ATR-FTIR技术在进口血竭掺伪鉴别中的应用

李 梦 刘 杰 吕晓娜 李红霞 杨瑶珺 王文祎

(北京中医药大学中药学院，北京，100102)



中药研究

ATR-FTIR技术在进口血竭掺伪鉴别中的应用

李 梦 刘 杰 吕晓娜 李红霞 杨瑶珺 王文祎

(北京中医药大学中药学院，北京，100102)

目的：利用傅里叶变换衰减全反射红外光谱技术(ATR-FTIR)对进口血竭中的掺伪物质进行快速鉴别。方法：根据进口血竭与松香、达玛树脂、国产血竭对照药材的红外光谱对比图来对进口血竭中的掺伪物质进行快速鉴别。结果：27批进口加工血竭中有13批掺入了松香，3批掺入了达玛树脂，4批为国产血竭冒充，严重影响了进口血竭的质量。结论：傅里叶变换衰减全反射红外光谱技术操作快速简便，适合中药的快速鉴别。

进口血竭；傅里叶变换衰减全反射红外光谱技术；掺伪物质鉴别。

血竭，习称“进口血竭”，为棕榈科植物麒麟竭DaemonoropsdracoBl.果实中渗出的树脂经加工制成[1]。为贵重药材，具有活血化瘀、消肿止痛、收敛止血、补血等功效。龙血竭，习称“国产血竭”，为百合科植物剑叶龙血树[2]Dracaenacochinensis(Lour)S.C.Chen含脂木材经提取得到的树脂，其功效与进口血竭相似。进口血竭价格昂贵，与国产血竭价格相差甚远，均掺伪严重。本实验应用傅里叶变换衰减全反射红外光谱技术(ATR-FTIR)对27批进口血竭中的掺伪物质进行鉴别，以实现进口血竭的快速鉴别，并与高效液相色谱法测出的结果相对比，以使ATR-FTIR鉴定得到的结果更具有说服力。

1 ATR-FTIR对进口血竭掺伪物质鉴别

1.1 仪器及检测条件 仪器：Thermo Nicolet红外光谱仪，红外光谱仪衰减全反射附件，DTGS检测器，ATR附件检测范围：4000～650.0 cm-1，光谱分辨率4 cm-1，扫描信号累加16次。

1.2 样品及制备 进口血竭样本27批，编号为J1-J27。国产血竭样本46批，编号为G1-G46。样本采集自河北安国、安徽亳州、桂林、哈尔滨、河南等地。将收集好的样品粉碎，过4号筛，置干燥器中。

图1 进口血竭的红外光谱图

1.3 仪器稳定性考察 以国产血竭G1为例。对样品粉末连续扫描5次，对所得到的谱图进行相似度比较，其相关系数为0.999 9，结果表明，仪器具有良好的稳定性和精密度。

1.4 样品重现性考察 以国产血竭G1为例。对样品粉末重复扫描5次，对所得到的谱图进行相似度比较，其相关系数为0.998 0～0.999 9，结果表明，样品重现性良好，符合实验要求。

1.5 ATR-FTIR测定 在采集数据前，按仪器测试要求将金刚石ATR附件水平放置于FTIR仪的样品仓中。将上述样品粉末置于金刚石与校正压力装置之间的凹槽内，每次所用机械校正压力保持不变，分别对各样品进行ATR-FTIR测定。每个样品测定前均对背景进行扫描。

1.6 数据分析 采用OMNIC操作软件对样品进行数据采集和图谱预处理，预处理包括基线校正和平滑处理。

1.6.1 进口血竭的标准红外光谱图 以进口血竭对照药材为例，扫描红外光谱，得到进口血竭的标准光谱图。见图1。

1.6.2 进口血竭掺伪物质鉴别 分别对27批次进口血竭与松香、达玛树脂、国产血竭对照药材用傅里叶-衰减全反射红外光谱仪进行扫描，得到其红外光谱图，通过对比红外图谱中的特征峰，可以鉴别进口血竭中是否掺入了松香、达玛树脂以及国产血竭。通过对比红外光谱分析图，可得到掺伪情况表。见表1。

