实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA的价值分析与研究

杜锴

实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA的价值分析与研究

杜锴

目的探讨选择实时荧光定量PCR法对乙肝病毒DNA实施检测的临床价值。方法250例乙型肝炎患者作为此次实验对象,临床选择血清学标志物的方法实施疾病检测后最终有效确诊。对所有乙型肝炎患者临床均选择实时荧光定量PCR法实施疾病检测,对最终检测结果进行分析。结果乙型肝炎患者分别选择荧光PCR法以及血清学标志物方法实施疾病检测,最终获得的检测结果基本表现一致。临床选择实时荧光定量PCR法完成疾病检测后,最终获得的病毒DNA数据更为准确。实时荧光定量PCR法对大三阳临床最终检测阳性率达到了96%；对小三阳,临床最终检测阳性率达到了69%；而对HbsAg(-)、乙型肝炎表面抗体(HbsAb)(-)以及HbeAb(-)以及乙型肝炎E抗原(HbeAg)(-)最终检测阳性率只为2.21%。对于大三阳患者以及小三阳患者的血清PCR检测结果进行观察发现,均表现出较高的拷贝数。结论乙型肝炎患者临床选择实时荧光定量PCR法实施疾病检测,针对乙肝病毒以及相关数据完成检测后可以获得准确结果,从而证明对乙型肝炎患者在实施疾病检测的过程中,选择实时荧光定量PCR法以及乙肝病毒DNA方法均可以获得较为理想的效果,临床均可以广泛普及应用。

实时荧光定量PCR法；乙肝病毒；临床价值

乙型肝为被归属为感染性疾病的一种,主要因为患者出现了乙肝病毒感染的情况后,对患者的肝脏出现炎性病变的情况,最终表现出的一种综合性疾病。此种疾病传播较为广泛,对患者会造成极为严重的危害,较易表现出持续性带病毒状态的情况,最终出现慢性感染的现象［1］。少数患者会表现出原发性肝细胞癌以及出现肝硬化的情况。以往临床在对乙型肝炎病毒携带者进行疾病检测的过程中,主要选择血清学标志法实施疾病检测,其主要通过对患者的血液实施检测,最终有效完成检测［2］。但是在实施血清学检测的过程中,如果操作方式出现了失误,最终较易导致工作人员出现感染的情况。为确保乙型肝炎患者的乙肝病毒DNA可以获得准确检测结果,本次研究主要将本院收治的乙型肝炎患者作为主要对象,临床分别选择实时荧光定量PCR法以及血清学标志物方法展开乙肝病毒DNA检测,具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2014年3月～2016年5月收治的乙型肝炎患者250例作为此次实验对象；患者年龄16～53岁,平均年龄(36.39±5.71)岁。

1.2 方法 所有乙型肝炎患者临床分别实施实时荧光定量PCR法检测以及血清学标志法针对乙肝病毒DNA数据实施检测。之后针对两种方法的检测结果进行对比。主要选择广州达安PCR荧光分析仪对所有乙型肝炎患者的乙肝病毒DNA数据展开实时荧光定量PCR检测。临床需要做好一次性真空采血管的准备工作,清晨抽取患者5 ml静脉血,对血清实施离心分离,于-20℃的环境中进行冻存备用；之后对所有乙型肝炎患者实施集中检测。临床主要选择分辨荧光免疫分析技术完成乙肝标志物检测；临床选择实时荧光定量PCR法完成乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测［3］。

1.3 疗效判断标准［4］显效：临床选择实时荧光定量PCR法对乙肝病毒完成检测的数据,同血清学标志法检验结果进行对比,检测结果较为一致,并且选择实时荧光定量PCR法完成检测后,能够获得更为准确的乙肝病毒检测数据,大三阳者［乙型肝炎表面抗原(HbsAg)(+)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)(+)及乙型肝炎核心抗体(HbcAb)(+)］以及小三阳者［HbsAg(+)、HbcAb(+)及乙型肝炎肝炎E抗体(HbeAb)(+)］表现出更高的拷贝数；效果不明显：临床选择实时荧光定量PCR法对乙肝病毒完成检测的数据,同血清学标志法检验结果进行对比,表现出少许的差别,并且实时荧光定量PCR法完成检测后,在最终获得的准确度以及其他方面无突出表现。无效：临床选择实时荧光定量PCR法对乙肝病毒完成检测的数据,同血清学标志法检验结果进行对比,表现出的差别较大,并且选择实时荧光定量PCR法完成检测后的数据更为准确。

