紫外分光光度法测定藤梨根中秦皮乙素的含量

滕 坤，谭 波，滕 云，赵晓飞

(1.通化师范学院 制药与食品科学学院，吉林 通化134002；2.吉林吉春制药股份有限公司，吉林 通化 134002；3.通化市通化县三棵榆树镇中心校，吉林 通化 134002)



紫外分光光度法测定藤梨根中秦皮乙素的含量

滕 坤1，谭 波2，滕 云3，赵晓飞1

(1.通化师范学院 制药与食品科学学院，吉林 通化134002；2.吉林吉春制药股份有限公司，吉林 通化 134002；3.通化市通化县三棵榆树镇中心校，吉林 通化 134002)

目的:测定藤梨根中秦皮乙素的含量.方法:采用甲醇超声法对藤梨根中秦皮乙素进行提取,紫外分光光度法测定藤梨根中秦皮乙素的含量.结果:秦皮乙素线性回归方程为y=72.2804x+0.0283,R2=0.9994,平均回收率为99.36%,RSD=0.28%,藤梨根中的秦皮乙素含量为0.3604%.结论:该方法操作简单,方便快捷,可用于测定藤梨根中秦皮乙素的含量.

紫外分光光度法;藤梨根;秦皮乙素;含量测定

藤梨根又称阳桃根、猕猴梨，为猕猴桃科植物软枣猕猴桃(Actinidia argutaPlanch)或中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch)的根.藤梨根为大型落叶藤本，长5～9m.茎枝髓大，白色，片状.又名：藤梨、阳桃、木子、猕猴桃根[1，2].具有清热解毒、清热利湿、抗癌、祛风除湿、利尿止血消肿，用于消化不良、呕吐、风湿痹痛、消化道癌肿、痈疡疮疖及黄疸等功能.藤梨根中含有挥发油、三萜、黄酮、多糖类等化学成分，以及Fe、Zn、Cu、Se等微量元素[3].秦皮乙素存在于藤梨根中，具有平喘、祛痰作用[4]，对痢疾杆菌有抑制作用，可用于治疗急性菌痢、慢性气管炎等.本文采用紫外分光光度法对藤梨根中秦皮乙素的含量进行了研究.

1 实验仪器、材料与试剂

1.1 实验仪器

紫外可见分光光度计(上海精科752N)；KQ5200DB型数控超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)；电子分析天平(上海恒平科学仪器有限公司FA1064型)；恒温水浴锅(北京市永明医疗仪器厂DXKW-D-4).

1.2 实验材料

藤梨根购自吉林通化医药大厦，经通化师范学院于俊林教授鉴定为猕猴桃科软枣猕猴桃(Actinidia arguta )的干燥根；滤纸；秦皮乙素对照品(110741-200607)购自国家食品药品检定研究院，国家药品标准物质，供含量测定.

1.3 实验试剂

石油醚(60～90℃)；甲醇为分析纯.

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备

取藤梨根药材100g，粉碎成细粉，精密称取藤梨根药材粉末3g，放置于锥形瓶中，加入一定量的石油醚(60～90℃)，振摇，放置，超声波清洗器中脱脂20min后，放冷，弃去石油醚(60～90℃)[5]，药渣加入甲醇40mL，放置在超声波清洗器中超声提取45min，重复三次，合并甲醇溶液，过滤，再用少量甲醇洗涤锥形瓶及药渣数次，合并滤液，滤液浓缩，加甲醇定容于100mL容量瓶中，精密移取2mL于25mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混合均匀，作为供试品溶液以待测定.

2.2 对照品溶液的制备

精密称取秦皮乙素对照品(国家食品药品检定研究院)5mg,置于25mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，精密量取5mL转移至25mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，混合均匀，放置备用.

2.3 测定波长的选择

精密移取秦皮乙素对照品溶液5mL，置于100mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，混合均匀.以甲醇溶液为空白溶剂对照，在紫外分光光度计上，于353nm波长附近进行测定，结果表明，在353nm处有最大吸收波长.取配置好的供试品溶液3.0mL，以甲醇溶液为空白溶剂对照，在紫外分光光度计上，在353nm波长附近进行测定，结果表明，在353nm处有最大吸收波长，与对照品有相似的最大吸收，因此选择353nm为测定波长.

2.4 线性关系考察

精密移取配制完成的已知浓度为0.04mg·mL-1秦皮乙素对照品溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、6.00mL置于25mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混合均匀，得到浓度分别为0、0.0016、0.0032、0.0048、0.0064、0.0096mg·mL-1的对照品溶液，以备使用.以甲醇溶液为空白溶剂对照，于353nm处进行测定各溶液吸光度值,结果见表1.以浓度c为横坐标[6-8]，吸光度A为纵坐标，得到回归方程y = 72.2804x + 0.0283，R2= 0.9994，说明吸光度和浓度线性关系良好，如图1所示.

