猪圆环病毒2型抗体水平及其野毒感染的检测与分析

孙华伟，张敬峰，赵永前，茅爱华，张晓曦

（江苏省农业科学院兽医研究所，农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心，江苏南京210014）

猪圆环病毒2型抗体水平及其野毒感染的检测与分析

孙华伟，张敬峰，赵永前，茅爱华，张晓曦

（江苏省农业科学院兽医研究所，农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心，江苏南京210014）

为研究和探索同一头猪圆环病毒野毒（PCV2）感染与其PCV2抗体水平之间的关系，对江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊2015年第3季度接诊的43头活猪分别采用PCR方法和ELISA方法进行PCV2病原和PCV2抗体的检测。结果显示：43头接诊活猪的PCV2病原阳性率为65.1%（28/43），PCV2抗体阳性率为100%，89.3%（25/28）的PCV2病原阳性猪的PCV2抗体S/P值≥1.6，83.3%（25/30）的PCV2抗体S/P值≥1.6的猪为PCV2病原阳性，76.9%（10/ 13）的PCV2抗体S/P值＜1.6的猪为PCV2病原阴性。检测结果表明：当检测猪只的PCV2抗体S/P值≥1.6时，存在PCV2野毒感染的可能性较大。此结果为江苏省PCV2的有效防控提供了数据参考，具有临床应用价值。

猪圆环病毒2型；抗体；PCR；检出率；分析

猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）引起的猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）是危害当今全球养猪生产最主要的免疫抑制性疾病。目前PCV2在各地猪场内感染十分普遍，其感染率可高达96%以上[1]。通过检测和分析同一头猪的PCV2抗体水平与PCV2病原检出率之间的相关性，比分析群体中不同猪只的PCV2抗体水平与PCV2病原检出率之间的相关性更有说服力。由于在猪场临床实际生产中，对猪只进行活体采样检测病原比较困难，遂对江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊2015年第3季度接诊的43头活猪在剖杀前进行前腔静脉采血检测PCV2抗体，并在剖杀后采集相关组织样品检测PCV2病原，以期分析和研究同一头猪的PCV2抗体水平与PCV2病原检出率之间的关系。具体报告如下。

1 材料与方法

1.1 检测时间与检测地点

PCV2抗体检测和PCV2病原检测于2015年9月在江苏省农业科学院兽医研究所动物疫病诊断检测中心实验室进行。

1.2 主要试剂及仪器

PCV2抗体检测试剂盒（PCV2 Ab）购自韩国JBT公司；基因组提取试剂盒等购自上海Sangon公司；酶标仪型号为宝特ExL800，美国宝特公司生产；冷冻离心机型号为Centrifuge5424R，产自德国；各种规格移液器，购自德国Eppendorf公司；恒温箱水浴锅等。

1.3 方法

严格按照JBT公司的试剂盒说明书要求进行相关操作。结果判定：样品抗体S/P值≥0.4，判为PCV2抗体阳性，样品抗体S/P值＜0.3，判为PCV2抗体阴性，介于两者之间为可疑。应用PCR检测试剂盒对病料样品进行DNA的抽提、扩增并经琼脂糖电泳，检测PCV2核酸。

2 结果与分析

2.1 PCV2抗体检测结果

由表1可知，江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊2015年第3季度接诊的43头活猪的PCV2抗体阳性率为100%；抗体S/P平均值为1.62，且主要集中在1.6～2.2，占检测总数的62.8%（27/43）；69.8%（30/43）的临床门诊接诊猪只PCV2的抗体S/P值≥1.6，远远超过抗体阳性的临界值；即检测猪只的PCV2抗体阳性率和抗体平均值均处于较高水平。

表1 PCV2抗体检测结果

2.2 PCV2病原检测结果

由表2可知，江苏省农业科学院动物疫病诊断检测中心临床门诊2015年第3季度接诊的43头活猪的PCV2病原阳性率为65.1%（28/43），即超过一半的临床门诊接诊猪只存在PCV2的感染。

表2 PCV2病原检测结果

2.3 同一头猪的PCV2抗体水平与PCV2病原检测结果

由表3和图1可知，当检测猪只的PCV2抗体S/P值≥1.6时，该猪为PCV2病原阳性率高达83.3%，而当测猪只的PCV2抗体S/P值＜1.6时，该猪只存在PCV2感染的可能性仅为23.1%，二者差异极显著（P＜0.01），即二者存在较强的相关性。由于本次检测的临床接诊猪均为PCV2抗体阳性，未能对PCV2抗体阴性猪进行PCV2病原的检测和分析。同时，由于本次检测的猪只均为发病猪，检测结果可能与猪场大群采样猪只的检测结果存在一定的差异，但能从一个侧面说明，猪群中PCV2抗体S/P值≥1.6的猪只所占比例越大，猪群存在PCV2野毒感染的可能性就越大，具有临床应用价值。

