急性冠脉综合征患者局部IL-12水平及与短期不良预后的关系

周选民　王立琴▲　刘梅讯　党书毅

1.湖北医药学院附属太和医院介入放射科,湖北十堰442000；2.湖北医药学院附属太和医院心内科,湖北十堰442000

急性冠脉综合征患者局部IL-12水平及与短期不良预后的关系

周选民1王立琴1▲刘梅讯1党书毅2

1.湖北医药学院附属太和医院介入放射科,湖北十堰442000；2.湖北医药学院附属太和医院心内科,湖北十堰442000

目的探讨急性冠脉综合征（ACS)患者冠脉窦局部白介素（IL)-12表达水平,及观察其对ACS患者短期发生不良预后的影响。方法选择湖北医药学院附属太和医院2014年7月～2015年4月收治并确诊的93例ACS患者为观察组,同期接受冠脉造影无异常的25例胸痛患者为对照组,所有患者均采集静脉窦血液,ELISA方法测定血浆IL-12水平。记录ACS患者临床资料,住院期间及出院后随访30 d的主要心血管不良事件。运用Lo鄄gistic多元回归分析ACS患者短期内发生主要心血管不良事件的危险因素。结果ACS组静脉窦血浆IL-12水平明显高于对照组,差异有高度统计学意义（P＜0.01)。Logistic多元回归分析显示:IL-12水平、年龄、C反应蛋白（CRP)、左室射血分数（LVEF)是ACS患者短期内（30 d)发生不良心血管事件的独立因素（P＜0.05),局部血浆IL-12水平每升高10 ng/L,ACS患者发生不良心血管事件概率增加约50%（P=0.031)。结论IL-12在ACS患者静脉窦血液中表达升高,并可作为ACS患者短期不良预后的独立危险因素。

急性冠脉综合征曰白介素-12曰静脉窦曰预后

急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS)是临床常见的一类致死性心血管疾病,其主要病理生理过程是冠状动脉粥样硬化斑块破裂、血管痉挛和随之发生的血小板黏附、聚集及继发性血栓形成。近年来,越来越多专家学者认为:炎性反应在冠脉粥样斑块破裂以及ACS疾病发展过程发挥极其重要的作用。促炎和抗炎因子的失衡易导致不稳定斑块发生、演变和破裂从而诱发ACS[1-4]。白介素-12（IL-12)是一种具有多种免疫调节功能的促炎症性细胞因子,它作为效应最强的NK细胞激活因子和T淋巴细胞诱导因子,能引起Th1、Th2细胞免疫应答,参与机体的免疫炎症反应[5]。国内外有文献报道ACS患者体内IL-12水平是升高的[6],另外,复杂病变的UA患者IL-12水平同样较简单病变的高[7],提示IL-12可能参与ACS发病过程。然而,外周血细胞因子水平所受影响因素较多,有时意义并非很大,而对病变局部炎性反应的测定将有助于更深入地挖掘疾病的发病机制[8]。因此,本研究通过检测ACS患者冠状动脉局部血浆IL-12的表达水平并随访患者3个月不良事件发生情况,以探讨IL-12在ACS发生、发展过程中的重要意义。

1　资料与方法

1.1一般资料

选择湖北医药学院附属太和医院心内科2014年7月～2015年4月收治并确诊为ACS的住院患者93例,平均年龄（60.3±11.3岁),其中不稳定型心绞痛（UA) 30例,急性非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI)28例,急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI)35例。另外,以同期25例胸痛待查入院,经冠脉造影检查冠脉正常者为对照组,平均年龄（63.5±12.9)岁。ACS诊断符合ACC/AHA 2007标准[9]；并排除现患严重感染性疾病、免疫系统疾病、恶性肿瘤、严重的肝肾功能不全、心功能不全（射血分数＜50%),以及其他原因不能行冠脉介入治疗,或者资料不全的患者。所有患者均知情同意,并接受随访30 d。

随访终点事件:对入选的ACS患者记录在院及出院后随访30 d的心血管不良事件,以主要心血管不良事件如心源性猝死、非致命性心肌梗死、非致命性心力衰竭、顽固性心绞痛及需血运重建为随访终点事件。

