全自动免疫组化和原位杂交染色机染色失败解决方案

沈 萍，金晓婷

上海儿童医学中心，上海市，200127

全自动免疫组化和原位杂交染色机染色失败解决方案

【作 者】沈 萍，金晓婷

上海儿童医学中心，上海市，200127

该文分析总结了Leica Bond Max 全自动免疫组化和原位杂交染色机染色失败的原因，以及对常见人员操作失误与机器自身故障进行了总结，并提供了对应的解决方案。

全自动免疫组化和原位杂交染色机；染色失败

Leica Bond Max 全自动免疫组化和原位杂交染色机[1]是一款将自动化技术用于高级染色处理的机器，它包括免疫组织化学染色（IHC）和原位杂交（ISH）。它将病理科传统的手工操作替换成机器操作，几乎囊括了免疫组化手工操作的全过程，包括烤片、脱蜡、抗原阻断、修复、滴加抗体、显色、苏木复染等一系列步骤，既减轻了病理技术员的工作量，又加快了病理医生出报告的时间，极大地满足了临床的需求[2]。

我科至2014年8月使用该机器以来，碰到过几次染色失败事件，其中既有人员操作失误，也有机器自身故障的因素。现对我们常见人员操作失误与机器自身故障进行了总结，并提供了对应的解决方案。

1 操作失误

操作失误是该类染色机染色失败的主要原因之一。

（1）粘贴标签时位置偏移，探针扫不到条形码，机器会显示玻片故障。

（2）标签贴反，使得有组织的一面朝下，整个操作流程未经需处理的组织，从而出现染色失败。

（3）技术员把不同分配液量的玻片放置在同一排玻片架上，机器拒绝执行命令。

（4）在做优化玻片时，打印标签时未加修复方法，使得需修复处理的玻片未进行修复处理，从而引起染色失败。

（5）开始启动前，应先查看试剂瓶内抗体是否满足染色需求量，并及时添加抗体，如忘记添加抗体，机器会拒绝执行启动命令。同时应注意试剂瓶的已使用容量，一个试剂瓶最多可添加7 mL的试剂，超出此容量后，此试剂瓶将不能再使用。

（6）技术员添加新的试剂瓶时未设置好试剂的信息、未扫描试剂瓶。

（7）加载玻片时covertiles未放置到位，会导致染液可能被滴在covertiles之上或外漏在间隙槽内，引起染色失败。

（8）机器操作过程中未及时添加消耗的试剂如修复液、蒸馏水、缓冲液以及未及时倾倒废液桶而产生各种小故障，从而影响了机器的运行。

2 机器自身故障

机器的常见故障主要有：

（1） 机器上的一块或一排加热板突发故障，放在该位置上的玻片就不会被正确地进行染色处理，从而引起染色失败。

（2） 因机器需定期关机保养，每次关机后，都需把DAB混合站取出来清洗，在下次开机前放在机器上，一旦技术员忘了放置，机器开机后自检时，发现扫不到DAB混合站，它会给出提示，提醒你DAB混合站是否已归位？一旦你没注意按了确认键后，机器会自动认为操作没问题而运行下去，从而导致染色液漏于机器内，染色失败。

（3） 探针针管在清洗不完全或部分堵塞时，针管内滞留的前一种抗体会影响下一个抗体的染色或吸入的抗体量减少，造成组织全部或部分“空染”，影响染色结果。

（4） 超过一定数量（800~1 200）张玻片后，机器需进行大保养，如换探针、玻璃管注射器和针头、机器后面的抽吸管道等耗材，否则会出现试剂瓶内的液体量因检测错误而在操作过程中出现试剂剂量不足，机器无法运行下去。

3 讨论与总结

Leica Bond Max 全自动免疫组化和原位杂交染色机具有敏感性高、定位准确、背景清晰等特点[2]，同时处理能力强，一台机器10 h最多可处理90张玻片，因此一经面世就受到积极推广。

染色机的正确使用及维护保养的好坏直接影响到染色结果的好坏。作为病理技术员而言，要全面了解机器的运行原理，注重机器的日常维护和保养，及时替换老化的耗材。每次关机后都需用清洁布沾着无水乙醇清洁机器；每次上机操作前都需认真检查试剂瓶内的试剂，清空废液桶内的废液；认真粘贴标签；添加新的试剂瓶时认真设置试剂信息；认真放置covertiles。操作过程中随时关注机器的运行情况，一旦出现异常情况或非人为因素的故障时，认真观察故障现象，及时与工程师取得联系，及时替换坏了或老化了的辅件和耗材，才能准确、快捷地将故障排除，以满足病理科免疫组织化学工作量日益增加的需求。

[1] 顾霞, 魏明洁. 快速微波免疫组化染色技术在临床病理中的应用[J]. 吉林医药学院学报, 2008, 29(1): 12-13．

[2] 于兰, 何松, 陈亚丽. 全自动免疫组化染色仪的应用体会[J]. 临床与实验病理学杂志, 2009, 25(2): 215-216．

Solution of Dyeing Failure of Fully Automatic Immunohistochemical and Hybridization in Suit Dyeing Machine

【Key words 】SHEN Ping, JIN Xiaoting
Shanghai Children’s Medical Center, Shanghai, 200127

fully automatic immunohistochemical and hybridization in suit dyeing machine, dyeing failure

R361.2

A

10.3969/j.issn.1671-7104.2017.03.021

1671-7104(2017)03-0233-02

2016-12-21

沈萍，E-mail: shenpingscmc@sina.com

【 Abstract 】To analysis the cause of dyeing failure of Leica Bond Max fully automatic immunohistochemical and hybridization in suit dyeing machine, we summarize people’s misoperating and own fault, then offer the corresponding solution.