2 结果

选择荧光PCR方法对乙型肝炎患者的病毒DNA数据实施检测,同选择普通方法血清学标志法实施检测的乙型肝炎病毒DNA数据结果进行比较,较为一致,但是选择实时荧光定量PCR法获得的检测结果准确性更高。对大三阳临床最终检测阳性率达到了96%；对小三阳,临床最终检测阳性率达到了69%；而对HbsAg(-)、乙型肝炎表面抗体(HbsAb)(-)以及HbeAb(-)以及乙型肝炎E抗原(HbeAg)(-)最终检测阳性率只为2.21%。从而证明在实施乙肝病毒DNA检测的过程中,实时荧光定量PCR法的应用可以获得更为显著的效果。

3 讨论

乙型肝炎属于消化内科较为普遍的一种疾病。其主要于患者的肝脏位置出现,此种疾病的出现对人们会造成严重的影响。作为一种严重的传染病,在众多传播途径中血液传播属于较为常见的一种,对此需要禁止同患者的血液进行接触；此外还能够通过母婴传播,所有乙型肝炎患者禁止生育,避免新生儿为乙肝病毒携带者。此外皮肤黏膜破损传播以及性传播均会导致乙型肝炎患者出现乙肝传染的情况。依据疾病病程的长短,主要将乙肝疾病分为急性乙型肝炎疾病以及慢性乙型肝炎疾病。于字面意思进行解释发现,同慢性乙型肝炎进行比较,急性乙型肝炎对患者造成的影响更为严重,甚至会对患者的生命安全产生较为严重的影响。依据患者疾病的严重程度,主要分为乙肝携带者、活动性乙型肝炎患者、重型肝炎患者以及肝炎肝硬化患者［5-9］。

当前在对血清HBV-DNA实施检测的过程中,选择实时荧光定量PCR法实施检测可以获得显著效果,表现出较优的检测重复性,其针对抗病毒药物疗效在实施观察过程中的相关问题可以加以有效解决。此种方法临床应用检测原理为：对于PCR反应体系,除了包括普通PCR需要的引物、还包括荧光染料以及荧光基团,对于此类荧光物质存在特定波长,可以有效作为临床检测过程中的荧光探针［10-15］。对于仪器能够有效自动检出,通过将荧光信号进行积累,针对PCR进程可以做到实时监测。在PCR循环过程中对测量的信号可以作为实验荧光阈值的坐标。选择实时荧光定量PCR检测的方法,即使患者表现出微量HBV-DNA的情况,则也可以获得准确的检测结果［16］。

综上所述,对于乙型肝炎患者的乙肝病毒DNA选择实时荧光定量PCR的方法实施检测,同选择血清学标志法检测结果进行分析发现,可以获得更为显著的测定结果,并且获得的综合内容更为全面,进而为乙型肝炎疾病患者临床治疗方案的研究提供可靠依据,从而证明对乙型肝炎患者临床选择实时荧光定量PCR法完成乙肝病毒DNA检测,最终可以为检测结果的准确性做出有效保证。

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Analysis and research of value by real-time fluorescence quantification PCR method in detection of hepatitis B virus DNA

DU Kai.Department of Nuclear Medicine,Henan Nanyang City First People’s Hospital,Nanyang 473000,China

ObjectiveTo investigate clinical value by real-time fluorescence quantification PCR method in detection of hepatitis B virus DNA.MethodsThere were 250 patients with hepatitis B as study subjects.All patients received real-time fluorescence quantification PCR method for disease detection,and their final detection outcomes were analyzed.ResultsThe hepatitis B patients received real-time fluorescence quantification PCR method and serologic markers for disease detection,with basically the same outcomes.Clinical implement of real-time fluorescence quantification PCR method showed more accurate data on virus DNA.Realtime fluorescence quantification PCR method had final positive detection rate of big three positive as 96% and 69% of small three positive,while its final positive detection rate was 2.21% of HbsAg(-),hepatitis B surface antibody(HbsAb)(-),HbeAb(-) and hepatitis B e antigen(HbeAg)(-).Serum PCR detection in patients with big three positive and small three positive all showed high copy number.ConclusionClinical selection of real-time fluorescence quantification PCR method for disease detection in hepatitis B patients can provide accurate outcome after complete detection of hepatitis B virus and related data.Therefore,implement of real-time fluorescence quantification PCR method and hepatitis B virus DNA for disease detection in hepatitis B patients can both show ideal effect,and they are worth widely clinical promotion and application.

Real-time fluorescence quantification PCR method; Hepatitis B virus; Clinical value

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.01.022

2016-12-06］

473000 河南省南阳市第一人民医院核医学科