华泽兰中的苷类成分研究

尉小琴 贺海波 邹 坤 汪鋆植 刘呈雄 汪 蕾

(天然产物研究与利用湖北省重点实验室，三峡大学 生物与制药学院， 湖北 宜昌 443002)



华泽兰中的苷类成分研究

尉小琴 贺海波 邹 坤 汪鋆植 刘呈雄 汪 蕾

(天然产物研究与利用湖北省重点实验室，三峡大学 生物与制药学院， 湖北 宜昌 443002)

研究了菊科泽兰属植物华泽兰中的苷类成分．通过正相硅胶、反相硅胶柱色谱、薄层色谱和高效液相色谱等方法，从该植物乙酸乙酯部位分离纯化得到4个苷类化合物，利用MS和NMR等波谱学方法2，结合文献数据，鉴定化合物结构分别为icariside C4(1)、longifloroside A(2)、cis-melilotoside 3'-methyl ester(3)、2-hydroxy-5-methoxyphenyl-1-O-glucoside(4)．化合物1-4均为首次从华泽兰中分离得到．

华泽兰； 苷类； 分离； 结构鉴定

华泽兰系菊科泽兰属植物，又名大金刀，六月雪等，在我国除新疆地区外均有分布[1]．华泽兰是我国土家族药物之一，传统药理研究表明，华泽兰具有解热、镇痛、消炎等功效．其干燥根在广东地区多被用来治疗白喉、咽炎等疾病[2]．华泽兰化学成分以萜类及黄酮为主，含有少量的生物碱及苯丙酯类化合物[3]，该植物中的苷类成分鲜少有文献报道．

实验从华泽兰乙酸乙酯部位分离得到4个苷类化合物，分别鉴定为icariside C4(1)、longifloroside A(2)、cis-melilotoside 3'-methyl ester(3)、2-hydroxy-5-methoxyphenyl-1-O-glucoside(4)(化合物结构如图1所示)．以上化合物均为首次从华泽兰中分离得到．

图1 化合物1-4结构

1 仪器和试剂

AmozonSL+ 1200液相色谱-双重漏斗传输离子阱质谱仪(德国布鲁克·道尔顿公司)；Bruker AV 400核磁共振波谱仪(瑞士布鲁克公司)； Dionex Ultimate 3000型高效液相色谱仪(美国戴安公司)；Venusil XBP C18色谱柱(10 μm，250×10 mm半制备型；5 μm，250×4.6 mm分析型)；低温冷冻干燥机(美国Labconco公司)；WZZ-2S数字式自动旋光仪(上海精科公司)；正相色谱硅胶(烟台化学工业研究所)；反相色谱硅胶(日本YMC公司)；Sephadex LH-20(美国Pharmacia公司)；高效液相用甲醇、乙腈均为色谱纯，水为三蒸水，其它试剂均为分析纯．

实验所用华泽兰植物样本采自湖北省长阳土家族自治县乐园，经三峡大学生物与制药学院王玉兵教授鉴定为EupatoriumchinenseL.．植物标本现保存于三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室．

2 提取与分离

华泽兰干燥全草4.4 kg，粉碎，用20 L 95%乙醇浸泡过夜，采用加热回流方式提取3次，每次2 h，合并提取液减压浓缩至无醇味，利用水悬浮混匀后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，减压浓缩得到石油醚部位浸膏50 g，乙酸乙酯萃取部位浸膏67 g，正丁醇部位浸膏35 g．

取上述乙酸乙酯部位浸膏67 g，经正相硅胶柱层析色谱，以氯仿-甲醇(10%氯仿/甲醇→100%甲醇)梯度洗脱，经薄层色谱分析合并后，得到160个馏分Fr. 1-160．其中Fr. 60-100经薄层色谱分析合并后，经反相硅胶柱层析色谱，以甲醇-水(10%甲醇→100%水)梯度洗脱，馏分Frr.70-80采用中压制备液相(42%乙腈/水，30 min，3.0 mL/min，203 nm)进行分离纯化，得到化合物1(78 mg)和2(52 mg)．Frr. 100-120经过中压制备液相(42%乙腈/水，30 min，3.0 mL/min，203 nm)进行分离纯化，得到化合物3(45 mg)和4(49 mg)．