1.2方法

1.2.1临床资料收集收集患者入院时一般资料以及住院期间常规化验和影像学检查结果。

1.2.2冠脉窦血液采集及测定[9]患者平卧位,常规消毒铺巾局部麻醉,Seldinger法穿刺右侧股静脉,置入6F鞘管,经鞘管注入肝素3000 U,经静脉鞘管沿导引钢丝送入右心导管至冠状静脉窦,导管中滞留血液弃去,随后采集5 mL血液,置于肝素钠抗凝管中,以3000 r/min,离心10 min,取上清分装2支试管,-80℃冰箱保存待测。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA)法检测血浆IL-12水平,试剂盒购自北京友谊中联生物技术有限公司,由R&D systems（U.S)公司生产,操作严格按照产品说明进行。

1.3统计学方法

采用统计软件SPSS 20.0对数据进行分析,正态分布的计量资料以均数±标准差（依s)表示,多组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示,采用χ2检验。ACS组主要心血管不良事件发生的相关危险因素的分析采用Logistic多元逐步回归分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组一般临床特征及局部血浆IL-12水平比较

比较两组患者性别、年龄等一般资料比较,差异无统计学意义（P＞0.05)。与对照组比较,ACS组患者CRP、LDL-C水平升高,心功能较差。见表1。

表1　两组患者一般临床特征与局部血浆IL-12水平（依s)

表1　两组患者一般临床特征与局部血浆IL-12水平（依s)

组别例数性别（男/女)年龄（岁) IL-12（ng/L)总胆固醇（mmol/L)三酰甘油（mmol/L)低密度脂蛋白胆固醇（mmol/L) C反应蛋白（mg/L)脑尿钠肽（ng/L)左心射血分数（%)对照组ACS组P值25 93 18/7 70/23 0.384 63.5±12.9 60.3±11.3 0.583 122.18±15.24 254.67±30.94 0.001 4.27±0.81 4.64±0.73 0.421 1.61±0.65 1.87±0.84 0.294 2.76±1.01 3.15±1.23 0.019 3.75±0.84 9.74±1.86 0.003 127.47±30.14 204.61±29.37 0.009 65.17±20.23 53.42±16.85 0.031

ACS患者基线时的局部血浆IL-12水平显著高于对照组,差异有高度统计学意义（P＜0.01)。见表1。

2.2心血管不良事件发生情况

观察记录93位ACS患者住院期间和随访30 d主要心血管不良事件发生情况详见表2。

2.3Logistic多元逐步回归分析

以主要心血管不良事件发生与否作为因变量,将IL-12水平、年龄、LDL-C、BNP、CRP、LVEF作为自变量进行Logistic多元逐步回归分析。结果显示IL-12水平、年龄、CRP、LVEF是影响ACS患者短期不良预后的独立危险因素（P＜0.05)。见表3。

表2　住院期间及随访30 d心血管不良事件发生情况[n（%)]

表3　Logistic多因素逐步回归分析结果

3　讨论

随着社会的发展,ACS已经成为全球范围内威胁人类健康的头号杀手,每年死于ACS与心脏猝死者数以千万计[11]。近年来,对ACS发病机制研究的不断深入,发现ACS发病的中心启动环节是由于斑块不稳定和血栓形成,其中炎性反应发挥至关重要的角色。目前,针对ACS患者外周血炎症因子水平,特别是细胞因子和趋化因子的研究非常多[12],这些炎症介质与ACS的发生发展密切相关[13],其中针对某些炎症因子的靶向治疗已具有一定临床治疗作用[14]。然而,外周血炎症因子的测定只能一定程度上反映全身炎症水平,但炎性反应有时所受影响因素较多,每个患者全身状况也不尽相同（年龄、基础疾病、用药情况等),因此冠脉粥样硬化斑块局部取样或冠脉窦取血因可避免稀释效果,从而提高其评价局部心脏炎症反应的敏感性和特异性[15-16]。本实验采取的冠状动脉窦取血是观察炎症因子与冠心病关系的方法之一。一般冠状静脉窦收集来自左冠脉的大部分血液,因此冠状静脉窦血浆炎症因子浓度更能反映左冠脉及其以远血管床的炎性反应程度[8]。

