MTP基因多态性对辛伐他汀治疗T2DM合并脂代谢紊乱患者调脂效果的影响

李风军，王 敏（青岛市胶州中心医院药剂科，山东青岛 266300）

·精准医疗·

MTP基因多态性对辛伐他汀治疗T2DM合并脂代谢紊乱患者调脂效果的影响

李风军＊，王 敏（青岛市胶州中心医院药剂科，山东青岛 266300）

目的：探讨微粒体三酰甘油转运蛋白（MTP）基因多态性对辛伐他汀治疗2型糖尿病（T2DM）合并脂代谢紊乱患者调脂效果的影响。方法：选择2015年6-12月于我院住院治疗的T2DM伴高胆固醇血症患者120例，予盐酸二甲双胍缓释片、马来酸依那普利片和辛伐他汀片对症治疗。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法检测各患者MTP G493T基因型，采用AU 400型全自动生化分析仪分别于治疗前和治疗后第4周检测其总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平，并分析患者不同基因型对血脂水平变化的影响。结果：120例患者中，MTP G493T GG、GT、TT基因型患者分别占61.67%、26.67%和11.67%，符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。治疗前，各基因型患者TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。经4周药物治疗后，TT基因型患者TC、LDL-C水平的降低幅度显著低于GG、GT基因型患者，差异有统计学意义（P＜0.05）；而GT基因型患者TC、LDL-C水平的降低幅度与GG基因型患者比较，各基因型患者TG、HDL-C水平的降低幅度比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；各基因型患者不良反应总发生率比较，差异亦无统计学意义（P＞0.05）。结论：TT基因型患者应用辛伐他汀治疗后，其TC、LDL-C水平的改善情况较差；MTP G493T基因多态性可能与辛伐他汀治疗T2DM合并脂代谢紊乱患者的调脂效果相关。

2型糖尿病；高胆固醇血症；MTP基因多态性；辛伐他汀；调脂效果；血脂水平

近年来，随着人们生活水平的提高，生活方式也发生了很大的变化，高脂高糖饮食、运动量减少等原因导致2型糖尿病（T2DM）的发病率越来越高，并有逐渐年轻化的趋势[1]，已引起临床高度重视。T2DM的致病因素比较复杂，患者的胰岛功能在各种因素作用下发生减退，机体发生胰岛素抵抗，进而导致其血糖升高，脂质代谢紊乱，因此调脂治疗是T2DM治疗的重点。目前，临床多应用他汀类药物调节T2DM患者的脂质代谢紊乱状态，但调脂效果不一[2]。多数T2DM患者使用辛伐他汀治疗可获得满意的降脂效果，但也有部分患者降脂效果不佳，其原因尚未完全明确。随着人类基因组计划和人类基因组单体型图的完成，遗传多态性位点与特定疾病、性状风险之间的关联也日益受到临床关注。T2DM的遗传学研究取得了巨大的进展，基因多态性与疾病的相关性研究已成为目前临床工作的热点。微粒体三酰甘油转运蛋白（MTP）是一种影响极低密度脂蛋白（VLDL）装配的关键酶，而VLDL与机体胰岛素抵抗相关，与T2DM的发生和进展关系密切[2]。因此，研究MTP基因多态性对T2DM的调脂治疗具有指导意义。本研究初步探讨了MTP G493T基因多态性对辛伐他汀治疗T2DM合并脂代谢紊乱患者调脂效果的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究经我院医学伦理委员会批准，选择2015年6-12月于我院住院治疗的T2DM伴高胆固醇血症患者120例，年龄42～67岁。纳入标准：（1）符合世界卫生组织（WHO）关于T2DM诊断标准者，即空腹血糖（FBG）≥7.0 mmol/L，餐后2小时血糖（2 hPG）≥11.1 mmol/L；（2）总胆固醇（TC）为5.72～8.23 mmol/L，三酰甘油（TG）＜4.25 mmol/L，低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）为3.64～6.50 mmol/L；（3）所有患者在研究前1周内未使用其他调脂药物，同时所有患者服用降血压和降血糖药物，且效果均较理想；（4）患者知情同意并签署知情同意书。排除标准：（1）1型糖尿病或其他类型的糖尿病患者；（2）有严重肝肾功能不全的患者；（3）合并有酮症酸中毒、高渗透性昏迷的患者；（4）对治疗药物有禁忌的患者。

