枯芩、条芩主要活性成分含量比较Δ

芦海生，陈铭阳，刘春生#

(1.中国中医科学院望京医院药学部，北京 100102； 2.北京中医药大学中药学院，北京 100102)



枯芩、条芩主要活性成分含量比较Δ

芦海生1*，陈铭阳2，刘春生2#

(1.中国中医科学院望京医院药学部，北京 100102； 2.北京中医药大学中药学院，北京 100102)

目的：比较黄芩饮片枯芩、条芩部分主要活性成分的含量，为医院药房采购及临床用药提供参考。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent ZORBAX-Eclipse XDB C18色谱柱(25 cm×4.6 mm，5 μm)；流动相为甲醇-水-磷酸(V∶V∶V=47 ∶53 ∶0.2)；流速1 ml/min；检测波长280 nm。使用SAS 8.2软件分析各组数据之间的相关性。结果：枯芩中黄芩苷平均含量为12.80%，黄芩素平均含量为2.01%；条芩中黄芩苷平均含量为13.14%，黄芩素平均含量为1.35%。分析结果显示，枯芹、条芹中黄芩苷、黄芩素平均含量的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：枯芩中黄芩素含量较高，条芩中黄芩苷含量较高，因此不能断论其中一种优于另一种，本研究结论可为药房采购及临床用药提供参考。

黄芩； 枯芩； 条芩； 高效液相色谱法； 质量评价

黄芩为唇形科植物黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。通过查阅文献与药房工作经验发现，黄芩饮片一直以来分为枯芩、条芩等2种规格。条芩饮片以片大、质坚实、断面黄者为优，枯芩饮片以片大、空心、边缘黄者质佳[1]。对于2种规格不同的黄芩饮片的应用及评价，目前有几种不同的意见。有医家认为条芩质坚实为优，枯芩大多空心则质量差[2]；有也医家认为枯芩多属于野生老根，次生代谢产物积累丰富，因此其药效好，价格应高于条芩[3]；还有医家认为条芩、枯芩药性不同，功能主治有差异[4]。黄芩素和黄芩苷是黄芩发挥功效的主要活性成分[5]。鉴于此，本研究对不同批次、不同规格的黄芩饮片的黄芩素和黄芩苷含量进行对比分析，以期为药房饮片采购及医院临床用药提供参考。

1 材料

1.1 仪器

岛津LC20A型高效液相色谱仪(LC-20AT高效泵，SPD-20A检测器，LC solution工作站，日本岛津公司)；METTLER AE 240型电子分析天平(d=0.1 mg，北京赛多利斯仪器系统有限公司)；HH-4数显恒温水浴锅(金坛市华峰仪器有限公司)；KQ-250DE型数控超声波清洗器(中国昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试剂与饮片

乙醇(分析纯，北京化工厂)；乙腈、甲醇(色谱纯，美国Fisher公司)；黄芩苷标准品(购自中国药品生物制品检定所)；黄芩素标准品(购自成都曼斯特生物科技有限公司)。所用黄芩饮片取自北京各大医院药房，规格见表1，经北京中医药大学中药鉴定系主任刘春生教授鉴定，基原均为唇形科植物黄芩。

表1 20批黄芩饮片规格

Tab 1 Specification of 20 batches of Radix scutellariae decoction pieces

编号规格编号规格1条芩11枯芩2枯芩、条芩12枯芩、条芩3枯芩、条芩13枯芩、条芩4条芩14枯芩、条芩5枯芩、条芩15枯芩、条芩6枯芩、条芩16枯芩、条芩7条芩17枯芩、条芩8条芩18枯芩、条芩9条芩19枯芩、条芩10条芩20枯芩、条芩

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX-Eclipse XDB C18色谱柱(25 cm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水-磷酸(V∶V∶V=47 ∶53 ∶0.2)；流速：1 ml/min；检测波长：280 nm[6-8]。

2.2 对照品溶液制备

分别取在60 ℃下减压干燥4 h的黄芩苷、黄芩素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成1 ml含60 μg黄芩苷、黄芩素的溶液，即得。

2.3 供试品溶液制备

取黄芩饮片中粉(过四号筛)约0.3 g，精密称定，加70%乙醇40 ml，加热回流3 h，放冷，滤过，滤液置于100 ml容量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一容量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取1 ml，置于10 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.4 精密度试验

取15号样品1份，制备供试品溶液，连续进样6次，测定峰面积，计算黄芩苷、黄芩素峰面积的RSD值分别为0.70%、0.52%。

2.5 稳定性试验

取15号样品1份，制备供试品溶液，分别于0、3、6、9、12、24 h注入高效液相色谱仪，测定峰面积，计算黄芩苷、黄芩素峰面积的RSD值分别为1.86%、0.74%，结果显示，供试品溶液中黄芩苷、黄芩素在24 h内稳定。

