Vitros5600测定血浆肌钙蛋白I ES稳定性及假阳性的分析

2016-11-18宋晓冬徐建华

中国医药指南 2016年29期

关键词：肌钙蛋白重复性试剂

左　军　宋晓冬　徐建华

（吉林省长春市一汽总医院（吉林大学第四医院），吉林长春 130011）

Vitros5600测定血浆肌钙蛋白I ES稳定性及假阳性的分析

左军宋晓冬徐建华

（吉林省长春市一汽总医院（吉林大学第四医院），吉林长春 130011）

目的探讨Vitros5600测定肌钙蛋白I（CTNI）中存在的假阳性及不稳定因素。由于心肌肌钙蛋白特异地分布于心肌组织，作为心肌损伤的高敏感和特异性标志物，心肌肌钙蛋白对于检测急性冠状动脉综合征患者心肌缺血及危险分级具有重要意义。目前测定肌钙蛋白的方法很多如电化学发光免疫检测法（ECLIA）、酶联荧光分析法等。方法 Vitros5600测定血浆肌钙蛋白I定量检测已被广泛应用，它采用的是intelliccheck技术（化学发光法）应用特异性免疫测定单克隆抗体（-CTnI）。结果其敏感度很高，其线性范围在0.003～66.7 μg/L其测定结果的稳定性显得尤为重要。结论本文主要探讨关于使用Vitros5600测定血浆肌钙蛋白IES时，测定中发现的不稳定及其假阳性的一些问题，以示在报告结果时应该加以注意，防止误报。

CTnI；不稳定性；假阳性

1　材料与方法

1.1检测仪器：Vitros5600生化免疫分析仪。

1.2试剂：vitros提供测定试剂及定标液，质控品。

1.3测定方法：在经过仪器调试定标完成之后，进行质控测定并且通过后进行样本检测［1-2］。采集患者新鲜无溶血、乳糜、黄疸的全血4 mL，离心。用血清进行直接测定。

2　结　果

在我院使用5600这两年期间检测患者CTnI我们选取今年5月份不断出现重复性差，假阳性的一共20例样本进行比较分析，研究发现有些样本首次检测结果偏高，有的甚至达到危急值，而当再次复检后结果正常了或者略高，与第一次检测结果相差甚远，结果见表1。

3　讨　论

3.1从表1中可以看出在使用5600一段时间后检测患者血清CTnI某一阶段频繁出现重复性差，稳定性差以及假阳性，而质控和批量检测对比竟然没有明显变化。其中，在今年5～6月份检测的1200分样本中假性增高总数为50例占4.12%最为明显。而真正有心肌梗死问题的和其他心脏疾病方面引起的增高占35%。其余为正常结果，经过二次复检得以证实。为什么会出现首次检测结果与再次复检存在较大差异呢。对此我们考虑是不是由于试剂批号不同所引起的差异，试剂对血清样本与质控品之间存在差异，然而，我们对此也用正常患者血清进行了比对，也没有发现很大的差异。连续进行样本的重复性检测结果显示稳定。还是记过用不同批号的试剂进行比对也没有发现明显差异，之后我们考虑是不是由于仪器设备本身的因素比如光源，检测模块，吸样针，吸样量等多方面因素的查找，更换也没有发现具体引起这种现象的主要因素。

3.2从标本采集开始我们仔细研究是不是由于采血量不够和离心力及离心时间不够或者由于纤维蛋白凝块或者有极微小的凝块所致，我们对每一分样本离心后采用手工方式彻底分离血清以达到减少微凝方面的最低程度，此外同样选取无溶血，无乳糜，无黄疸的样本进行测定，同时也考虑到药物方面的影响，以及临床护士采集标本时的一些影响因素，经过分离血清用测试小杯将血清分离进行测试，但还是或多或少，不定期的出现两次测定结果不符及假阳性的现象。

3.3之后我们觉得过多的分离步骤也许会有影响结果的重复性及稳定性，我们采用增加标本采集量每份标本采血量不少于4 mL，离心时间不少于8 min离心速度不低于4000转/分，待血清完全离好后直接上机测定经过这些尝试后虽然出现假阳性频率略低但还是有。

3.4经过和厂家技术人员共同分析以及从他们那儿得到的经验我们考虑到室内环境的尘埃是不是也会影响到结果的稳定性，对此我们经常清洁空调，并且在机房内加装空气净化器以减少对检测时的影响。

综合上诉各种原因，我们认为造成这种重复性差，假阳性以及不稳定的结果是多方面的因素所致。为了保证结果的准确性和可信度必须严格从标本采集到实验室测定操作规程对于这种敏感度高的检测项目必须提高注意结果的监测，一方面在平时要做好仪器设备的保养维护，对于试剂的不同批号应做对比，坚持做好室内质控及室间质评。我们认为一个可靠的检验结果，不仅仅是一个方面，而是多方面多种维护措施的共同协调。

［1］郑佐娅，曹丹如，陈悦，等.检测肌红蛋白的半定量金免疫层析法的研究［J］.检验医学，2007，22（6）:645-647.

［2］ Vitros试剂使用说明书［S］.