1.2 治疗方法

所有患者均严格控制饮食，给予盐酸二甲双胍缓释片（上海上药信谊药厂有限公司，批准文号：国药准字H20050699，规格：0.5 g）0.5～1.0 g，po，qd降糖；马来酸依那普利片（湖南千金湘江药业股份有限公司，批准文号：国药准字H20066383，规格：10 mg）5～10 mg，po，bid降血压；辛伐他汀片（山东鲁抗医药集团赛特有限责任公司，批准文号：国药准字H20083840，规格：20 mg）10～20 mg，po，qd降脂。所有患者均连续用药4周。

1.3 基因型检测与分析

所有患者均晨起空腹抽取静脉血5 ml，经乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝后，使用DTC-3G型聚合酶链反应（PCR）仪（西安天隆科技有限公司）以十二烷基硫酸钠（SDS）-蛋白酶K法提取患者DNA，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RELP）法检测其MTP G493T基因型。PCR引物（上游：5′-GGAGTTTCCAGGGACAAG-3′；下游：5′-TGTGGGAGGGTAGTAAGG-3′）由上海振谱生物科技公司提供。PCR反应体系（总体积为25 μl）包括TaqDNA聚合酶、10×Buffer、4×dNTP、引物、模板DNA和ddH2O；PCR条件为：94℃变性30 s，56℃退火30 s，72℃延伸40 s，一共35个循环；取扩增产物5 μl于紫外灯下经2%琼脂糖凝胶电泳鉴定，以PCR双脱氧链终止法测序。酶切体系（总体积为10 μl）包括PCR产物、HphⅠ酶、10×Buffer和ddH2O，于37℃酶切2 h；取酶切产物8 μl经1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定。

1.4 血脂水平检测

所有患者分别于治疗前和治疗后第4周空腹12 h后抽取静脉血3 ml，以离心半径12.5 cm、转速3 000 r/min离心10 min，分离血清。采用AU 400型全自动生化分析仪（日本Olympus株式会社）检测其TC、TG、LDL-C、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平，并记录结果。

1.5 统计学方法

采用SPSS 16.0软件对数据进行统计分析，计量资料以±s表示，组间比较采用单因素方差分析；计数资料以百分比表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者临床资料和基因型分型

120例患者中，男性63例，女性57例，平均年龄（52.86± 8.13）岁，体质量指数（BMI）（25.68±4.87）kg/m2，FBG、2 hPG水平分别为（7.51±1.63）、（16.03±5.88）mmol/L。GG基因型患者74例（61.67%），GT基因型患者32例（26.67%），TT基因型患者14例（11.67%）。χ2检验结果显示，MTP G493T各基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）；χ2检验和单因素方差分析结果显示，各基因型患者性别、年龄、BMI、FBG、2 hPG水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），详见表1。

表1 120例患者的临床资料和MTPG493T基因型分型（±s）Tab 1 Clinical data and MTP G493T genotype of 120 patients（±s）

表1 120例患者的临床资料和MTPG493T基因型分型（±s）Tab 1 Clinical data and MTP G493T genotype of 120 patients（±s）

基因型GG GT TT合计n（%）74（61.67）32（26.67）14（11.67）120（100）男性，例36 19 8 63女性，例38 13 6 57年龄，岁51.67±8.54 52.42±7.94 53.24±8.94 52.86±8.13 BMI，kg/m225.89±4.53 26.15±3.89 26.32±4.17 25.68±4.87 FBG，mmol/L 7.65±1.34 7.58±1.46 7.69±1.82 7.51±1.69 2 hPG，mmol/L 15.58±5.62 16.25±5.18 16.69±5.46 16.03±5.88

2.2 不同MTP基因型患者治疗前血脂水平比较

治疗前，3种基因型患者TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。不同MTP基因型患者治疗前血脂水平比较见表2。

表2 不同MTP基因型患者治疗前血脂水平比较（±s ，mmol/L）Tab 2 Comparison of blood lipid level before treatment among different MTPgenotypes（±s ，mmol/L）

表2 不同MTP基因型患者治疗前血脂水平比较（±s ，mmol/L）Tab 2 Comparison of blood lipid level before treatment among different MTPgenotypes（±s ，mmol/L）

