2011—2015年规模化猪场伪狂犬病野毒感染血清流行病学调查

林文耀，曾容愚，李聪，栗娟，张婷婷，刘辉，秦云，于朋

（西班牙海博莱生物大药厂股份公司北京代表处，北京海淀100086）

2011—2015年规模化猪场伪狂犬病野毒感染血清流行病学调查

林文耀，曾容愚，李聪，栗娟，张婷婷，刘辉，秦云，于朋

（西班牙海博莱生物大药厂股份公司北京代表处，北京海淀100086）

2011年1月至2015年12月对中国21个省市1 537个规模化猪场不同猪群的伪狂犬病野毒感染血清流行病学进行了全面调查与系统分析。结果显示，伪狂犬病野毒抗体阳性猪场有984个，阳性猪场比例为64.0%；总血清样品中伪狂犬病野毒抗体平均阳性率为31.60%。不同阶段的猪群检测结果表明，种猪带毒率高是猪伪狂犬病持续存在的重要原因；生长肥育猪野毒抗体阳性率随猪只日龄的增长而上升，可能与猪场忽视仔猪伪狂犬病免疫有关；提示要重视肥育猪伪狂犬病的免疫预防。调查结果显示，猪伪狂犬病在规模化猪场仍普遍存在。

猪伪狂犬病；血清流行病学；野毒感染

自2011年以来，猪伪狂犬病（PR）大有卷土重来之势，主要表现为猪群gE抗体阳性率显著升高，发病妊娠母猪流产，产弱仔、死胎；新生仔猪死亡率高，同时出现角弓反张等神经症状，病死率在10%～50%。病毒的分离鉴定表明疫病由变异伪狂犬病病毒（PRV）毒株引起，并且新流行毒株处于独立的进化分支，这对PR的防控提出了严峻挑战[1-3]。为掌握现有防疫控制体系下我国猪场伪狂犬病感染的状况，进而有效控制和净化猪伪狂犬病，海博莱中国北京实验室持续多年对全国部分规模化猪场进行猪伪狂犬病的流行病学调查。笔者对2011年1月至2015年12月中国23个省市1 537个规模化猪场不同猪群的伪狂犬病野毒血清流行病学进行了全面调查与系统分析，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 采样方法样品采用横断面采样方法，分别采集公猪、后备猪、不同胎次生产母猪以及不同生长阶段商品猪群的血液，分离血清，送海博莱北京实验室检测。

1.1.2 血清样品血清样品采集时间为2011年1月至2015年12月，共97 050份，其中种猪群血清样品61 838份，不同周龄仔猪和生长育成猪样品35 212份。样品来自我国23个省市1 537个规模化猪场，包括种猪场和商品育成猪场，记录各猪场主要疫病免疫程序，方便对结果进行分析。

1.1.3 检测试剂猪伪狂犬病野毒抗体测定采用gE-ELISA鉴别诊断试剂盒（CIVTEST SUIS ADV gE）。

1.2 试验方法与结果判定

阻断酶联免疫吸附试验（ELISA）法，操作方法以及结果判定参照试剂盒说明书进行。检测的血清样品全部来自使用gE基因缺失疫苗免疫的猪场，所以检测到gE抗体阳性猪可以判断该猪场被伪狂犬病野毒感染。在进行猪场结果判定和统计时，只要猪场有1个样品为阳性，则该场判定为伪狂犬病野毒阳性场。

2 结果

2.1 2011—2015年规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体检测结果

2.1.1 2011—2015年不同地区规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体检测结果在2011—2015年所检测的1 537个规模化猪场中，984个猪场为伪狂犬病野毒阳性，猪场阳性率为64.0%；总血清样品数97 050份，30 660份为阳性，样品阳性率为31.6%（表1）。其中陕西、内蒙古阳性率高达100%，可能是由于送检猪场较少造成的。然而从检测猪场数较多的山东（259个猪场）和浙江（150个猪场）2个省来看，阳性猪场的比例也是居高不下：山东70.3%，浙江83.3%。总体而言，不同地区的猪场阳性率均居高不下，23个送检省市中，有18个省市猪场阳性率≥50%。但是，不同地区的阳性猪场样品阳性率却差异较大，23个送检省市中，只有4个省市样品阳性率≥50%。这种差异可能是不同地区对伪狂犬病的重视程度和生产管理水平不同造成的。