IL-12是近年来发现的由p40和p35亚基通过二硫键连接而成的异源二聚体分子,作为IL-12细胞因子家族中典型代表,正常情况下主要由单核/巨噬细胞和成熟树突状细胞产生[17]。在人类免疫网络中, IL-12占据着十分重要的位置,它是一个非常重要的Th1细胞极化因子,可促进Th1细胞增殖和分化,上调干扰素-γ的表达,从而在调节Th1/Th2细胞反应中起重要作用,参与到炎症级联反应中；另外,IL-12是诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL)免疫应答的最佳细胞因子,启动细胞介导的免疫反应,可杀伤很多组织和细胞,包括促进粥样斑块的破裂[18-21]。国内外相继有文献发现ACS患者外周血IL-12水平升高,并且可能与其疾病严重程度有关。然而,ACS患者病变局部IL-12水平如何变化,以及其与患者短期预后的相关性研究还非常少。

本文通过检测93例ACS和25例对照组患者静脉窦血浆IL-12水平,发现ACS患者IL-12水平明显高于对照组,同国外的文献报道结果相似[22-23],提示IL-12可能在ACS患者粥样斑块局部炎症发挥一定作用。进一步对ACS患者进行30 d随访,发现这组患者主要心血管不良事件发生率总共约29%,其中1/3患者需再次血运重建如支架植入以及约1/3患者出现顽固性心绞痛。进一步的Logistic多元回归分析发现:IL-12水平、年龄、CRP、LVEF是ACS患者短期内发生不良心血管事件的独立危险因素。局部血浆IL-12水平每升高10 ng/L,ACS患者发生不良心血管事件概率增加约50%（P=0.031)。本次研究发现冠状窦血浆IL-12在ACS患者中升高,并且是评估ACS患者短期不良预后的独立预测因素,提示IL-12可能通过一系列炎症通路,参与到炎症级联反应过程,从而在ACS发生、发展过程中发挥着重要作用。当然由于本研究入选的ACS及正常对照患者较少,对于IL-12能否作为ACS患者的炎症标志物运用于临床实践,还需更深入的基础研究和更大规模的临床实验。

[1]Zayani Y,Allal-Elasmi M,Jacob MP,et al.Peripheral blood levels of matrix and inflammatory mediators are elevated in Tunisian patients with acute coronary syndromes[J]. Clin Lab,2013,59（1-2):169-175.

[2]Sim D S,Ahn Y.Novel inflammatory biomarkers in acute coronary syndrome[J].Korean J Intern Med,2013,28（2): 156-158.

[3]O'Donoghue ML.Acute coronary syndromes:targeting inflammation-what has the VISTA-16 trial taught us？[J].Nature Reviews Cardiology,2014,11（3):130-132.

[4]Stephen K,Pei G,Freitag DF,et al.Inflammatory cytokinesand risk of coronary heart disease:new prospective study and updated meta-analysis[J].European Heart Journal, 2014,35（9):578-589.

[5]王小茜,邢陈,黎燕,等.IL-12家族在自身免疫性疾病中的免疫调节作用[J].军事医学,2015,29（8):637-640.

[6]Yamashita H,Shimada K,Seki E,et al.Concentrations of interleukins,interferon,and C-reactive protein in stable and unstable angina pectoris[J].Am J Cardiol,2003,91（2): 133-136.

[7]Baidya SG,Zeng QT,Wang X,et al.T helper cell related interleukins and the angiographic morphology in unstable angina[J].Cytokine,2005,30（5):303-310.

[8]赵汉军,颜红兵,赵勇.冠状动脉粥样斑块局部取样和冠状窦取血在急性冠状动脉综合征研究中的价值[J].中国介入心脏病学杂志,2008,16（6):349-352.

[9]Anderson JL,Adams CD,Antman EM,et al.ACC/AHA 2007 guidelines for the management of patients with unstable angina/non ST-elevation myocardial infarction:a report of the american college of cardiology/american heart association task force on practice guidelines（writing committee to revise the 2002 guidelines for the management of patients with unstable angina/non st-elevation myocardial infarction):developed in collaboration with the american college of emergency physicians,the society for cardiovascular angiography and interventions,and the society of thoracic surgeons:endorsed by the american association of cardiovascular and pulmonary rehabilitation and the society for academic emergency medicine[J].Circulation,2007,116（7):e148-e304.

[10]董红梅,黄岚,晋军,等.冠心病患者局部ox-LDL与吸烟及冠脉病变的关系及意义[J].中国病理生理杂志,2010, 17（A10):1954-1955.

[11]Ernst G.Cardiology[M].London:Springer London,2014: 157-206.

[12]Al Shahi H,Shimada K,Miyauchi K,et al.Elevated Circulating levels of inflammatory markers in patients with acute coronary syndrome[J].International Journal of Vascular Medicine,2015,2015:1-8.

