CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数在重症肺炎患者中表达的意义

向 娟，吴佳妮，唐 兵

（成都市第六人民医院重症医学科，四川成都610051）

CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数在重症肺炎患者中表达的意义

向 娟，吴佳妮，唐 兵

（成都市第六人民医院重症医学科，四川成都610051）

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数在重症肺炎患者中表达的意义。方法 收集2013年5月至2015年10月我院诊断为肺炎的患者，共计80例，进一步分为重症肺炎组28例和肺炎组52例。对照组为同期健康体检者，共50例。对比重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平，并且分析重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平。结果 ①重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞水平、MPV及PLT结果比较有差异（P＜0.05）；重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时PDW、PCT结果比较无差异（P＞0.05）。②重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时CD4+CD25+调节性T细胞水平、MPV及PLT结果比较有差异（P＜0.05）；重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时PDW、PCT结果比较无差异（P＞0.05）。结论 CD4+CD25+调节性T细胞、MPV及PLT可作为反应肺炎严重程度的敏感指标，并且可作为评价重症肺炎患者预后的客观指标。

CD4+CD25+调节性T细胞； 血小板参数； 重症肺炎

肺炎是指终末气道、肺泡及肺间质的炎症，可由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物所致。美国疾病预防控制中心在2013年的一份报告中提示肺炎住院患者的病死率平均为12%，入住重症监护室者约40%［1］。而且随着人口老龄化、吸烟、环境的变化，该比例仍居高不下。引起肺炎患者死亡的主要因素与免疫功能低下有关，此外大气污染、生物因子也是诱因。临床各科都可能会遇到重症肺炎患者，如何评价患者的免疫功能，进行早期诊断及治疗是本研究的问题。血小板参数主要包括平均血小板体积（MPV）、血小板压积（PCT）、血小板分布宽度（PDW）、血小板计数（PLT）等指标，有学者对比了轻、重症肺炎的血小板参数后发现，重症肺炎的MPV、PCT、PDW、PLT升高更为显著，可能与内毒素诱发的骨髓代偿性增生活力有关［2］。CD4+CD25+调节性T细胞不同于以往的细胞亚群等，即总体上，他们主要执行免疫负调控功能，很多实验结果显示CD4+CD25+调节性T细胞表达的下降有利于感染细胞的清除。还有研究发现50岁以上健康老年人组外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例高于健康成人组，可能与免疫衰老的发生有关［3］。因此本次研究拟收集2013年5月至2015年10月我院诊断为重症肺炎的患者，探讨 CD4+CD25+调节性 T细胞及血小板参数在重症肺炎患者中表达的意义。

材料和方法

1 病例选择

收集2013年5月至2015年10月我院诊断为肺炎的患者，共计80例，进一步分为：28例重症肺炎组和52例肺炎组。对照组为同期健康体检者，共50例。重症肺炎组平均年龄48.5±12.4岁，男性18例，女性10例；肺炎组平均年龄49.7±11.5岁，男性29例，女性23例；对照组平均年龄50.4±15.4岁，男性28例，女性22例，3组人员性别，年龄无差异。

2 入选标准

①重症肺炎参考美国胸科协会及美国感染协会2007年制定的指南［2］；肺炎符合第8版《实用内科学》制定的标准［2］。②自愿参加试验。③无免疫抑制剂或激素使用史。

3 排除标准

①入院前服用过抗生素。②有其他系统感染性。③免疫功能低下、患有恶性肿瘤。④肺血栓栓塞、肺结核者。

4 检测方法

血样抽取后立刻派专人送检进行检查。

4.1 CD4+CD25+调节性T细胞测定 ①抽取肘部静脉血，EDTA抗凝，每个标本分为2管，分别标记为染色管和对照管。染色管加入CD4-PE和CD25-FITC各10μL，另一管加入 CD4-PE和Ig G1-FITC各10μL。②加溶血剂500μL，避光10min，加入PBS液500μL离心后，放入水浴箱静置10min，放入流式细胞仪中。计算软件为CXP-cytometer。