表1 进口血竭掺伪情况表

2 高效液相色谱法对进口血竭掺伪物质鉴别

2.1 仪器与试剂

2.1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪；色谱柱：Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；Sartorious BP110S分析天平(北京赛多利斯仪器有限公司)；KQ5200E超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；铜冲。

2.1.2 试剂 甲醇(Fisher公司，色谱纯)；屈臣氏蒸馏水；乙腈(Fisher公司，色谱纯)；龙血素A对照品(批号为111660-200402，中国食品药品检定研究院)；龙血素B对照品(批号为111558-201006，中国食品药品检定研究院)；冰醋酸(分析纯)；血竭素高氯酸盐对照品(批号为110811-201105，中国食品药品检定研究院)。

2.2 进口血竭中血竭素含量的测定

2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 按2015年版《中华人民共和国药典》方法中的规定，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钠按50∶50的比例为流动相；以440 nm作为检测波长；柱温控制在40 ℃。计算得到的理论板数按血竭素峰应不低于4 000。

2.2.2 血竭素高氯酸盐对照品溶液的制备 按2015年版《中华人民共和国药典》方法中的规定，精密称取进口血竭的血竭素高氯酸盐对照品9 mg，放置于50 mL棕色量瓶中，加入3%的磷酸甲醇溶液使之溶解，并稀释至刻度，待充分摇匀后再精密量取1 mL溶液置5 mL棕色量瓶中，加入甲醇试剂至刻度，摇匀，即得每1 mL中含血竭素26 μg的血竭素高氯酸盐对照品。

2.2.3 供试品溶液的制备 按2015年版《中华人民共和国药典》方法中的规定，取进口血竭样品适量，研磨成细粉，精密称取0.05～0.15 g，放置于具塞试管中，再加入精密量取的10 mL 3%磷酸甲醇溶液，密塞后振摇3 min，滤过，精密量取1 mL续滤液，放置于5 mL棕色量瓶中，加入甲醇试剂至刻度，摇匀，即得。分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10 μL，将其注入到液相色谱仪，测定，即得。测得的样品含量如表2所示。

表2 高效液相色谱法测得血竭素含量

3 讨论

采用傅里叶-衰减全反射红外光谱法，得到中红外光谱图。1 689.68 cm-1峰、784.53 cm-1峰、891.44 cm-1峰，为松香特征峰，以此来鉴别进口加工血竭；峰1 727.20 cm-1、1 692.36 cm-1、1 231.43 cm-1、783.9 cm-1、714.22 cm-1为达玛树脂特征峰，以此来鉴别进口加工血竭的辅料是否为达玛树脂；3362.21 cm-1峰为鉴别进口血竭、国产血竭的特征峰。

通过对比进口血竭、国产血竭、松香、达玛树脂的中红外光谱图，得出样品J2、J4、J5、J8、J9、J13、J14、J15、J16、J17、J18、J19、J23、J24光谱图中出现了松香的特征峰，分别为1 689.68 cm-1峰(强峰)、784.53 cm-1峰、891.44 cm-1峰，故此14批样品中掺入了松香。

样品J10、J26、J27加入的辅料为达玛树脂。因其红外光谱图中有达玛树脂特征峰1 727.20 cm-1、1 692.36 cm-1、1 231.43 cm-1、783.9 cm-1、714.22 cm-1，因此推断此3批样品为加入达玛树脂的进口加工血竭。

对比中红外图谱还发现样品J6、J7、J21、J22，4批进口血竭经扫描，得出国产血竭的中红外光谱图，该4批样品实际为国产血竭，而且高效液相色谱法在J6、J7、J21、J22均未检测出血竭素含量，即表明样品并非进口加工血竭，傅里叶-衰减全反射红外光谱法和高效液相色谱法测定的结果相互印证了结论的可靠性，能快速鉴定出进口血竭中掺入国产血竭的现象。

从以上结果可以看出市场上流通的进口血竭掺伪非常严重，严重影响了血竭质量。同时也证明了傅里叶变换衰减全反射红外光谱技术可以对进口血竭中的掺伪物质进行快速鉴别，有一定实际应用，值得在中药领域推广应用。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015：141.

