儿童和成人下呼吸道感染病原菌分布及耐药性差异分析

周 聪，柯文才，钱雪琴，胡 娟，刘亚隽，张 慧，申春梅

(1.上海市第五人民医院检验科 200240；2.上海市公共卫生临床中心检验科 201058)



·论 著·

儿童和成人下呼吸道感染病原菌分布及耐药性差异分析

周 聪1，柯文才1，钱雪琴2，胡 娟1，刘亚隽1，张 慧1，申春梅1

(1.上海市第五人民医院检验科 200240；2.上海市公共卫生临床中心检验科 201058)

目的 研究儿童和成人下呼吸道感染病原菌分布及耐药性，比较两者差异，为临床合理用药提供依据，减缓耐药病原菌的产生。方法 采集2014年1月至2015年10月儿童和成人下呼吸道感染患者的痰标本和支气管肺泡灌洗液，进行细菌鉴定及药敏试验，比较两者差异。结果 儿童和成人患者分离的病原菌均以革兰阴性杆菌为主，分别占62.4%和89.7%，革兰阳性球菌分别占37.6%和10.3%。儿童患者分离的革兰阴性杆菌排名依次为流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、卡他莫拉菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌；分离的革兰阳性球菌排名依次为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌。成人分离的革兰阴性杆菌排名依次为肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、黏质沙雷菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌；分离的革兰阳性球菌排名依次为金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌。儿童和成人患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分别为12.8%和53.9%。儿童分离的革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药耐药率较低，小于5.0%；成人对碳青霉烯类药耐药率较高，尤其是鲍曼不动杆菌，其对碳青霉烯类药耐药率大于50.0%。结论 儿童和成人病原菌株分布和耐药性差异较显著，临床用药应充分考虑，为患者早期治疗提供依据，同时尽快进行药敏试验，科学合理用药。

儿童； 成人； 下呼吸道感染； 病原菌分布； 耐药性分析

下呼吸道感染是临床常见、多发的感染性疾病，随着临床广谱抗菌药物的滥用，细菌耐药性呈上升趋势。儿童呼吸道发育不完善，免疫力低下，定植菌容易引起下呼吸道感染，预后较差，是年龄小于5岁儿童的主要死亡原因之一。本研究将研究儿童和成人下呼吸道病原菌分布和耐药性，比较2组人群结果的异同，为临床合理用药提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 儿童菌株来源于2014年1月至2015年10月上海市第五人民医院儿科病房和门诊儿童的痰标本和支气管肺泡灌洗液标本共1 239例，剔除重复株，分离病原菌423株。成人菌株来源于2014年1月至2015年10月上海市第五人民医院住院和门诊成人的痰标本和支气管肺泡灌洗液标本共7 599例，剔除重复株，分离病原菌3 182株。所有菌株均采自临床诊断为下呼吸道感染患者。

1.2 仪器与试剂 仪器采用法国生物梅里埃Vitek 2 compact细菌鉴定与药敏分析仪，以及与之配套的革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌、酵母菌、苛养菌鉴定卡。培养基血平板、巧克力和中国蓝平板购自科玛嘉，抗菌药敏纸片由北京天坛公司提供。质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC25923均由上海市临床检验中心提供。

1.3 方法 痰合格标本应白细胞≥25/LP，上皮细胞≤10/LP。痰和支气管肺泡灌洗液标本2 h内接种于血平板、巧克力和中国蓝平板，放5.0%CO2培养箱35 ℃培养18～24 h，若无致病菌生长，则延长培养至48 h观察结果。按照《全国临床检验操作规程》分离病原菌[1]，细菌鉴定采用上机做鉴定，严格按照操作规程。药敏分析采用纸片扩散法(K-B法)，严格按照2014版美国临床和实验室标准协会(CLSI)操作和判读。

1.4 统计学处理 采用WHONET 5.6软件对数据进行统计分析，计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 病原菌分布 儿童采集的1 239例标本中，分离出402株病原菌，分离阳性率为32.4%。其中革兰阴性杆菌为251株(占62.4%)，革兰阳性球菌为151株(占37.6%)。成人采集的7 599例标本中，分离出2 856株病原菌，分离阳性率为37.6%。其中革兰阴性杆菌为2 562株(占89.7%)，革兰阳性球菌为294株(占10.3%)。成人分离阳性率略高于儿童，儿童和成人分离的病原菌株都以革兰阴性杆菌为主，但儿童分离的革兰阳性球菌比例显著高于成人。见表1、2。儿童分离的革兰阴性杆菌排名依次为流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、卡他莫拉菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌；分离的革兰阳性球菌排名依次为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌。成人分离的革兰阴性杆菌排名依次为肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、黏质沙雷菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌；分离的革兰阳性球菌排名依次为金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌。可见儿童和成人下呼吸道感染菌群分布有很大不同，尤其是革兰阴性杆菌。