2.6 重复性试验

精密称取15号样品6份，制成供试品溶液，测定黄芩苷、黄芩素含量的RSD值分别为1.53%、1.62%。

2.7 样品含量测定

分别测定20批枯芩、条芩等黄芩饮片中黄芩苷、黄芩素含量，结果见表2—3。由表2可见，各批枯芩、条芩等黄芩饮片中黄芩苷含量均达到了《中华人民共和国药典》(2015年版)的标准(9.0%)，其中，枯芩中黄芩苷的平均含量为12.80%，条芩中黄芩苷的平均含量为13.14%。利用SAS 8.2软件对同批黄芩饮片枯芩、条芩的黄芩苷含量进行相关性分析，结果显示，r=0.769，P=0.002<0.01，表明枯芩与条芩中黄芩苷含量的差异有统计学意义，条芩中黄芩苷的含量显著高于枯芩。根据表3的结果计算得出各批黄芩饮片中枯芩中黄芩素的平均含量为2.01%，条芩中黄芩素的平均含量为1.35%。利用SAS 8.2软件对同批黄芩饮片枯芩、条芩的黄芩素含量进行相关性分析，结果显示，r=0.659，P=0.014<0.05，表明枯芩与条芩中黄芩素含量的差异有统计学意义，枯芩中黄芩素的含量显著高于条芩。

表2 20批枯芩、条芩等黄芩饮片中黄芩苷含量(%)

Tab 2 Content of baicalin in 20 batches of Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae(%)

编号枯芩中黄芩苷含量条芩中黄芩苷含量1—13 85211 2312 97313 5013 504—13 17512 8413 81613 4313 897—12 058—12 649—12 1910—12 821113 50—1212 0012 921313 4213 741413 2113 841512 8313 281613 3413 891713 2113 471812 8812 851912 3412 392011 4312 33

注：“—”表示无相关数据

Note：“—” stands for no relevant data available

表3 20批枯芩、条芩等黄芩饮片中黄芩素含量(%)
Tab 3 Content of baicalein in 20 batches of Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae(%)

编号枯芩中黄芩素含量条芩中黄芩素含量1——21 801 8032 152 154——52 242 2462 122 127——8——9——10——111 881 88121 961 96132 002 00141 881 88152 062 06162 032 03172 042 04181 831 83192 152 15201 931 93

注：“—”表示无相关数据

Note：“—” stands for no relevant data available

3 讨论

本研究结果显示，枯芩、条芩中黄芩苷、黄芩素含量的差异均有统计学意义，其中，枯芩中黄芩素含量较高，条芩中黄芩苷含量较高。其机制目前无从考证，猜想可能为黄芩老根中控制黄芩素合成黄芩苷的糖基转移酶及其他相关酶基因的表达量降低所致。《中华人民共和国药典》(2015年版)中“黄芩”项下指标性成分的含量测定只规定了黄芩苷一项，但本研究者认为不能仅凭黄芩苷含量的高低来评价黄芩饮片质量的优劣，还应结合其他生物活性成分的含量。相关研究报道显示，黄芩苷、黄芩素的药理作用相近且黄芩素进入体内后迅速进入血液循环，而黄芩苷口服不易吸收，在肠道经酶水解为黄芩素后方可吸收入血[9]。虽然黄芩素极性较其他黄酮类化合物苷元高，但在煎煮过程中其的水溶性仍弱于黄芩苷，因此，黄芩饮片中的黄芩苷和黄芩素在进入患者体内血液循环的过程中均受到一定程度的阻碍[10]，根据已有研究仍不能断论枯芩、条芩孰优孰劣。

本研究探讨了枯芩、条芩中2种主要活性成分黄芩苷、黄芩素的含量差异，尽管不能得出其中一种规格的质量明显优于另一种的结论，但对医院药房采购及临床用药仍有一定的参考价值。

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Comparison of Major Bioactive Components between Radix Scutellariae with Xylem Rotten and Strip Type Radix scutellariaeΔ

LU Haisheng1, CHEN Mingyang2, LIU Chunsheng2
(1.Dept.of Pharmacy, Wangjing Hospital of CACMS, Beijing 100102, China; 2.School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100102，China)

OBJECTIVE：To compare the major bioactive components between Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae, so as to provide reference of drug purchaseing for pharmacy and clinical application in clinic. METHODS: HPLC method was adopted, the chromatographic column was Agilent ZORBAX-Eclipse XDB C18(25 cm×4.6 mm，5 μm), with mobile phase of methanol-water-phosphoric acid(V∶V∶V=47 ∶53 ∶0.2)and flow rate of 1 ml/min, and detection wavelength at 280 nm. Correlation between each set of data was analyzed by SAS 8.2 software. RESULTS: The average content of baicalin in Radix scutellariae with xylem rotten was 12.80%, the average content of baicalein was 2.01%; and the average content of baicalin in Strip type radix scutellariae was 13.14%, the average content of baicalein was 1.35%. According to the analysis, the differences were statistically significant among the average content of baicalin in Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae, the average content of baicalein(P<0.05). CONCLUSIONS: The content of baicalein is relatively high in Radix scutellariae with xylem rotten, while baicalin is relatively high in Strip type radix scutellariae. So it’s impossible to tell which is better than the other. The conclusion of this study can provide reference of drug purchaseing for pharmacy and clinical application in clinic.KEYWORDS Radix scutellariae; Radix scutellariae with xylem rotten; Strip type radix scutellariae; HPLC; Quality evaluation

国家自然科学基金资助项目(No.81373909)；公益性行业科研专项经费项目(No.201507002-4-2)

R927.2

A

1672-2124(2016)12-1594-03

2016-09-07)

*主管药师。研究方向：中药材质量评价研究 E-mail：wjyyypk@163.com

#通信作者：教授，博士生导师。研究方向：药用植物与分子生药学。E-mail：max_liucs@263.net

DOI 10.14009/j.issn.1672-2124.2016.12.003