表1 2011—2015年不同地区规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体检测结果

按照地区统计，七大区域均有猪伪狂犬病野毒感染。北方的阳性率高于南方，其中华北猪场阳性率最高，达到75%（图1）。国内学者在北京、天津等地首先分离到伪狂犬病变异毒株，从而推测这场疫病可能首先在北方暴发，继而在全国传播流行[1-3]。从2011年开始，我们也发现北京的猪场阳性率明显高于其他地区，猪场阳性率高达80%。

图1 2011—2015年不同地区规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体阳性率

2.1.2 2011—2015年规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体阳性率由图2可知，样品阳性率和猪场阳性率从2011—2015年逐年上升，样品阳性率由13.6%上升至41.3%，猪场阳性率由41.7%上升至78.1%。结果表明，猪伪狂犬病的流行有持续上升的趋势，在未来一段时间仍是中国养猪业的重要传染病之一。

图2 2011—2015年规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体阳性率

2.2 2011—2015年伪狂犬病野毒阳性猪场种猪的阳性率

2.2.1 2011—2015年伪狂犬病野毒阳性猪场不同阶段种猪gE抗体阳性率由图3可知，生产母猪的阳性率高于公猪和后备母猪。其中1～2胎母猪gE抗体阳性率最高为52.2%。

图3 2011—2015年伪狂犬病野毒阳性猪场不同阶段种猪gE抗体阳性率

2.2.2 2011—2015年伪狂犬病野毒阳性猪场种猪gE抗体阳性率由图4可知，种猪阳性率从2011—2015年逐年上升，由33.5%上升至58.0%，其中2013年增长幅度最大，比2012年上升8.5个百分点。种猪伪狂犬病野毒感染持续上升的趋势对猪伪狂犬病的防控和净化提出了严峻的挑战。

图4 2011—2015年伪狂犬病野毒阳性猪场种猪gE抗体阳性率

2.3 2011—2015年伪狂犬病野毒阳性猪场不同生长阶段肥育猪gE抗体阳性率

由图5可知，肥育猪从16周开始gE抗体阳性率上升，从16周的32.5%上升至24周的52.6%，显然由伪狂犬病野毒感染所致，这与阳性场肥育猪后期出现呼吸道疾病、日增重不理想等现象一致。10周和13周的gE抗体可能是母源抗体[4]。

图5 2011—2015年伪狂犬病野毒阳性猪场不同生长阶段肥育猪gE抗体阳性率

3 分析与讨论

3.1 猪伪狂犬病仍是我国养猪业的主要传染病

本次调查持续时间较长，时间跨度5年。调查样品来自我国23个省市1 537个规模化猪场，共97 050份，是目前国内调查范围较广的规模化猪场伪狂犬病野毒感染血清流行病学调查。结果表明，2011—2015年猪伪狂犬病的流行有持续上升的趋势，样品阳性率由13.6%上升至41.3%，猪场阳性率由41.7%上升至78.1%。七大区域均存在伪狂犬病野毒的感染，北方地区的伪狂犬病野毒阳性率高于南方地区。其中华北猪场阳性率高达75%，西南最低为29.6%，可能是由于病毒在气温较低的北方更易存活。调查还发现，南方较北方更重视对仔猪的免疫预防。