2.2 儿童和成人常见菌株耐药率分析 总体来看，儿童常见菌株耐药率比成人低。革兰阴性杆菌耐药率方面，流感嗜血杆菌占儿童患者所分离革兰阴性杆菌第1位，其对碳青霉烯类药美罗培南、喹诺酮类药环丙沙星和左氧氟沙星、头孢曲松、阿奇霉素的耐药率最低，均为0。儿童患者分离的其他常见革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药美罗培南和亚胺培南、氨基糖苷类药阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低，均小于5.0%。成人患者分离的常见革兰阴性杆菌对氨基糖苷类、碳青霉烯类，头孢哌酮/舒巴坦耐药率较高，尤其是鲍曼不动杆菌容易出现多重耐药。

革兰阳性球菌方面，儿童和成人分离革兰阳性球菌占首位的均为金黄色葡萄球菌，儿童分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占比为12.8%，成人分离的MRSA占比高达53.9%，差异有统计学意义(P<0.05)。儿童和成人分离的革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的耐药率均为0。分离的革兰阳性球菌对红霉素和克林霉素的耐药率较高，尤其是肺炎链球菌对红霉素和克林霉素耐药率达到了100.0%。肺炎链球菌对苯唑西林耐药较低，耐药率小于16.0%。见表3、4。

表1 儿童下呼吸道感染病原菌分布百分比

表2 成人下呼吸道感染病原菌分布百分比

表3 儿童和成人患者常见革兰阴性杆菌的耐药率(%)

续表3 儿童和成人患者常见革兰阴性杆菌的耐药率(%)

注：-表示无数据。

表4 儿童和成人患者常见革兰阳性球菌的耐药率(%)

注：-表示无数据。

3 讨 论

本研究显示，金黄色葡萄球菌占儿童和成人患者分离革兰阳性球菌的首位，与相关学者研究结果类似[2-3]。本研究中，儿童MRSA检出率为12.8%，成人MRSA检出率高达53.9%，儿童对β-内酰胺类、头孢菌素类、碳青霉烯类药敏感性尚可，而成人对β-内酰胺类、头孢菌素类、碳青霉烯类药敏感性差，已不宜采用；儿童和成人分离的金黄色葡萄球菌均对红霉素和克林霉素的耐药率较高，两者均未发现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的耐药。

流感嗜血杆菌是儿童患者分离的主要菌株，占分离革兰阴性杆菌的第1位，而在成人患者中所占比例较少，可能是儿童和成人体质差异，儿童呼吸系统发育不完全，免疫力低下，抵抗力差，流感嗜血杆菌作为定植菌容易感染[4]，此与陈国英等[5]的研究结果相似。而王晓丽等[6]研究显示，流感嗜血杆菌并非儿童分离革兰阴性杆菌的主要菌株，其主要菌株为肠杆菌科细菌，原因可能由地区差异性造成，流感嗜血杆菌菌落特征不典型，容易与其他细菌混淆，容易引起漏诊。氨苄西林作为一线抗流感嗜血杆菌药，其耐药率已达65.4%，可能由于氨苄西林使用率较高及不规范用药造成耐药率升高。流感嗜血杆菌对碳青霉烯类药美罗培南、喹诺酮类药环丙沙星和左氧氟沙星、头孢曲松、阿奇霉素的耐药率最低，均为0，喹诺酮类药对软骨发育有不良反应，故临床此类药对儿童采用较少，可能导致儿童患者对此类药的耐药率低。

肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌是成人患者分离菌株的前2位，与周沁怡[7]研究结果相似。成人患者肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药的耐药率正在上升[8]，耐药率分别已达7.8%、58.7%。鲍曼不动杆菌对各类药的耐药率均较高，容易引发多重耐药，肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低，均小于10.0%。与成人比较，儿童患者感染的肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌耐药率较低，对碳青霉烯类药美罗培南和亚胺培南、氨基糖苷类药阿米卡星、庆大霉素、头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低，均小于5.0%。