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末状物质．EI-MS m/z：418.2[M]+；C21H38O8．1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：5.96(1H，dd，J=17.4，10.8 Hz，H-6)，5.92(1H，d，J=10.8 Hz，H-1)，5.24(1H，d，J=1.5 Hz，H-2)，5.22(1H，dd，J=10.8，1.6 Hz，H-1)，4.47(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.91(1H，d，J=2.5 Hz，H-6′)，3.9(1H，d，J=2.5 Hz，H-10)，3.88(1H，d，J=2.4 Hz，H-6′)，3.77(1H，d，J=4.9 Hz，H-4′)，3.76(1H，d，J=2.5 Hz，H-2′)，3.75(1H，d，J=4.9 Hz，H-3′)，3.37(1H，m，H-5′)，3.27(1H，m，H-4′)，2.27(1H，m，H-8)，2.19(1H，m，H-8)，2.19(1H，m，H-5)，2.08(1H，m，H-5)，2.05(1H，m，H-4)，1.92(1H，s，H-4)，1.62(3H，s，14-CH3)，1.57(1H，s，H-9)，1.52(1H，m，H-9)，1.28(3H，s，15-CH3)，1.20(3H，s，12-CH3)，1.16(3H，s，13-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：110.9(C-1)，145.4(C-2)，73.8(C-3)，42.5(C-4)，22.7(C-5)，125.2(C-6)，135.0(C-7)，29.8(C-8)，36.0(C-9)，89.3(C-10)，72.9(C-11)，22.9(C-12)，25.4(C-13)，15.1(C-14)，26.5(C-15)，105.4(C-1′)，75.0(C-2′)，77.4(C-3′)，70.5(C-4′)，76.9(C-5′)，61.7(C-6′)．以上数据与文献[4]报道对照基本一致，故鉴定化合物为icariside C4．

化合物2：白色粉末状物质．EI-MS m/z：534.2[M]+；C27H34O11．1H-NMR(400 MHz，CD3OD) δ：7.01(1H，s，H-6)，6.97(1H，d，J=2.5 Hz，H-2)，6.85(1H，d，J=1.5 Hz，H-2′)，6.83(1H，d，J=7.5 Hz，H-5)，6.77(1H，d，J=1.5 Hz，H-6′)，6.65(1H，d，J=15.9 Hz，H-1′)，6.27(1H，dt，J=15.8，6.3 Hz，H-8′)，5.60(1H，d，J=6 .1 Hz，H-7)，4.86(1H，d，J=7.9 Hz，H-1″)，4.19(1H，dd，J=5.0，1.5 Hz，H-2)，3.92(3H，s，3-OCH3)，3.85(3H，s，4-OCH3)，3.77(3H，s，3′-OCH3)，3.71(1H，m，H-8)，3.52(2H，dd，H-9)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：131.5(C-1)，109.8(C-2)，148.4(C-3)，149.7(C-4)，112.0(C-5)，118.5(C-6)，88.1(C-7)，54.2(C-8)，63.9(C-9)，129.3(C-1′)，111.3(C-2′)，144.5(C-3′)，149.4(C-4′)，134.9(C-5′)，115.7(C-6′)，133.2(C-7′)，123.3(C-8′)，74.2(C-9′)，55.5(3-OCH3)，55.8(4-OCH3)，55.5(3′-OCH3)，102.2(C-1″)，70.8(C-2″)，77.2(C-3″)，69.9(C-4″)，77.0(C-5″)，61.9(C-6″)．以上数据与文献[5]报道对照基本一致，故鉴定化合物为longifloroside A．

化合物3：白色粉末状物质．EI-MS m/z：340.1[M]+；C16H20O8．1H-NMR(400 MHz，CD3OD) δ：7.52(1H，dd，J=7.7，1.4 Hz， H-7)，7.37(1H，t，J=7.2 Hz，H-6)，7.32(1H，m，H-4)，7.22(1H，d，J=7.6 Hz，H-3)，7.01(1H，dd，J=11.3，3.8 Hz，H-5)，6.00(1H，d，J=12.5 Hz，H-8)，4.95(1H，dd，J=8.7，4.8 Hz，H-1′)，3.34(3H，dt，J=3.3，1.6 Hz，H-10)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：121.7(C-1)，155.7(C-2)，115.4(C-3)，130.5(C-4)，125.7(C-5)，128.9(C-6)，139.4(C-7)，119.4(C-8)，167.8(C-9)，50.8(C-10)，101.7(C-1′)，73.9(C-2′)，77.1(C-3′)，70.3(C-4′)，77.2(C-5′)，61.5(C-6′)．.以上数据与文献[6]报道对照基本一致，故鉴定化合物为cis-melilotoside 3'-methyl ester ．