国内相关学者也对伪狂犬病野毒血清流行病学做了相关的调查。胡睿铭等对9个省市2011—2013年的692份血清样品进行gE抗体检测，结果显示，血清样品阳性率为67.05%（464/692）[5]。邹敏等对2012—2013年来自18个省市的393个送检猪场共14 801份血清样品进行检测，结果显示，猪场阳性率为44.02%（173/393），样品阳性率为16.13%（2 388/14 801），并且发现阳性率有上升的趋势[6]。解伟涛在2014年第一季度的检测结果表明，血清样品gE抗体阳性率为37.9%（1 244/3 281），比2013年上升6.6%；猪场阳性率为89.9%（124/138），比2013年上升6.3%[7]。

不同的调查研究产生了不尽相同的结果，可能与采样地区、采样阶段、采样数量不同有关，但是猪伪狂犬病有持续上升趋势的结论是一致的，提示猪伪狂犬病在未来的一段时间仍是中国养猪业的主要传染病之一，猪伪狂犬病的预防和净化形势不容乐观。

3.2 种猪感染率持续上升是伪狂犬病持续流行的重要原因

由图2和图4可知，猪场阳性率和种猪阳性率都呈现出逐年上升的趋势，种猪的阳性率与猪场的阳性率呈现正相关的关系。2012—2013年种猪阳性率由40.6%上升到49.1%，与此同时，猪场阳性率由44.3%上升到62.3%。分析各胎次生产母猪的阳性率，1～2胎的阳性率最高达到52.2%，明显高于其他胎次，提示补充的后备母猪有可能为阳性猪，应该引起猪场足够的重视，防止后备母猪的更新被伪狂犬病野毒感染，导致种猪的带毒率居高不下。

预防种猪感染伪狂犬病野毒是伪狂犬病防控和净化的关键问题。首先，要保证更新的公猪和后备母猪伪狂犬病野毒阴性，引种前进行gE抗体检测，确保引进的种猪为阴性猪。做好隔离等生物安全措施，稳定后首先免疫伪狂犬病gE基因缺失疫苗，转生产前免疫2次。为了提高中和抗体水平和抗感染能力，可免疫高效的伪狂犬病灭活疫苗，如海博莱高效灭活菌AUSKIPRA BK。伪狂犬病灭活苗可有效提高中和抗体滴度，降低抗体离散度。然后通过gE抗体筛查，淘汰阳性生产公猪，以保证生产公猪全部为阴性。因为伪狂犬病病毒可以通过精液传播[8]。其次，加强种猪的免疫强度，年普免4次，可以有效减少种猪的带毒和排毒时间。最后，生物安全仍是很重要的防线。从图3得知，生产母猪的阳性率都高于50%，为了降低生产公猪的感染风险，必须禁止查情公猪返回公猪站，防止查情公猪成为伪狂犬病野毒传播的媒介。

3.3 需要加强生长肥育猪的伪狂犬病疫苗免疫

由图5可知，肥育猪gE抗体阳性率从16周开始上升。一般来讲，gE母源抗体维持时间在120天左右[4]。如没有野毒的感染，随着母源抗体的消退，16周开始gE抗体阳性率应该出现下降。此次调查gE抗体阳性率在16周后不降反升，说明在13～16周这个阶段有伪狂犬病野毒的感染，同现实生产相吻合。现实生产中很多猪场只重视母猪的免疫，往往忽视仔猪的免疫。有的猪场只免疫母猪，不免疫仔猪。有的猪场母猪免疫进口疫苗，仔猪免疫国产疫苗，对仔猪伪狂犬病疫苗的选择也比较随意。有的猪场仔猪只在出生滴鼻免疫1次。随着母源抗体的消退，肥育猪后期缺乏保护力，感染伪狂犬病野毒，在生产上往往出现呼吸道疾病，继发细菌感染，如传染性胸膜肺炎等，抗生素治疗效果不明显。此外，感染的肥育猪进入后备猪群，形成循环感染，这也是部分猪场伪狂犬病持续存在难以净化的重要原因。据我们的经验，在伪狂犬病防控压力较大现状下，仔猪滴鼻1次和2次肌注伪狂犬病疫苗，可以有效维持阳性场的生产稳定，减少仔猪的感染机会，阳性场获得阴性仔猪也是有可能的。