表1 秦皮乙素对照品测定结果

图1 秦皮乙素标准曲线图

2.5 精密度实验

精密称取上述藤梨根药材粉末3g，置于锥形瓶中，按照供试品溶液制备的方法进行制备，以甲醇溶液为空白溶剂对照，再于353nm处测定其吸光度值，重复测定6次[9]，观察吸光度值的一致性，得吸光度的RSD值为0.30%.结果表明，仪器精密度良好，测定结果见表2.

表2 精密度测定结果

2.6 稳定性实验

精密称取上述藤梨根药材粉末3g，置于锥形瓶中，按照供试品溶液制备的方法进行制备，于353nm处进行测定吸光度值，分别在0min、15min、30min、60min、90min、120min进行测定，测定6次[10]，观察其结果的一致性，吸光度的RSD值为0.19%，结果表明,供试品溶液在2小时内稳定性良好，测定结果见表3.

表3 稳定性测定结果

2.7 重复性实验

精密称取上述藤梨根药材粉末18g，按照供试品溶液制备方法制备成6份，每份3g.并用紫外分光光度计在353nm处测定吸光度，进行平行测定，并计算其含量，RSD为0.12%,表明重复性良好，结果见表4.

表4 重复性测定结果

2.8 加样回收实验

精密称取藤梨根药材粉末4份，每份3g，分成2组，每组2份，按照供试品溶液制备的方法进行制备.分别添加已知浓度为0.0008mg·mL-1的秦皮乙素对照品溶液3mL、4mL于25mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混合均匀后在353nm波长处测定吸光度，并计算其含量，计算其回收率，得知平均回收率为94.36%，RSD值为0.28%，测定结果见表5.

表5 加样回收测定结果

2.9 含量测定

精密称取藤梨根药材9g，称取3份，按供试品制备方法进行制备，测定其吸光度值，求其含量，结果见表6.

表6 含量测定结果

3 结果

采用紫外分光光度法测定藤梨根中秦皮乙素的含量，对照品和供试品在紫外353nm处有最大吸收，可选择在353nm处测定藤梨根中秦皮乙素的含量的最大吸收波长，可获得稳定的可靠的结果.经过线性关系分析，浓度在0.1～10mg·mL-1范围内线性关系良好(R2=0.9994)，重复性好，灵敏度高；供试品溶液在室温下放置2小时，稳定性良好；加样回收的回收率高，说明采用紫外分光光度法可以很好地测定藤梨根中秦皮乙素的含量，此方法方便快捷，操作简单.

[1]唐阳.藤梨根药用成分及作用机制的现代研究进展[J].现代中西结合杂志,2013,22(03):330-332.

[2]赫军,赵铁,王巍.藤梨根的化学成分研究[J].中国药学杂志,2014,49(03):184-186.

[3]王小平,白吉庆,成奉珍.不同来源藤梨根中总黄酮含量比较研究[J].时商洛学院学报,2007,21(02):51-53.

[4]梁承远,张诗韵,毛跟年,等.秦皮乙素及其衍生物的合成与药理学研究进展[J].陕西科技大学学报.2015,47(02):26-28.

[5]李英霞,刘春农,韦朋.千金子种仁与种皮中总香豆素的含量测定[J].陕西中医,2008,22(05):605-606.

[6]马逾英,钟世红,贾敏如,等.紫外分光光度法测定川白芷中总香豆素类成分的含量[J].华西药学杂志,2005,26(02):159-160.

[7]金锋,张振凌,任玉珍,等.紫外分光光度法测定巴豆中总生物碱的含量[J].中国现代中药,2013,47(01):22-24.

[8]杜永峰,周健,姚秉华.紫外分光光度法测定黄芩中黄芩苷的含量[J].化学分析计量,2008,75(05):43-45.

[9]张建辉,杨代明,吴廷瑞,等.HPLC法和紫外分光光度法测定葛根淀粉中葛根素含量的研究[J].食品与机械,2006,42(06):110-112.

(责任编辑:王海波)

Determination of Esculetine Tengligen by UV Spectrophotometry

TENG Kun,TAN BO,TENG Yun，ZHAO Xiao-fei

(TonghuaNormalUniversity，Tonghua,Jilin134002,China)

Objective: to determine the content of Aesculetin tengligen. Methods: tengligen Aesculetin was extracted by methanol by ultrasonic method, determination of content of Aesculetin tengligen by UV spectrophotometry. Results: esculetine linear regression equation is y = 72.2804x + 0.0283, R2= 0.9994. The average recovery rate was 99.36%, RSD=0.28%, tengligen esculetine was 0.3604%. Conclusion: this method is simple, fast and convenient, can be used for determination of the content of Aesculetin tengligen.

UV spectrophotometry; tengligen; Aesculetin; Determination of content

2016-07-12

吉林省教育厅项目“基于细胞药代动力学的藤梨根抗肿瘤黄酮类成分研究”(吉教科合字【2015】第439号)

滕坤，女，吉林辽源人，副教授.

R285.5

A

1008-7974(2016)05-0019-03

10.13877/j.cnki.cn22-1284.2016.10.006