化合物4：白色粉末状物质．EI-MS m/z：302.1[M]+；C13H18O8．1H-NMR(400 MHz，CD3OD) δ：7.64(1H，d，J=3.1 Hz， H-2)，7.34(1H，dd，J=9.0，3.1 Hz，H-6)，6.92(1H，d，J=9.1 Hz，H-5)，4.97(1H，d，J=7.4 Hz，H-1′)，3.7(6H，m，H-Glc)，3.15(3H，s，H-OCH3)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：118.1(C-2)，150.5(C-3)，112.5(C-4)，117.7(C-5)，126.3(C-6)，102.7(C-1′)，73.9(C-2′)，77.0(C-3′)，70.4(C-4′)，77.3(C-5′)，61.6(C-6′)．以上数据与文献[7]报道对照基本一致，故鉴定化合物为2-hydroxy-5-methoxyphenyl-1-O-glucoside．

4 结 论

华泽兰系菊科泽兰属植物，该属植物化学成分种类较多，且以萜类和黄酮类化合物为主．本实验中分离得到的4个苷类成分，均为首次从华泽兰中分离得到的．为华泽兰化学成分的研究奠定了一定的基础．

[1] 佐藤正已．有用植物分类学[M]．东京：东京书肆株式会社，1957：406．

[2] 广州部队后勤部卫生部．常用中草药手册[M]．北京：人民卫生出版社, 1969：128．

[3] Liu P Y, Dan L, Li W H, et al．Chemical Constituents of Plants from the Genus Eupatorium(1904-2014)[J]． Chemistry & Biodiversity, 2015, 12(10)：1481-1515．

[4] Ono M, Takamura C, Sugita F, et al．Two New Steroid Glycosides and a New Sesquiterpenoid Glycoside from the Underground Parts of Trillium kamtschaticum[J]． Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 2007, 55(4)：551-6．

[5] Wang C Z, Jia Z J．Neolignan Glycosides from Pedicularis Longiflora[J]． Planta Medica, 1997, 63(3)：241-244．

[6] Yang L, Nakamura N, Hattori M, et al．High-performance Liquid Chromatography-diode Array Detection/Electrospray Ionization Mass Spectrometry for the Simultaneous Analysis of cis-, Trans- and Dihydro-2-glucosyloxycinnamic Acid Derivatives from Dendrobium Medicinal Plants[J]． Rapid Communications in Mass Spectrometry, 2007, 21(12)：1833-40．

[7] El-Ghazooly M G, El-Lakany A M, Abou-Shoer M I, et al．Chemical Constituents of Helichrysum Conglobatum Growing in Egypt[J]． Natural Product Sciences, 2003, 9(4)：213-219．

[责任编辑 周文凯]

Glycosides fromEupatoriumChinenseL.

Yu Xiaoqin He Haibo Zou Kun Wang Junzhi Liu Chengxiong Wang Lei

(Hubei Key Laboratory of Natural Products Research & Development, College of Biological & Pharmaceutical Sciences, China Three Gorges Univ., Yichang 443002, China)

To study the glycosides fromeupatoriumchinenseL., normal phase silica gel column chromatography, thin-layer chromatography, and preparative HPLC are used for seperation and purification. Their structures are determined by various spectral data. Four glycosides,namely icariside C4 (1), longifloroside A (2), cis-melilotoside 3'-methyl ester (3), 2-hydroxy-5-methoxyphenyl-1-O-glucoside (4), are isolated from ethyl acetate extract ofeupatoriumchinenseL. for the first time.

eupatoriumchinenseL.; glycosides; seperation; structure identification

10.13393/j.cnki.issn.1672-948X.2016.05.021

2016-06-01

国家自然科学基金项目(21272136)

尉小琴(1992-)，女，硕士研究生，研究方向为药理学．E-mail：262480010@qq.com

R914

A

1672-948X(2016)05-0107-03