IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI鉴别良恶性胸腔积液的应用价值研究*

赖 馨，李小峰，陈丽芳，胡 琴，万彦彬，林建华

(1.广东省深圳市龙岗区人民医院检验科 518172；2.中山大学附属肿瘤医院检验科，广州 510000)



·论 著·

IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI鉴别良恶性胸腔积液的应用价值研究*

赖 馨1，李小峰1，陈丽芳1，胡 琴1，万彦彬1，林建华2

(1.广东省深圳市龙岗区人民医院检验科 518172；2.中山大学附属肿瘤医院检验科，广州 510000)

目的 探讨白细胞介素(IL)-2、IL-27、血管内皮生长因子(VEGF)、组织因子(TF)及组织因子途径抑制物(TFPI)鉴别良恶性胸腔积液的应用价值。方法 采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测67例良性胸腔积液及73例恶性胸腔积液的IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI 5种分子标志物的水平。结果 恶性胸腔积液组的IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI水平均显著高于良性胸腔积液组，差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示，只有VEGF是胸腔积液良恶性鉴别的独立影响因素。结论 胸腔积液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的检测有助于临床诊治良恶性胸腔积液患者，其中VEGF可做为胸腔积液良恶性鉴别的独立影响因素。

良恶性胸腔积液； 白细胞介素-22； 白细胞介素-27； 血管内皮生长因子； 组织因子

胸腔积液按病因不同可分为良性与恶性胸腔积液。通常恶性积液患者占所有胸腔积液患者的25%～30%，是恶性肿瘤的典型特征。肺癌、乳腺癌和恶性淋巴癌是导致恶性胸腔积液的前3位病因[1]，恶性胸腔积液患者的平均生存期不到6个月。因此，准确鉴别2种不同性质积液，特别是及早诊断出恶性胸腔积液，对于确定治疗原则和判断患者的预后具有重要临床价值。本研究旨在检测良恶性胸腔积液中白细胞介素(IL)-22、IL-27、血管内皮生长因子(VEGF)、组织因子(TF)及组织因子途径抑制物(TFPI)水平，分析其在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取中山大学附属肿瘤医院2015年住院并经影像学及病理学确诊为恶性胸腔积液患者73例；其中男41例，女32例；平均年龄(56.1±11.6)岁。选取同期广东省深圳市龙岗区人民医院住院良性胸腔积液患者67例；男49例，女18例；平均年龄(55.6±13.1)岁。2组患者的性别、年龄、病史等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 仪器与试剂 所用酶标仪为安图PHOMO全自动酶标仪(精度变异系数≤2%)。IL-22、IL-27、VEGF、TF和TFPI检测试剂盒均由上海酶联生物科技有限公司提供(在有效期内使用，试剂相关性0.999 2、批间差8.8%、批内差6.9%),采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法，操作按试剂盒说明书进行。

1.3 方法 常规胸穿留取胸腔积液10 mL，以3 000 r/min离心10 min，取上清液-80 ℃保存待测。按标准作业程序(SOP)标准操作程序，采用ELISA法，于PHOMO全自动酶标仪检测IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI。

2 结 果

2.1 5种分子标志物的检测结果 2组患者胸腔积液中IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI水平的检测结果,见表1。在恶性胸腔积液中，IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的水平均显著高于良性胸腔积液组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 良恶性胸腔积液5种分子标志物测定值的比较

2.2 5种分子标志物多因素Logistic回归分析 采用Logistic多因素回归分析，结果显示VEGF是胸腔积液良恶性鉴别的独立影响因素。见表2。

表2 5种分子标志物多因素Logistic回归分析

3 讨 论

良恶性胸腔积液的有效鉴别诊断一直是临床和实验室探讨的问题。目前，国内外常用检测手段为常规细胞病理学检查，其优点是能维持细胞的原有形态和生理状态，操作简便，可快速得到结果；而缺点是准确性和敏感性不高[2]，对恶性胸腔积液的诊断敏感性只有50%～78%。因此，国内外学者提出鉴别诊断良恶性胸腔积液的分子标志物IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI等，临床应用取得了一定效果。