基因型GG GT TT n 74 32 14 TC 5.89±1.19 5.74±1.22 5.83±1.26 TG 1.72±0.63 1.79±0.58 1.69±1.04 LDL-C 3.08±1.07 3.02±0.95 2.94±1.02 HDL-C 1.65±0.42 1.58±0.39 1.66±0.44

2.3 不同MTP基因型患者治疗后血脂水平降低幅度比较

经4周药物治疗后，TT基因型患者TC水平的降低幅度低于GG基因型和GT基因型患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）；TT基因型患者LDL-C水平的降低幅度低于GG基因型和GT基因型，差异均有统计学意义（P＜0.05）。GT基因型患者TC、LDL-C水平的降低幅度与GG基因型患者比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；各基因型患者TG、HDL-C水平的降低幅度比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。不同MTP基因型患者治疗后血脂水平降低幅度比较见表3。

表3 不同MTP基因型患者治疗后血脂水平降低幅度比较（±s ，mmol/L）Tab 3 Comparison of blood lipid decrease after treatment among different MTPgenotypes（±s ，mmol/L）

表3 不同MTP基因型患者治疗后血脂水平降低幅度比较（±s ，mmol/L）Tab 3 Comparison of blood lipid decrease after treatment among different MTPgenotypes（±s ，mmol/L）

注：与GG基因型比较，＊P＜0.05；与GT基因型比较，#P＜0.05Note：vs.GG genotype，＊P＜0.05；vs.GT genotype，#P＜0.05

HDL-C 0.09±0.10 0.09±0.08 0.10±0.11基因型GG GT TT n 74 32 14 TC 1.82±0.84 1.76±0.75 1.41±0.63＊#TG 0.62±0.53 0.64±0.55 0.59±0.47 LDL-C 0.95±0.71 0.89±0.63 0.72±0.65＊#

2.4 不同MTP基因型患者治疗后不良反应发生率比较

经过4周药物治疗后，GG基因型患者发生恶心和皮疹各1例，GT基因型患者发生呕吐1例，TT基因型患者发生恶心1例；3种基因型患者治疗后均未出现肝功能异常和横纹肌溶解等严重不良反应，且其不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。不同MTP基因型患者治疗后不良反应发生情况比较见表4。

3 讨论

T2DM是临床常见的代谢性疾病，以持续性血糖增高为特征性临床表现。有调查证实，多数T2DM患者合并有脂质代谢紊乱所致的高脂血症[3]。血脂异常状态下可引起心、脑、肾等重要器官血管损害，导致血管硬化、弹性降低、管腔狭窄、局部血供减少而引起缺血缺氧性病变，也是导致T2DM患者发生动脉粥样硬化、冠心病、脑血管疾病、糖尿病肾病、周围神经病变等糖尿病并发症的危险因素[4]。在既往很长一段时间内，人们对于糖尿病的认识比较局限，治疗策略也仅以纠正糖代谢紊乱为主[5]。近年来，随着医学研究的不断深入，越来越多的学者认识到T2DM与血脂异常的关联，并开始重视对T2DM患者血脂异常的治疗[6]。

表4 不同MTP基因型患者治疗后不良反应发生情况比较[例（%%）]Tab 4 Comparison of the incidence of ADR among different MTPgenotypes after treatment[cases（%%）]

目前，临床常用的调脂药物多为他汀类，其中辛伐他汀是其代表药物之一[7]。大量研究已证实，对T2DM患者在控制血糖的基础上进行血脂监测和药物干预有利于患者的预后[8]。但在实际工作中发现，并不是所有T2DM患者经过调脂治疗后均可获得满意的效果，有少部分患者虽然也进行了调脂治疗，但效果却并不理想；导致这一现象发生的原因较为复杂，现有文献也尚未完全阐述清楚[9]。MTP是存在于细胞微粒体、内质网腔内的一种蛋白质，参与囊泡间脂质转运。该蛋白质是由2个共价连接的多肽组成的异二聚体，包括M亚单位和P亚单位[10]。有研究发现，MTP的表达可明显增加脂蛋白（含载脂蛋白B）的形成，减少载脂蛋白在内质网的降解，故其编码基因MTP G493T的多态性可能会影响MTP的转录活性，进而影响载脂蛋白的水平，使药物代谢过程受到影响，导致机体对药物的反应性存在着一定的差异[11]。