4.2 血小板参数检测 使用全自动血细胞分析仪进行检测：MPV、PCT、PDW、PLT。

5 评价方法

①对比重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平。②分析重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平。

6 统计学处理

结 果

1 重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平

重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞水平、MPV及PLT结果比较有差异（P＜0.05）；重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时PDW、PCT结果比较无差异（P＞0.05），见表1。

表1 重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平

2 重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平

重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时CD4+CD25+调节性T细胞水平、MPV及PLT结果比较有差异（P＜0.05）；重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时PDW、PCT结果比较无差异（P＞0.05），见表2。

表2 重症肺炎组死亡患者与存活患者入院时CD4+CD25+调节性T细胞及血小板参数水平对比

讨 论

1 CD4+CD25+调节性细胞的来源及功能

调节性细胞包括CD4+CD25+细胞、Tr1和Th3等多种亚型，目前研究最为广泛的为 CD4+CD25+调节细胞［3］。CD4+CD25+调节细胞分为自然型和诱导型，前者主要在胸腺内发育，后者是在周围受各种抗原反复刺激诱导下产生［4］。人类外周循环中CD4+CD25+调节细胞在维持机体免疫内环境的起着重要作用，主要表现在免疫抑制和免疫无能性两大功能特征。前者表现在调节性T细胞能够抑制CD4+和CD8+细胞的活化和增殖，后者表现在各种刺激原均能刺激CD4+CD25+调节细胞的增生［5］。本研究我们发现重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞水平结果比较有差异（P＜0.05）。我们分析重症肺炎患者入院时CD4+CD25+调节性细胞数目增多与免疫功能受损、功能下降有关。还有学者对重症肺炎患者进行自身对照研究，结果发现入院时患者 CD4+CD25+调节性细胞数目明显增高，患者在接受积极治疗后，出院时CD4+CD25+调节性细胞数目明显降低。

2 CD4+CD25+调节性细胞与免疫的关系

CD4+CD25+调节细胞数量异常或功能紊乱时会干扰机体的免疫力，使感染不能控制。有学者曾经分析过健康人群外周血中CD4+CD25+调节细胞时发现，老人外周血CD4+CD25+调节细胞呈增多趋势［6］。因此推测CD4+CD25+调节细胞与免疫下降有关。本次研究发现重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时CD4+CD25+调节性T细胞水平结果比较有差异，此外在重症肺炎组死亡患者与存活患者中CD4+CD25+调节性T细胞也存在差异。我们分析重症肺炎患者体内免疫力下降，造成感染持续不能得到有效控制。在免疫下降过程中，表现为炎症抗原刺激后使记忆效应性细胞寡克隆扩增和胸腺萎缩。当机体受到病原微生物攻击后，免疫反应不能有效地应答［7］。同样还有学者［8］指出在重症肺炎患者的胸腺细胞中存在CD4+CD25+调节性T细胞的积聚现象，而患者在接受丙种球蛋白、粒细胞集落刺激因子等有效治疗后，在出院时体内循环的CD4+CD25+调节性T细胞大幅度下降［9］。由于CD4+CD25+调节细胞在发生、表型、功能等方面均与小鼠体内的CD4+CD25+T细胞很相似，有学者［10］通过败血症大鼠动物实验模型发现，CD4+CD25+调节细胞在大鼠血及气管黏膜中显著增多，并且能够分泌大量抑制性的细胞因子，抑制正常细胞的增殖，可能途径是参与编码转录因子Foxp3的基因调控来抑制NK细胞、B细胞的活性［11］。

此外对于近几年来许多研究表明肺癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌等免疫低下患者中存在外周血和肿瘤浸润部位的CD4+CD25+调节细胞大量累积现象［12］。还有学者［13］发现乳腺癌患者外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞高于良性乳腺肿物患者和健康志愿者。此外CD4+CD25+调节细胞过高，会抑制抗肿瘤免疫，使机体容易催患肿瘤等疾病［14］。