IL-22属于IL-10家族[3-4]。IL-10 R1b和IL-22R1a的异源复合体可激活信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路。STAT3信号参与肿瘤发生与细胞凋亡。有报道称IL-22能调节炎性疾病的发病过程，参与协助宿主抵抗微生物感染，如在结核患者体内，自然杀伤细胞分泌IL-22，使吞噬溶酶体的融合作用加强，减少胞内结核杆菌的增殖，从而提高对结核杆菌的免疫应答[5-6]。

IL-27是一种异源二聚体细胞因子，属于IL-12家族，每1个都由1条α链和β链组成，通过T细胞或自然杀伤细胞上高表达的受体传递信号。IL-27由激活的抗原呈递细胞所分泌，具有促炎性和抗炎性作用。

VEGF是血管内的特异性肝素结合因子，能促进新生血管的生成，是肿瘤发生的必要条件。VEGF是高度保守的同源二聚体糖蛋白，由于mRNA剪切方式的不同，VEGF至少有5种蛋白形式，其中有3种是分泌性的可溶性蛋白，能直接作用于血管内皮细胞，促进血管内皮细胞的增值，增加血管的通透性。研究表明，肿瘤浸润或转移至胸腹膜后，血管内皮生长因子VEGF水平的升高、肿瘤新生血管的生成以及血管通透性的增加是浆膜腔内积液的重要形成机制[7-8]。

TF是一种47×103的跨膜单链糖蛋白，是凝血因子Ⅶ(FⅦ)和活化凝血因子Ⅶ(FⅦa)的受体，与FⅦ或FⅦa结合形成TF-Ⅶa复合体，启动血液凝固级联反应。最近研究发现，TF在肿瘤浸润和转移、血管生成上具有重要作用[9-10]。

TFPI是一类蛋白酶抑制剂，其靶蛋白为FⅦa和凝血因子Ⅹa(FⅩa)。TFPI通过分别与FⅦa和FⅩa结合而实现。TFPI直接抑制FⅩa，而对FⅦa的抑制则需要FⅩa同时存在。TFPI通过对TF诱导凝血的抑制作用，在肿瘤浸润和转移、血管生成上同样具有重要作用[11]。

为了提高良恶性胸腔积液鉴别诊断的准确度，笔者检测分析了2种积液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI 5种分子标志物的水平。相对于良性胸腔积液，恶性胸腔积液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的水平均显著升高，其差异有统计学意义(P<0.05)。进一步分析以上分子标志物在胸腔积液良恶性鉴别诊断中的独立影响因素，仅VEGF是胸腔积液良恶性鉴别的独立影响因素。虽然可能与研究标本量及标本间的交互效应有关，但也提示胸腔积液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的检测有助于临床诊治良恶性胸腔积液患者，且VEGF可作为胸腔积液良恶性鉴别的独立影响因素。

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Study on application value of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in identification of benign and malignant pleural effusion*

LAIXin1,LIXiaofeng1,CHENLifang1,HUQin1,WANYanbin1,LINJianhua2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofLonggangDistrict,Shenzhen,Guangdong518172,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedTumorHospitalofSunYat-senUniversity,Guangzhou,Guangdong510000,China)

Objective To explore the application value of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in the identification of benign and malignant pleural effusion.Methods The enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was adopted to detected the five molecular markers levels of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI levels in 67 cases of benign pleural effusion and 73 cases of malignant pleural effusion.Results The levels of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in the malignant pleural effusion group was significantly higher than those in the benign pleural effusion group,and the differences were statistically significant(P<0.05).The multi-factor Logistic aggression analysis results showed that only VEGF was an independent influencing factor for identifying benign and malignant pleural effusion.Conclusion The detection of pleural effusion IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI is helpful for clinical diagnosis and treatment of the patients with benign and malignant pleural effusion,in which VEGF can be regarded as an independent factor influencing the identification of benign and malignant pleural effusion.

benign and malignant pleural effusion; IL-22; IL-27; VEGF; TF

广东省深圳市龙岗区科技发展资金医疗卫生(扶持类)项目(YLWS20150513173417559)。

赖馨，女，主管技师，主要从事临床基础检验方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.22.007

A

1673-4130(2016)22-3111-02

2016-04-09

2016-06-15)