水质环境监测的微生物质控措施研究

2016-12-12南水北调中线建管局渠首分局河南省南阳市473000

低碳世界 2016年32期

井菲（南水北调中线建管局渠首分局，河南省南阳市473000）

水质环境监测的微生物质控措施研究

井菲（南水北调中线建管局渠首分局，河南省南阳市473000）

随着人们环保与安全意识的增强，水质监测中微生物样品的检测与管理越来越受到广泛关注。近些年来，供水安全问题逐渐增多，对人们的生命健康造成了严重威胁。我们要对水质安全有足够重视，加强水质微生物样品实验室监测，规范实验室微生物监测程序，提高水质环境监测质量，确保供水安全。本文主要从水质微生物样品采集、水质微生物样品监测、实验室控制以及样品监测后的处理等方面对水质环境监测微生物质控方法进行了分析，希望对相关研究领域提供借鉴经验。

水质；环境监测；微生物

水质在监测的过程中，在实验室内微生物的检测常常会出现一些问题，比如：在分析微生物检测标准、已经知道的加入量以及参比的样品等等，有些实验室不具备这些条件，或者不知道，所以，个人的判断是必要。切实有效的质量保证程序一定可以控制好从采样一直到报告数据的整个过程，尽量避免检验结果受到影响。一般来说，可以影响到检测结果的因素主要有：采样技术；实验设备和器材；工作人员的业务水平；材料的质量；培养基；分析测试的步骤等等。

1 水质微生物样品采集

在采集微生物样品之前，需要准备采样玻璃瓶。为了保证容器无菌性，需要对玻璃进行180℃的高温杀菌消毒处理，时间保持在2h左右。在样品采集时，要选取具有代表性的样品。通常情况下，在同一水源处，如果同时需要采集几类检测指标的水样时，首先应该采集可供微生物学指标检测的水样。

1.1 水质微生物样品监测

一般来说，水质量检测微生物的实验室一定要先准备齐全采集微生物样品无菌的采样玻璃瓶，随着时间与空间的变化，许多水体会发生很大的变化，因此，一定早制定出科学合理的水质微生物采样的规划。为了保证所采集水样具有代表性，采样的时候必须固定取水的地点，同一个时间段；所采集的水样一般为瓶容量的80%左右，在检验的时候一定要混匀充分；采集样品时一定要直接采集，已经灭菌采样瓶不能用样水冲刷，避免手指与其他物品对采样瓶口造成玷污；在采样的时候严禁搅动水样底部的沉积物。在采集水管里的水样之前，一定要对水龙头消毒，其消毒的方法为：在龙头的表面用火焰烧灼大约3～5s，然后再放水5～10min。农村的生活用水样的采集为蓄水池，要准备一个干净水桶，将水桶放入到储水池里面几分钟，尽量不要采取表面水，然后把样水灌到无菌瓶里面，要注意的是手一定不要接触到无菌的瓶口与瓶塞。

当取完微生物水样后，相关人员需要把水样送到质检实验室，采样员需要把与水样有关的信息汇报给实验室工作人员，接样员需要编辑水样编号。在对水质微生物检测之前，需要对无菌实验室进行消毒处理，通常采用紫外线消毒方法。

1.2 水样的保存达到减缓微生物繁殖的作用

采用低温冷藏箱来保存水样，水样全部采集后立即送回实验室；在运输中，玻璃容器要防止破裂，须有固定措施，防止样品容器倾倒和样品溢出。检测人员要对培养基配置和验证情况进行记录，同时也要记录标准菌株培养、储存和繁殖等情况，表1为培养基与标准菌株的指标内容。

表1 标准菌株观察指标

在水质微生物样品检测过程中，检测人员需要根据水质检测标准来进行检测，每当样品检测完之后，需要与培养基空白进行对照，并要随机抽取样品，再做平行样品检测，以此来保证检测结果准确性。为了保证水样菌落总数的检测质量，首先要充分摇匀水样，使细菌在水体中均匀分布；在稀释水样时，要沿着管壁谨慎加入，不要触碰到管内部的稀释液，防止水样被污染；把水样注入器皿时，要从器皿的侧面加入，不能把器皿盖揭开，最后要把吸管直立放置，使其内部水流空，并且要在器皿底部的干燥处插入吸管尖部，使其剩余液体全部排出。为了避免出现片状菌落，当把水样加入到器皿中后，在加分钟内，可以向其中倒入一定量的琼脂培养基，并要立即搅匀，使其完全混合。当培养基凝固以后，要在几分钟之内，翻转器皿，防止菌落蔓延。

2 实验室检测系统的质量控制

2.1 实验室环境控制

实验室环境主要有无菌间、冰箱、生物安全箱等设施的卫生整洁度和安放位置，这些因素能够对监测质量造成影响。因而在实验室的管理中，需要对实验设施进行维护，使其处于良好状态，并要定期对实验仪器进行清理维护，校准质控。对于无菌实验室，则要对平皿、仪器等实验设备进行密封处理，在使用刻度吸管时，需要在管口处放置棉塞，防止洗耳球清洁度不够，而影响实验结果。另外，由于微生物实验操作性和主观性较强，因而微生物实验操作，对实验检测人员提出了较高要求。检测人员需要不断学习，掌握专业检测技能，熟练操作，提高检验水平和处理实验结果异常等情况的能力。实验室要统一检验方法，并要制定相关的规章制度，明确规定各级管理人员的职责与权限，加强对水质监测工作的监管力度，确保实验检测结果精确度。

2.2 实验室设备控制

当完成水质微生物样品检测与培养，而且检测结果确认后，检测实验室就可以清洗培养器皿，可以对检测后的微生物水质样品进行处理，清洗采样玻璃瓶，要对实验过程中使用的器皿、吸管等实验器具进行高温消毒处理。并且要对使用过的实验室进行消毒，在消毒液中加入75%的酒精、5%的甲酚溶液及0.1%的新洁尔灭溶液，使用此混合溶液对实验室进行熏蒸消毒杀菌处理，从而为下次实验做好准备。

3 水质微生物样品监测后控制

3.1 检测菌落总数的质量控制

在接种前应将水样充分摇匀，使得水中微生物均匀的分布在水中，水样在稀释的时候一定要沿着管壁加入，千万不要接触到管里面的稀释液，用来预防吸管尖外侧的部分粘附的检测液混入到里面，把水样注入到器皿内的时候，要从器皿的一侧加入水样，一定不能揭来器皿盖，把吸管直立起来使水流空，在器皿底部干燥的地方再擦拭一下吸管并且把剩余的液体排出，千万不要吹出来。为了预防片状的菌落，把水样加入到器皿中后20min内朝器皿里面倒入营养琼脂的培养基，要马上混合均匀，等到器皿里面的琼脂凝固之后几分钟内进行翻转培养，这样可以避免菌落生长。

3.2 检测水样大肠菌群质量的控制

在接种之后，摇动试管使水样和乳糖发酵混匀，在乳糖发酵的试验中常常伴有少量的气体，或者产酸不产气，有时候倒管里面虽然没有气体，但是，在液体表面与管壁可以看到慢慢上浮的小气泡，在这个时候千万不要放弃，继续往下做下一步证实的实验。若开始发酵为阳性的话，还需要进行革兰染色以及继续接种培养观察。挑选出菌落数，并且与大肠菌群检出率有着密切的关系，要挑取出典型的菌落，一般多挑选几个预防假性阴性。