全的科学管理,舍内、舍外定期消毒,减少病原菌的繁殖;及时清理病死禽及粪便,并做无害化处理;定期对场内鼠类等动物进行灭杀;减少外来兽医等人员带来的感染风险;减少与场外禽类的接触风险。

[1]Funke G,von Graevenitz A,Clarridge JE 3rd,et al.Clinical microbiology of coryneform bacteria[J].Clin Microbiol Rev,1997,10:125-159.

[2]刘青芹,李金钟.龋齿罗氏菌及其临床感染[J].国际检验医学杂志,2010,31(9):981-983.

[3]MullerHE.Cat-scratch disease:historical,clinical,phylogenetic and taxonomic aspects[J].Tierarztl Prax,1997,25:94-99.

[4]赵卿,李金钟,吴正祥.松鼠葡萄球菌脑膜炎及菌株的分离与鉴定 [J].中国人兽共患病杂志,1996,12(05):54.

[5]盛相鹏,杜崇涛,许会会.仓鼠源缓慢葡萄球菌的分离鉴定及生物学特性研究[J].动物医学进展,2010,31(07):30-35.

[6]董明驹,史莉.凝同酶阴性葡萄球菌医院感染及体外耐药监测[J].中华医院感染学杂志,2009(03):328-330.

[7]孙淑慧.凝固酶阴性葡萄球菌临床分布及耐药性监测分析[J].中国实用医刊,2009(12):92-93.

[8]Irlinger F.Safety assessment of dairy microorganisms:coagulase -negative staphylococci[J].International JournalofFood Microbiology,2008,126 (03):302-310.

[9]Schleifer K H,Geyer U,Kilpper-Balz R.Elevation of Staphylococcus sciuri subsp.lentus(Kloos et al.)to species status:Staphylococcus lentus (Kloos et al.)comb[M].Nov,Systematic and Applied Microbiology,1983.

[10]Kloos W E,Schleifer K H,Smith R F,Characterization ofStaphylococcussciurisp.nov.and itssubspecies[J].InternationalJournalofSystematic Bacteriology,1976,26(01):22.

[11]布坎南 RE,吉本斯 NE.中国科学院微生物研究所译.伯杰细菌鉴定手册(第 8版)[M].北京:科学出版社,1984:87.

[12]刘洁,魏昆鹏,谢峰,等.鸭大肠杆菌的分离鉴定[J].养殖技术顾问,2013(8):105.

2030年全球禽肉产量预计将会超过猪肉产量

在巴西圣保罗召开的国际猪肉和家禽展上,美国家禽及禽蛋出口委员会主席和国际家禽委员会主席James H Sumner在分析全球肉鸡及火鸡的生产养殖情况时指出,全球家禽业呈现“现象级”增长,2030年全球禽肉产量预计将会超过猪肉产量。需求方面,过去二十年,全球鸡肉需求增长91%,年均增速3.5%;预计十年后全球鸡肉需求将会再增加30%。

全球鸡肉最主要的出口国是巴西和美国,两国鸡肉出口量合计占全球鸡肉出口总量的三分之二,其中,巴西占比相对较高。通过对比美国2009~2016年鸡肉出口形势,Sumner表示美国已经适应了国际关系和国际优先选择权的变化。例如,2009年,美国鸡肉出口最大的单个贸易伙伴是俄罗斯,占整个市场份额的20.5%;其次是中国,占19.9%;而2016年,这两个市场没有与美国进行禽肉贸易,墨西哥和中国香港则成为其最主要的单个出口市场,所占份额分别为21.9%和9.8%。

同时,美国禽肉出口也面临许多挑战。当前由于美国禽流感爆发,中国禁止了从美国进口禽肉。Sumner期望年底能够解除出口禁令。特朗普政府将会着手解决这一问题。此外,北美自由贸易协定(NAFTA)正在磋商,美国和墨西哥关系恶化。Sumner对此表示乐观,认为北美自由贸易协定仍会继续,不会有显著变化,面临的问题只是暂时的。虽然墨西哥能够从任何渠道进口商品,但美国与墨西哥的地缘优势高于任何国家,尤其是在禽肉贸易上,跟其他国家相比具有无可比拟的成本竞争力。

S858.325.1

C

1673-1085(2017)11-0044-03

2017-10-15

山东省家禽产业体系创新团队SDAIT-11-13;病死畜禽无害化处理技术推广;种畜禽场疫病净化技术示范与推广。

王苗利(1987-),女,山东人,硕士,兽医师,研究方向:动物细菌病检测。

**通讯作者:陈静,博士,研究员,山东省动物疫病预防与控制中心。

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