动物寄生虫病实验室常规诊断方法及防控措施

2016-12-17靳芹

北方牧业 2016年7期

动物寄生虫病的确诊是在流行病学资料调查研究的基础上，通过实验室检查，查出虫卵、幼虫或成虫。对于基层兽医实验室，最常用的寄生虫检测方法是粪便检查和血液检查。本文主要介绍寄生虫病的这两种诊断方法及其防控措施。

1 寄生虫病的粪便检测方法

粪便检查是寄生虫诊断中最简便直观的诊断方法。适合于以下虫体：寄生于消化道、肝脏、胰脏的蠕虫；寄生于牛羊肺气管、支气管的大、小型肺线虫，猪后圆线虫；寄生于肠系膜静脉的血吸虫，消化道的球虫、肠小代虫等。主要是借助显微镜观察其寄生虫卵、幼虫、卵囊、包囊或滋养体的形态特征。

1.1 粪便的初检

镜检之前，必须观察粪便的颜色、稠度、气味、黏液多少，有无血液、饲料消化程度等。有些寄生于动物消化道的绦虫会不断随宿主粪便排出呈断续面条状的孕卵节片，还有其他一些消化道寄生虫有时也可随粪便排出体外，可直接挑出虫体，进行判断。

1.2 直接涂片法

于载玻片上滴数滴甘油（1︰1），用镊子从不同部位取黄豆大小的一块粪便与之混匀，剔除粗粪渣，加上盖玻片（不要产生气泡）镜检虫卵。此法最为简单，但检出率不高。若做一下改良可提高检出率，取2～3克被检粪便，加2～3倍煮沸过的凉水，用干净的玻璃棒进行旋转搅拌，在旋转搅拌的中心迅速提出小棒，用其棒尖的液滴涂片进行镜检。

1.3 集卵法

利用各种方法，将分散在粪便中的虫卵集中起来，再行检查，以提高检出率。有漂浮法和沉淀法，前者适于线虫卵、绦虫卵和球虫卵，后者主要用于吸虫病和棘头虫病的诊断。

1.3.1 饱和盐水漂浮法

用比重大的溶液稀释粪便，使比重小的虫卵浮集于溶液的表面，检查时就很容易发现虫卵。取被检粪样2～5克于300毫升烧杯中，先加入饱和盐水约10毫升，用小玻璃棒将粪捣成糊状，然后按10～20倍的量加饱和盐水，并进行充分搅拌，过滤后，静置0.5小时左右，用直径0.5～1.0厘米的金属圈蘸取表面液膜，抖落于载玻片上，加盖玻片后镜检。（注：若检查比重较大的虫卵，如棘头虫虫卵、猪肺丝虫虫卵及吸虫卵时，需用硫酸镁、硫代硫酸钠以及硫酸锌等饱和溶液。）

1.3.2 水洗沉淀法

主要有自然沉淀法和离心沉淀法。自然沉淀法，从不同部位取5～10克被检粪便置于烧杯中，加10～20倍水充分搅合，用两层纱布虑入另一烧杯中，静置20分钟，弃上清，反复操作至上层液体透明为止。弃上清液，用吸管吸取沉淀物涂片镜检。离心沉淀法是取上法过滤所得的粪液置离心管中，以2500～3000转/分钟离心1.5分钟,取出后倾去上层液，再加水搅合，离心沉淀，反复操作，至上层透明，弃去上清，取其沉淀物涂片镜检。离心法取代自然法可大大缩短沉淀时间。

1.4 虫卵计数法

利用虫卵计数法测定家畜每克粪便的虫卵数，从而可推断动物寄生虫的感染程度和防治效果。但这只是定性的测定，没有定量结果，检测不出虫卵的具体数量和虫体类型，不推荐实验室做具体检测用。

2 寄生虫病的血液检测方法

寄生于血液中的寄生虫的检查一般需要采血检查寄生于血浆中或血细胞中的虫体。血液中寄生的常见寄生虫主要有：锥虫、巴贝斯虫、泰勒虫、住白细胞原虫和心丝虫等。

2.1 鲜血压片法

若血液中幼虫量较多，可直接滴一滴血于载玻片上，盖上盖玻片，在低倍镜下检查，可见微丝蚴在其中活动。

2.2 血液涂片与染色

一般病畜高温时取耳静脉血涂片，用载玻片接触最先流出的一滴血，制成血液涂片，后用姬姆萨液染色后镜检。例如：染色后，伊氏锥虫的胞浆呈淡天蓝色，细胞核和鞭毛呈淡红紫色。梨形虫检测，血液滴于载玻片后，推平，干燥后，将少量甲醇滴于血膜上待干燥后，姬姆萨染色，油镜检查，有梨形、圆形、卵圆形等不规则形态。

2.3 虫体浓集法

当血液中虫体较少不易查出时，常先进行集虫，再涂片检查。采病畜抗凝血6～7毫升，以500转/分钟的速度，离心5分钟，使其中大部分红细胞沉降；而后，将含有少量红细胞、白细胞和虫体的上层血浆移入另一离心管中，补加一些生理盐水，以2500转/分钟的速度离心10分钟。取沉淀物制成抹片，按上述染色方法检查。此法适用于伊氏锥虫病和梨形虫病的检查。