3 正常血小板参数的意义

血小板指数包括MPV、PCT、PDW、PLT等4项指标。PLT是计数血小板的数量，反映血小板生成和衰亡的动态平衡。MPV代表平均血小板体积大小，主要反映骨髓中巨核细胞的增生、代谢及血小板的生成情况，反应血小板的超微结构及功能。PDW

代表血小板体积分布宽度，是血小板体积差异程度的一个参数［14］。PCT反映单位容积的全血中血小板体积所占的比例。

4 血小板参数与肺炎的关系

本次研究发现重症肺炎组、肺炎组和对照组入院时MPV及PLT水平结果比较有差异，此外在重症肺炎组死亡患者与存活患者中MPV及PLT也存在差异。重症肺炎患者体内感染严重，菌血症、毒血症使血小板破坏增多，并导致产血小板产物的代偿性增多，此外感染也会刺激骨髓巨核细胞产生血小板过多［15］。因此重症肺炎患者体内PLT明显高于肺炎组和对照组。还有学者指出重症肺炎发生后，会造成毛细血管低氧状态，使完整的血管内皮受到破坏，使血小板易于黏附、聚集于血管粗糙的内壁上，导致破坏加速，从而刺激骨髓巨核细胞的增生代谢及血小板生成，使外周循环池中产生大量新生血小板。而MPV与骨髓中巨核细胞的增生、代谢及血小板生成密切相关，MPV显示外周循环池中单个血小板超微结构和功能状态。即外周血血小板破坏增加后，骨髓发生代偿功能，促进成熟的巨核细胞的胞质转化为血小板，在此过程中使平均MPV增大。还有研究［18］指出肺炎急性期时，会使肺血管内皮细胞合成和释放血小板活化因子，使血小板活化增强，过度激活，而大体积血小板比小体积血小板更容易被活化。还有学者指出肺炎时低氧，病原微生物及其毒素作为始动因子可引起机体的微血管内皮损伤，激活在血小板聚集的过程中，会导致严重的肺循环障碍，甚至多器官功能衰竭，加重肺炎。本次研究发现重症肺炎组死亡患者与存活患者MPV比较无差异，但是重症肺炎组与对照组MPV之间有差异，我们分析可能与本研究样本量过少，影响研究结果。

因此，本次研究认为CD4+CD25+调节性T细胞、MPV及PLT可作为反应肺炎严重程度的敏感指标，并且可作为评价重症肺炎患者预后的客观指标。

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（潘子昂编辑）

Expression of CD4+CD25+Regulatory T Cells and Platelet Parameters in Patients with Severe Pneumonia

XIANG Juan，WU Jia-ni，TANG Bing
（Department of Critical Medicine，Chengdu Sixth People’s Hospital，Chengdu 610051，China）

Objective To investigate the significance of CD4+CD25+regulatory T cells and platelet parameters in patients with severe pneumonia.Methods A total of 80 patients with pneumonia in our hospital from May 2013 to October 2015 were collected，and further divided into 28 cases of severe pneumonia group and 52 cases of pneumonia group.The control group had 50 cases from healthy physical examination during the same period.CD4+CD25+regulatory T cells and platelet parameters were compared and analyzed.Results①CD4+CD25+regulatory T cells，MPV and PLT were different among severe pneumonia group，pneumonia group and control group（P＜0.05）.PDW and PCT showed no difference among severe pneumonia group，pneumonia group and control group（P＜0.05）.②CD4+CD25+regulatory T cells，MPV and PLT were different between died patients and alive patients with severe pneumonia.There was no difference between PDW，PCT and MPV in patients with severe pneumonia（P＞0.05）.Conclusion The study suggests that CD4+CD25+regulatory T cells，MPV and PLT can be used as a sensitive indicator of the severity of the response in pneumonia，and they can be used as an objective index to evaluate the prognosis of patients with severe pneumonia.

CD4+CD25+regulatory T cells； Platelet parameters； Severe pneumonia

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.11.018

2016-06-16；

2016-07-19

向娟，女，硕士，主治医师。Tel：15328006823