综上所述，儿童和成人病原菌株分布和耐药差异比较显著。两者菌株分布最大的差异为儿童分离革兰阴性杆菌中流感嗜血杆菌占第1位，而成人为肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌。儿童比成人耐药率普遍偏低。儿童MRSA检出率为12.8%，成人MRSA检出率53.9%。儿童分离的革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药耐药率较低，小于5.0%；成人对碳青霉烯类药耐药率较高，尤其是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药耐药率大于50.0%。

根据儿童和成人病原菌株分布和耐药性不同，在对儿童分离标本时，应审慎注意有无流感嗜血杆菌，以防漏检；临床用药应根据儿童和成人的特点，制订个性化治疗方案，通过做药敏试验，科学合理用药，避免盲目用药，延缓细菌耐药率的上升。

[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:745.

[2]李建华,姜晓云,毛惠珍,等.成人与儿童下呼吸道感染患者的病原菌分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2015,25(20):4610-4612.

[3]沈丽珍,张爱鸣,陈素菜,等.成人与儿童下呼吸道标本病原菌分布差异的比对与耐药性分析[J].中国微生态学杂志,2012,24(5):419-421.

[4]赵呈元,邹强,迟富丽,等.南京地区儿童与成人下呼吸道感染病原菌分布及耐药性对比分析[J].国际检验医学杂志,2015,36(1):93-97.

[5]陈国英,韩善梅,黄怃.儿童下呼吸道感染病原菌分布及耐药性与成人对比分析[J].中国实用医药,2013,8(25):15-17.

[6]王晓丽,俞赵军,缪琪.儿科患儿医院呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2014,24(22):5673-5675.

[7]周沁怡.下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析[D].兰州：兰州大学,2013:1-57.

[8]汪复,朱德妹,胡付品,等.2012年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中华感染与化疗杂志,2013,13(5):321-330.

Analysis on differences in distribution and drug resistance of lower respiratory tract infection pathogenic bacteria between children and adults

ZHOUCong1,KEWencai1,QIANXueqin2,HUJuan1,LIUYajuan1,ZHANGHui1,SHENChunmei1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiMunicipalFifthPeople′sHospital,Shanghai200240,China; 2.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiMunicipalPublicHealthClinicalCenter,Shanghai201058,China)

Objective To investigate the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing lower respiratory tract infection in children and adult patients and to compare their differences in order to provide a basis for reasonable drug usein clinic and slowing down the generation of drug resistant pathogenic bacteria.Methods The sputum samples and bronchial alveolar lavage fluid were collected in children and adult patients with lower respiratory tract infection from January 2014 to October 2015,then the bacterial identification and drug sensitivity test were performed for comparing the differences between them.Results The isolated pathogenic bacteria in children and adult patients were dominated by Gram-negative bacilli,accounting for 62.4% and 89.7% respectively,and Gram-positive cocci accounting for 37.6% and 10.3% respectively.Gram negative bacilli isolated from children ranked as in turn Haemophilus influenzae(Hin),Escherichia coli(Eco),Klebsiella pneumoniae(Kpn),Acinetobacter baumannii(Aba),Moraxella catarrhalis(Mc),enterobacter cloacae(Ecl),Pseudomonas aeruginosa(Pae);the isolated Gram positive cocci were ranked as in turn staphylococcus aureus(Sau) andstreptococcus pneumoniae(Spn).Gram negative bacilli isolated from adults were ranked asin trun Kpn,Aba,Pae,Pma,Sma,Eco,Ecl;Gram positive cocci were ranked as in turn Sau,streptococcus agalactiae(Sgc) and Spn.The detection rates of methicillin resistant Staphylococcus aureus(MRSA) in children and adults were 12.8% and 53.9% respectively.Gram negative bacilli isolated form children had the low resistance to carbapenem,which was less than 5.0%;For adults,the resistance of Gram negative bacilli to carbapenem was higher,especially Aba,which was more than 50.0%.Conclusion The differences in drug resistance of pathogenic bacterial strains between children and adults are more obvious,therefore which should be fully considered in clinical medication to provide the basis for the early treatment of patients,meanwhile the drug sensitivity test should be carried out as soon as possible for conduct the scientific and rational medication.

children; adults; lower respiratory tract infection; pathogenic bacteria distribution; drug resistance analysis

周聪，男，技师，主要从事临床微生物方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.22.008

A

1673-4130(2016)22-3113-04

2016-04-13

2016-06-19)