[13]Moro-García MA,Iglesias FL,Avanzas P,et al.Disease complexity in acute coronary syndrome is related to the patient's immunological status[J].International Journal of Cardiology,2015,189:115-123.

[14]Pashun RA,Frishman WH.Therapeutic Role of Innovative anti-inflammatory medications in the prevention of acute coronary syndrome[J].Cardiology in Review,2015,23（5):303-314

[15]Martínez GJ,Robertson S,Barraclough J,et al.Colchicine acutelysuppresseslocal cardiacproductionofinflammatory cytokines in patients with an acute coronary syndrome[J]. Journal of the American Heart Association,2015,4（8): 117-134

[16]颜红兵,李文铮,赵汉军,等.白细胞介素-1β和10的全身水平与冠状动脉粥样硬化病变局部水平的关系及其临床意义[J].中华心血管病杂志,2011,39（2):142-146.

[17]Dieckman T,Zwiers A,Kraal G,et al.Interleukin 12[M]. Switzerland:Springer Basel,2014:324-387

[18]Hauer A D,Uyttenhove C,de Vos P,et al.Blockade of interleukin-12 function by protein vaccination attenuates atherosclerosis[J].Circulation,2005,112（7):1054-1062. [19]ZhangX,NiessnerA,NakajimaT,etal.Interleukin12 induces T-cell recruitment into the atherosclerotic plaque[J]. Circ Res,2006,98（4):524-531.

[20]Fang L,Moore XL,Dart AM,et al.Systemic inflammatory response following acute myocardial infarction[J].J Geriatr Cardiol,2015,12（3):305-312.

[21]Piers D,Tipping P G.The role of interleukin-4 and interleukin-12 in the progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice[J].American Journal of Pathology,2003,163（3):1117-1125.

[22]Cirillo P,Cimmino G,D'Aiuto E,et al.Local cytokine production in patients with acute coronary syndromes:a look into the eye of the perfect（cytokine)storm[J].Int J Cardiol,2014,176（1):227-229.

[23]于辉月,叶龙英,吴自强,等.2型糖尿病合并急性冠状动脉综合征hs-CRP、IL-6和HbA1c的变化及相关性[J].疑难病杂志,2015,14（3):227-229.

Local interleukin-12 level and its effect on prognosis of short-term ad鄄verse cardiovascular outcome in patients with acute coronary syndrome

ZHOU Xuanmin1WANG Liqin1▲LIU Meixun1DANG Shuyi2
1.Department of Interventional Radiology,Taihe Hospital Affiliated to Hubei Medical College,Hubei Province,Shiyan 442000,China;2.Department of Cardiology,Taihe Hospital Affiliated to Hubei Medical College,Hubei Province, Shiyan442000,China

Objective To investigate local interleukin-12 level and its effect on prognosis of short-term adverse cardiovascular outcome in patients with acute coronary syndrome(ACS).Methods From July 2014 to April 2015,in Taihe Hospital Affiliated to Hubei Medical College,93 ACS patients were selected as observation group,at same time,25 chest pain patients without coronary artery stenosis confirmed by coronary arteriography were selected as control group. Local IL-12 level in coronary sinus were detected by ELISA,clinical characteristics and major adverse cardiovascular events(MACEs)happened in ACS patients during their hospitalization and 30 days of follow-up were collected.Logistic regression model was used to analysis the risk factors for MACES.Results Compared with control group,local IL-12 level was significantly higher that in patients with ACS,the difference was statistically significant(P＜0.01).Logistic regression analysis showed that IL-12 level,age,CRP level and left ventricular ejection fraction(LVEF)were independent risk factors which may predict the MACEs of ACS patients in a short time(P＜0.05).Local IL-12 level increase per 10 ng/L,the incidence of MACEs happened in ACS patients increase about 50%.Conclusion Local IL-12 level is significantly higher in ACS patients and it can be one of independent risk factors to predict the short-term MACEs of these patients.

Acute coronary syndrome;Interleukin-12;Coronary sinus;Prognosis

R541.4

A

1673-7210(2016)06(b)-0050-04

湖北省自然科学基金计划项目（2011CDC049)；湖北省十堰市科学技术研究与开发项目（14Y17)。

周选民（1969.4-),男,硕士,副主任技师,副教授；研究方向:介入放射技术在冠心病中的应用。

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（2016-03-15本文编辑:苏畅)