图1 同一头猪的PCV2抗体水平与PCV2病原检测结果

3 讨论

首先，多数研究人员对于PCV2进行的流行病学调查和研究大多是对不同猪只进行PCV2抗体和PCV2病原的检测，对同一头猪同时进行PCV2抗体和PCV2病原检测的报道很少，而对同一头猪进行上述两项检测，更有临床实际应用价值。

其次，不同厂家的PCV2抗体ELISA检测试剂盒会出现不同的结果，因此根据检测猪只的PCV2抗体水平进行分析时，需注意所使用的PCV2抗体检测试剂盒。

最后，在本次的检测中发现部分散养户对PCV2的疫苗免疫不够重视，认为PCV2疫苗免与不免无所谓，其实这种想法是非常错误的。PCV2的长期存在会导致宿主体液免疫反应能力降低，从而造成猪体免疫功能受到抑制或紊乱[2]。司兴奎等通过建立PCV2人工感染模型证实了PCV2感染可在一定程度上抑制猪瘟疫苗特异性的抗体产生，可以导致免疫猪的特异性抗体水平低下，血清抗体转阳性率下降[3]。相关研究还证实了PCV2感染对伪狂犬病疫苗的体液免疫应答也有一定程度的抑制作用[4]。PCV2感染是严重影响猪瘟、伪狂犬病等疫苗免疫效果或免疫不确实的重要原因之一[5]。因此，对于PCV2阳性猪场及时进行PCV2疫苗的免疫是必要的[6]。

[1]甘孟侯，杨汉春.中国猪病学[M].北京：中国农业出版社，2005：440-460.

[2]Darwich L,Segals J,DomingoM,et a1.Changes in CD4+,CD8+, CD4-,CD8-and immunoglobulin M-positive peripheral blood mononuclear cells of post-weaning multisystemic wasting syndrome affected pigs and age-matched uninfected wasted and healthy pigs correlate with lesions and porcine circovirus type2 load in lymphoid tissues[J].Clin Diagn Lab Immunol,2002,9(2)：236-242.

[3]司兴奎，郭鑫，杨汉春.猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗体液免疫应答的影响[J].中国兽医学报，2009，29（7）：826-829.

[4]司兴奎，张济培，陈建红，等.猪圆环病毒2型感染对伪狂犬疫苗免疫应答的影响[J].中国预防兽医学报，2010，32（1）：61-64.

[5]管亮，华耀，施雷，等.种猪群猪圆环病毒病的净化技术研究[J].动物医学进展，2015，36（7）：57-62.

[6]孙华伟，张敬峰，赵永前，等.一起断奶仔猪副伤寒与圆环病毒病混合感染的成功诊治[J].养猪，2015（2）：119-120.

（编辑：郭玉翠）

每天晒5分钟太阳

防晒是很多人尤其是女性的每日必备“工作日程”。不过紫外线也不是毫无益处，皮肤合成维生素D就需要紫外线帮助。而维生素D促进钙质吸收，能影响到骨骼强度，这点对中老年人尤其重要。

日本国立环境研究所和东京家政大学的联合研究小组做过一项研究，结果显示，即使是阳光最弱时，也仅需晒上不到5分钟的太阳即可满足人体维生素D合成的需要。研究结果还显示，要达到造成晒伤甚至诱发皮肤癌风险程度，晒太阳的时长远比满足人体合成维生素D数量所需时长多出4～6倍。所以，夏季外出做好防晒工作很重要。但就是皮肤暴露在阳光下晒个十来分钟，也不大会对人体健康造成实质性伤害，反而有利于人体合成所需维生素D。

（转自良友周报[N]，2015-08-11）

S858.285.3

A

1002-1957(2016)01-0124-02

2015-12-16

江苏省农业科技自主创新资金[编号：CX（14）4049]

孙华伟（1981-），男，江苏南京人，助理研究员，执业兽医师，硕士，主要从事猪病的临床诊断及重大疾病流行规律、诊断、监测和控制技术研究.E-mail：sunhuawei66@163.com