3.4 猪伪狂犬病的防控

本次的调查结果表明，猪伪狂犬病的流行有持续上升的趋势，在未来一段时间仍是中国养猪业的重要传染病之一。在这种流行趋势下，选用优质高效的伪狂犬病gE基因缺失活疫苗结合灭活疫苗的使用，采用科学的免疫程序是预防和控制猪伪狂犬病的主要手段。Zeng等和王继春等用猪伪狂犬病活疫苗“喜可净”（Bartha K61株）对仔猪免疫1次，1周后用猪伪狂犬病病毒变异株（AH02LA株）进行攻毒，结果显示可以抵御伪狂犬病病毒变异株攻击[9-11]。刘芳等使用gE基因缺失活疫苗紧急免疫，并对初生仔猪进行滴鼻和肌注免疫后有效地控制了PR疫情，说明现有疫苗对新流行毒株依然有较好效果[12]。这些研究结果表明Bathar-K61疫苗目前还是控制伪狂犬病的最好手段之一，能够对抗伪狂犬病病毒（PRV）新流行株的攻击，为猪提供完全保护。

[1]An T,Peng J,Tian N Z,et al.Pseudorabies virus variant in Bartha-K61-vaccinated pigs,China,2012[J].Emerging Infectious Disease,2013,19(11):1749-1755.

[2]Yu Xiuling,Zhou Zhi,Hu Dongmei,et al.Pathogenic Pseudorabies Virus,China,2012[J].Emerging Infectious Disease Journal,2014, 20(1):102-104.

[3]Wu R,Bai C,Sun J,et al.Emergence of virulent pseudorabies virus infection in northern China[J].J Vet Sci,2013,14(3):363-365.

[4]van Oirschot J T,Rziha H J,Moonen P J,et al.Differentiation of serum antibodies from pigs vaccinated or infected with Aujeszky's disease virus by a competitive enzyme immunoassay[J]. J Gen Virol,1986,67:1179-1182.

[5]胡睿铭，汤细彪，刘峰，等.2011—2013猪伪狂犬病在我国部分地区的流行病学调查与分析[C].全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会，2013.

[6]邹敏，杨旭兵，郑辉，等.2012-2013年我国部分地区猪伪狂犬病流行病学调查[J].中国动物检疫，2015（4）：1-5.

[7]解伟涛，郝慧芳，梁跃，等.2014年第1季度猪伪狂犬病流行病学调查及防控建议[J].今日养猪业，2014（6）：33-34.

[8]Medyeczky I,SzabI.Isolation of Aujeszky disease virus from boar semen[J].Acta Vet Acad Sci Hung,1981,29:29-35.

[9]Zeng R,Wang J,Torrents D,et al.AUSKIPRA-GN Confers to piglets a complete protection against a lethal infection with a pseudorabies virus variant in China;Proceedings of the 4th Leman China Swine Conference,2015[C].Proceedings of the 4th Leman Chian swine Conference.The University ofMinnesota, 2015:217.

[10]Zeng R,Wang J,Torrents D,et al.PRV vaccine AUSKIPRA-GN (A3 solvent;Bartha k61 strain)provide quick and strong protection against Chinese PRV variant[C].Proceedings of the 7th Asian pig veterinary society Conference,Manila,2015:79.

[11]王继春，曾容愚，Daniel Torrents，等.猪伪狂犬病活疫苗（Bartha K61株）对变异株的保护效力[J].畜牧与兽医，2015（12）：1-4.

[12]刘芳，薛辉，秦树英，等.广西猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及gE基因序列分析[J].养猪，2014（5）:105-108.

（编辑：富春妮）

S858.282.65+9.1

A

1002-1957(2016)02-0113-04

2016-02-02

林文耀（1985-），男，广东吴川人，执业兽医师，硕士，主要从事规模化猪场生产管理及猪病防控工作. E-mail:lin.wenyao@hipra.com