油菜花粉中挥发性成分的GC-MS分析

王 丽， 贾 安， 黄 涛，常丽萍

(黄河科技学院，河南郑州 450006)

油菜花粉中挥发性成分的GC-MS分析

王 丽， 贾 安， 黄 涛，常丽萍

(黄河科技学院，河南郑州 450006)

[目的]建立提取、分析油菜花粉中所含挥发油成分的方法。[方法]通过4种方法提取油菜花粉挥发性成分，分别为用蒸馏水作溶剂采用甲法(适合密度<1的挥发油)、乙法(适合密度>1的挥发油)对油菜花粉挥发油进行提取，提取后的残渣再用无水乙醚进行二次提取并浓缩，最后一种方法则用环已烷直接对油菜花粉挥发油进行提取并浓缩，最后得到4个样品，通过气质联用方法对以上样品进行分析测定。[结果]甲法、无水乙醚及环已烷所提成分相对较多，且均为直链烷烃，如C27H56、C28H58。其中无水乙醚与环已烷所提取的浸膏得率相对较高，分别为8.55%、8.63%。[结论]环已烷提取挥发油的效果最好。油菜花粉中所含挥发油均为直链烷烃。

油菜花粉；挥发油；成分；GC-MS

花粉含有丰富的功能性物质，如蛋白质、维生素、微量元素、黄酮类化合物[1]，这些物质协同作用于机体，调节机体的多种功能，平衡体内营养，增强新陈代谢，防止毛细血管通透性的障碍。花粉还能促进内分泌腺的发育，提高和调节内分泌腺分泌，因此对由内分泌功能紊乱引起的疾病有治疗作用。油菜花粉中所含谷氨酸、脯氨酸等20多种氨基酸[2]，可以改善前列腺组织的血液循环，减轻水肿，缓解前列腺肥大引起的尿道梗阻[3]。油菜花粉能增强毛细血管强度、低血脂[4-5]，对治疗糖尿病、贫血、便秘、防癌抗癌等均有疗效[6]。为了更好地了解油菜花粉的药效物质，笔者对其挥发性成分进行GC-MS分析、鉴定，以期为开发利用花粉资源提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器。WB-2002型水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)；R-1002N型旋转蒸发仪(郑州长城科工贸有限公司)；SHB-ⅢA型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；KQ2200E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；DHG9076A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)；1810-C型石英自动双重纯水蒸馏器(金坛市晶玻实验仪器厂)；AL204型电子天平[梅特勒—托利多仪器(上海)有限公司]；XFB-500型高效中药粉碎机(吉首市中诚制药机械厂)；Theremo DSQⅠⅠ 型气质联用仪，赛默飞世尔科技中国有限公司)。

1.1.2 试材。油菜花粉，采自于新疆昭苏县。无水乙醚，天津市风船化学试剂科技有限公司；石油醚，天津市风船化学试剂科技有限公司；环己烷，天津市德恩化学试剂有限公司；试验所用水均为蒸馏水，所用试剂均为分析纯。

1.2 方法

1.2.1 提取分离。该试验采用4种提取方法得到4个样品。将采集的油菜花粉用XTB-500型高速中药粉碎机打成粉末，过40目筛，精密称定2份粉末分别为50.003 2、50.005 1 g，分别移入容量为500 mL的圆底瓶里，用4倍量的蒸馏水，分别用甲法、乙法挥发油提取器进行提取，提取时间为1 h，过滤，再用4倍量蒸馏水进行二次提取，时间为1 h。将提取器内上下层分离，从而得到挥发油，在挥发油中加入少量无水硫酸钠以去除夹杂的极少水分，再用无水乙醚进行萃取，使其自然挥干、无乙醚味为止，甲法、乙法分别得到样品1、样品2。

上述2种方法提取后合并滤渣(110.003 2 g)，先用1.8倍量的无水乙醚回流提取，提取1 h，然后将剩余残渣再加1.5倍无水乙醚回流提取，时间为1 h，最后将剩余残渣再用1.5倍量无水乙醇回流提取30 min，过滤，将3次提取液合并，通过减压浓缩成浸膏，即为样品3。

精密称定油菜花粉5.002 4 g，用100 mL环已烷回流提取，连续提取2次，每次提取时间为30 min，合并2次滤液，减压浓缩得浸膏为0.431 7 g，浸膏用50 mL环已烷溶解，放两小勺无水硫酸钠，挥干后再用环已烷萃取，将萃取液移至小瓶中，自然挥干待测，即为样品4。