[2]刘安,李爱新,李虹.中药血竭的临床应用概述[J].中国实用医药,2014(1):262-263.

[3]曾令榜,张金平.传统中药材龙血竭药性药理及临床应用探讨[J].亚太传统医药,2014,10(3):43-44.

[4]曾正.试析国产血竭研究近况[J].中国药房,1992,3(1):48-49.

[5]商国懋,王文颖.血竭的来源与生产加工[J].首都医药,2014,21(11):45.

[6]徐红英,张晓燕.中药血竭研究进展[J].中医药学报,2011,1(4):101-103.

[7]刘文杰.铁皮石斛的红外光谱定性定量研究[D].北京：北京中医药大学,2014.

[8]陆玮,梁艺坚,潘彬,等.HPLC测定新舒通胶囊中血竭素与亚油酸含量[J].中国药师,2015,18(9):1601-1602.

[9]黄红英,尹齐和.傅里叶变换衰减全反射红外光谱法(ATR-FTIR)的原理与应用进展[J].中山大学研究生学刊：自然科学.医学版,2011,13(1):20-31.[10]蒋淑云,李红,蒋孟良,等.七厘散凝胶剂中血竭素含量的HPLC测定[J].中国药师,2016,19(3):589-591.

[11]邵艳秋,杜昌文,申亚珍,等.基于中红外衰减全反射光谱的氮同位素标记硝态氮的快速测定[J].分析化学,2014,16(5):745-752.

[12]秦建平,李家春,吴建雄,等.基于UPLC结合化学计量学方法的龙血竭指纹图谱研究[J].中国中药杂志,2015,40(6):1114-1118.

[13]易珍奎.傅里叶变换近红外漫反射光谱法结合化学计量学技术高通量分析草麻黄药材的方法学研究[D].重庆：重庆医科大学,2012.

[14]王钢力,聂黎行,张继,等.应用近红外光谱技术鉴别红参药材[J].中草药,2008,39(3):438-440.

[15]吴利敏.近红外光谱法快速检测某些中药及中成药品质的应用研究[D].重庆：西南大学,2013.

[16]王宁,武卫红.近红外光谱技术在中药分析领域中的应用[J].山东中医药大学学报,2007,7(4):350-353.

[17]邱雁.漫反射光谱的理论与应用研究[D].上海：同济大学,2007.

[18]饶伟文,钟建理,张治军.中药近红外鉴别法的初步研究[J].首都医药,2009,16(20):54-56.

[19]刘杰,杨瑶珺,王文祎,等.基于电子鼻技术的国产血竭与进口血竭快速鉴别研究[J].世界中医药,2015,10(4):583-585，589.

[20]汤小燕,陈越,李炯.HPLC测定神农镇痛膏中血竭素的含量[J].中国执业药师,2014(4):14-16.

[21]徐玉玲,梁慧,凌娅,等.龙血竭HPLC指纹图谱研究[J].成都大学学报：自然科学版,2014,33(1):1-3.

(2015-10-06收稿 责任编辑：洪志强)

ATR-FTIR Technique in Identification of Adulteration in Imported Draconis

Li Meng, Liu Jie, Lyu Xiaona, Li Hongxia, Yang Yaojun, Wang Wenyi

(SchoolofChinesePharmacy,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100102,China)

Objective:Fourier transform attenuated total reflection infrared spectroscopy (ATR-FTIR) was applied for a quick identification of adulteration in imported draconis. Methods:The FTIR figures of imported dracosin, darma resin and Chinese dracosin were contrasted to quickly identify the adulteration in all the materials. Results:Rosin was mixed in 13 batches in all the 27 batches of imported draconis, resin in 3 batches and Chinese draconis was substituted in 4 batches. These seriously affected the quality of the imported draconis. Conclusion:Fourier transform attenuated total reflection infrared spectroscopy is easy and convenient for operation and is suitable for quick identification of traditional Chinese medicine (TCM).

Imported draconis; Attenuated total reflection fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FTIR); Adulteration identification

北京中医药大学“重点学科”开发课题(编号：2013-2DXKKF-21)

R282.5

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2016.10.051