本研究以《中国2型糖尿病合并血脂异常防治专家共识（2011年）》[6]为指导，以采用辛伐他汀调脂治疗的T2DM合并高胆固醇血症患者为对象，初步探讨不同MTP G493T基因型患者调脂效果的差异，从基因水平探索T2DM合并高胆固醇血症患者采用辛伐他汀治疗的效果，具有一定的新颖性。本研究发现，120例患者中，MTP G493T GG、GT、TT基因型患者分别占61.67%、26.67%和11.67%，提示本研究中T2DM合并高胆固醇血症患者以GG基因型最为常见，TT基因型患者较少。经4周药物治疗后，TT基因型患者TC、LDL-C水平的降低幅度均显著低于GG基因型和GT基因型，差异均有统计学意义（P＜0.05）；而3种基因型患者TG和HDL-C水平的降低幅度比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。这一结果表明，TT基因型患者应用辛伐他汀治疗后血脂异常的改善情况较差，主要表现为对TC、LDL-C水平的调节作用较差，提示TT基因型患者可考虑使用其他调脂药物替代辛伐他汀。

根据辛伐他汀药品说明书，由该药引起的不良反应主要包括恶心、呕吐、皮疹、肝功能异常和横纹肌溶解等，故本研究在此基础上，对由辛伐他汀引发的不良反应及其发生率进行统计。结果显示，3种基因型患者治疗后均未发生肝功能异常和横纹肌溶解等严重不良反应，其不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示T2DM患者采用常规剂量的辛伐他汀治疗后，其不良反应的发生率可能与MTP G493T基因多态性无关。

本研究仅初步探讨了MTP G493T基因多态性对辛伐他汀治疗T2DM合并脂代谢紊乱患者调脂效果的影响，发现TT基因型患者经辛伐他汀治疗后血脂的改善情况相对较差，MTP G493T基因多态性可能与辛伐他汀的调脂作用有关。但本研究并未对其机制进行阐述，也并未探讨联合使用的降压、降糖药物对调脂效果的影响，故还有待于进一步深入研究。

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（编辑：张元媛）

Effects of MTP Gene Polymorphism on the Lipid-regulating Effect of Simvastatin in the Treatment of T2DM Complicating with Lipid Metabolism Disorder

LI Fengjun，WANG Min（Dept.of Pharmacy，Jiaozhou Central Hospital of Qingdao，Shandong Qingdao 266300，China）

OBJECTIVE：To investigate the effects of MTP gene polymorphism on the lipid-regulating effect of simvastatin in the treatment of T2DM complicating with lipid metabolism disorder.METHODS：120 T2DM inpatients with hypercholesterolemia were selected from our hospital during Jun.to Dec.2015 and given Metformin hydrochloride sustained-release tablets，Enalapril maleate tablets and Simvastatin tablets.PCR-RFLP was used to detect MTP G493T genotype.The levels of TG，TC，LDL-C and HDL-C were detected by AU 400 automatic biochemistry analyzer before treatment and the 4th week after treatment.The effects of different genotype on the change of blood lipid level was analyzed.RESULTS：Among 120 patients，the patients with MTP G493T GG，GT，TT genotypes accounted for 61.67%，26.67%and 11.67%，respectively，meeting Hardy-Weinberg balance（P＞0.05）. Before treatment，there was no statistical significance in TC，TG，LDL-C and HDL-C among different genotypes（P＞0.05）.After 4 weeks of treatment，the decrease of TC and LDL-C in TT genotype patients were lower than that in GG and GT genotype，with statistical significance（P＞0.05）.There was no significant difference in the decrease of TC and LDL-C between GT and GG genotype，the decrease of TG and HDL-C（P＞0.05）.There was no significant difference in the incidence of ADR among different genotypes（P＞0.05）.CONCLUSIONS：After simvastatin treatment，the improvement of TC and LDL-C in patients with TT genotype is poor.MTP G493T gene polymorphism may be associated with the lipid-regulating effect of simvastatin in the treatment of T2DM patients with lipid metabolism disorder.

T2DM；Hypercholesterolemia；MTP gene polymorphism；Simvastatin；Lipid-regulating effect；Blood lipid level

R969.3

A

1001-0408（2016）35-4897-03

2016-02-29

2016-06-21）

＊副主任药师。研究方向：临床药学。电话：0532-58775365。E-mail：lifengjun120@163.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2016.35.01