1.2.2 样品气质联用的测定条件。Rts-Ms(30 mm×0.25 mm 0.25涂层)，高纯He气为载气，进样温度280 ℃，分流进样(10∶1)，进样量1.5 μL，载气流速1.5 μL/min，程序升温起始温度40 ℃，保持1 min后以10 ℃/min升至250 ℃，保持20 min，质谱接口250 ℃，E2源温度250 ℃，电子轰击能量60 ev，扫描范围50～650 amu，全离子扫描，采集延迟3 min，归一化法计算相对含量。

2 结果与分析

2.1 各样品浸膏率 样品1、样品2的浸膏得率分别为1.15%、0.08%。样品2因为得率太低，放弃该样品。样品3的浸膏量为9.406 7 g，所得浸膏率为8.55%，样品4的浸膏得率为8.63%。可见，水蒸气蒸馏法提取效果不好，回流提取法效果更加明显，且用环已烷试剂所提取的浸膏得率最多，因此环已烷的提取效果最好。

2.2 气质联用分析 经测定，用蒸馏水作溶剂的甲法所提浸膏样品1、无水乙醚所提浸膏的样品3、环已烷所提浸膏的样品4的GC-MS分离总流程图如图1所示。由表1～3可见，从样品1中分析鉴定出10个化学成分，其中相对含量最高的是9号所对应的分子式为C28H58的化合物，其含量为31.57%；样品3分析鉴定出6个化学成分，其中相对含量较高的是3号与5号，分别所对应的分子式为C28H58、C29H60的化合物，含量分别为41.71%、46.00%；样品4中分析鉴定出9个化学成分，其相对含量较高的分别是分子式为C28H58、C27H56的化合物，含量分别为38.36%、44.78%。由此可见，用蒸馏水作溶剂的甲法、无水乙醚及环已烷所提成分种类均较多，且均为直链烷烃。

表1 样品1中各成分的GC-MS所得的相对含量

表2 样品3中各成分的GC-MS所得的相对含量

图1 样品1(a)、样品3(b)和样品4(c)的GC-MS总离子流程图Fig. 1 Total ion flow chart of sample 1 (a), sample 3 (b) and sample 4 (c) by GC-MS

3 小结

(1)从样品浸膏率来看，水蒸气蒸馏法提取效果不好，回流提取法效果更加明显，且用环已烷试剂所提取的浸膏得率最多，为8.63%，因此环已烷的提取效果最好。

(2)用蒸馏水作溶剂的甲法、无水乙醚及环已烷所提成分种类均较多，且均为直链烷烃，如C27H56、C28H58。

表3 样品4中各成分的GC-MS所得的相对含量

[1] 谢姣,王华,任延远,等.松花粉的功效及应用展望[J].食品与药品,2011,13(3):139-141.

[2] 邓倩,童珊珊,丁丽霞,等.松花粉活性成分分析方法及药理作用的研究进展[J].药物分析杂志,2012,32(1):171-178.

[3] 魏淑莲,王佳旭,李文婕,等.前列腺康在女性前列腺病中的作用[J].临床合理用药杂志,2015,8(1):176-178.

[4] 程道梅.蜂花粉营养成分及其在老年营养保健中的作用[J].中国食物与营养，2011,17(3):85-88.

[5] 郭雪微,卢梃,鲍艳江,等.油菜蜂花粉黄酮类化合物抗氧化等作用的临床观察[J].北京中医药,2011,30(7):488-491.

[6] 孙毅,杨义芳,杨必成,等.油菜蜂花粉生理活性及作用机制研究进展[J].中国蜂业,2010,61(9):5-9.

GC-MS Analysis of Volatile Composition of Rape Pollen

WANG Li,JIA An，HUANG Tao et al

(College of Huanghe Science and Technology,Zhengzhou,Henan 450006)

[Objective] The research aimed to establish extraction and analysis method of volatile oil contained in rape pollen.[Method]By four different extraction methods of volatile components of rape pollen, using distilled water as solvent,respectively by A method (for volatile oil density less than 1), B method (for volatile oil density greater than 1) to extract the volatile oil of rape pollen,extraction residue was extracted with anhydrous ether for two times and concentrated,and finally a method was to directly with cyclohexane on the volatile oil of rape pollen extracted and concentrated, got 4 samples at last, through the GC-MS analysis method to determine the above samples.[Result]A method, anhydrous ether and cyclohexane by composition was relatively more, and for the straight-chain alkanes, such as C27H56, C28H58. The anhydrous ether and cyclohexane extract extraction rate of extractum was relatively high, respectively 8.55%, 8.63%.[Conclusion] Cyclohexane extraction of volatile oil have the best effect. Rape pollen contained in the volatile oil are alkanes.

Rape pollen;Volatile oil;Component;GC-MS

郑州市国际合作项目(141PGJHZ541)。

王丽(1979- )，女，河南邓州人，副教授，硕士，从事中药质量标准研究。

2016-11-09

S 634.3

A

0517-6611(2016)34-0119-02