POCT凝血分析仪电化学法检测的临床应用

杨志华，罗 娜，王长奇，程 利，耿娜，陈燕萍

（1、湘雅萍矿总医院，江西萍乡337000；2、萍乡汉和医院，江西萍乡337000）

POCT凝血分析仪电化学法检测的临床应用

杨志华1，罗 娜1，王长奇1，程 利1，耿娜1，陈燕萍2

（1、湘雅萍矿总医院，江西萍乡337000；2、萍乡汉和医院，江西萍乡337000）

目的评价POCT qLabs凝血仪电化学法检测凝血酶原时间（PT）、国际标准化比值（INR）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、的准确性及在临床中的应用。方法应用SYSMEX CA8000全自动凝血分析仪和POCT qLabs凝血仪分别检测30例患者的PT、INR、APTT。比较两种类型凝血仪检测PT、INR、APTT的相关性及偏倚。评价POCT qLabs凝血仪电化学法检测PT、INR、APTT的性能。结果POCT qLabs凝血仪与SYSMEX CA8000全自动凝血分析仪检测患者的PT（R2=0.998，P＞0.05）、INR（R2=0.997，P＞0.05）、APTT（R2=0.9342，P＞0.05）存在良好的相关性。两种方法检测患者的PT、INR结果比对均合格，APTT比对不合格。POCT qLabs凝血仪的精密度CV值小于SYSMEX CA8000全自动凝血分析仪。结论POCT qLabs凝血仪电化学法检测PT、INR，符合临床实验室的质量要求，可以替代全自动凝血仪缩短样本周转时间（TAT）。检测APTT结果有差异，需要确定自己的参考范围来进行临床判读。

POCT；凝血分析仪；电化学法

POCT血凝仪具有体积小、携带方便、容易使用和结果快速等优点，是对实验室血检测测方法的有利补充。为了解POCT凝血分析仪测定凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）、国际标准化比值（INR）检测结果的准确度和不精密度［1］，对我科使用的POCT qLabs凝血仪测定结果进行比对试验，参考系统为Sysmex Ca8000凝血分析仪，目前未见我省关于POCT凝血分析仪电化学检测的临床应用情况报道，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 病例资料异常结果选择口服抗凝药治疗和医院行瓣膜置换术后的患者15例，正常结果术前检查凝血功能的患者15例。

1.2 仪器与试剂POCT qLabs凝血仪及试剂：Q-1型电化学检测仪，生产企业为深圳微点生物技术有限公司，生产批号201507001；配套试剂为凝血酶原时间—活化部分凝血酶原时间二联卡，批号：471133201；质控品：qLabs凝血酶原时间-活化部分凝血活化酶时间（Coag Panel2）质控液，批号：3052H0301 SYSMEX CA8000全自动凝血分析仪，试剂均由西门子公司提供分别为PT（批号：546853）、APTT试剂ACTIN（批号557159）、CaCl2（批号539747）。PT试剂的ISI值为1.1，质控品：朗道凝血质控品批号为174CG、178CG。

1.3 标本标本采集使用109mmol/L枸橼酸钠抗凝，抗凝剂与静脉血的比例为1：9，采静脉血1.8ml，立即混匀送检，在1h内离心（3000r/min 10min）分离血浆测定。在采静脉血后，征得患者的同意用一次性采血针采集手指末梢血，立即进行POCT qLabs电化学PT、APTT测定。

1.4 方法与原理⑴POCT qLabs电化学检测法：在检测卡上滴入全血样本，血液样本逐步凝固，同时其电导率会随之变化，并导致电流值发生改变，仪器对这一过程进行测试，并计算出样本的凝血酶原时间和活化部分凝血酶原时间，凝血酶原时间通过公式转化为凝血功能单位INR。⑵患者静脉抗凝血采用SYSMEX CA8000全自动凝血分析仪检测PT/INR、APTT，操作严格按实验室的标准操作文件（SOP）。

1.5 POCT凝血仪检测不精密度使用qLabs凝血仪检测深圳微点生物技术有限公司提供的专用质控品20次，计算批间CV值。

1.6 相关性分析及比对试验按美国临床和实验室标准协会（CLSI）方法对比的评价方案，对两种仪器检测的结果进行相关性分析。随机挑选患者的30对结果，进行比对试验。按《医疗机构临床实验室管理办法》要求，确定以参加卫生部临床检验中心室间质评活动，结果均合格的SYSMEX CA8000全自动凝血分析仪作为参比仪器；POCT qLabs凝血仪作为被比对仪器。参考美国CLIA'88能力验证（PT）分析质量要求及卫生部临床检验中心凝血试验室间质评活动的评价标准进行比较。偏倚小于1/2 PT时，比对的结果合格，PT、APTT、INR的能力验证（PT）分析质量要求：靶值±15%、±20%、±15%。

1.7 统计学分析采用office excel 2003软件，对检测结果进行比对，并绘制相应的散点图，作相关性分析和Bland-Altman分析。

2 结果

2.1 三类凝血分析仪对比见表1。qLabsPOCT凝血仪的检测不精密度特定凝血质控品连续测定20次PT/INR、APTT的结果见表2。

表1 二类凝血分析仪对比

2.2 两种仪器检测INR的相关性全自动凝血分析仪、qLabs POCT凝血仪分别测定30例静脉血和30例末梢血标本的PT、INR、APTT结果相关性好，结果差异无统计学意义（P＞0.05）。可接受范围根据卫生部和江西省临检中心凝血常规室间质评回报结果的可接受范围制定，除了APTT少数高值结果超出范围，PT、INR结果均在范围内。见图1。

2.3 用差值进行Bland-Altman分析［2，3］30例配对测定PT、INR、APTT结果差值均数和差值标准差分别做Bland-Altman图，如图2所示。

表2 PT、INR、APTT不精密度测定结果

图1 PT、INR、APTT线性相关性分析

图2 PT、INR、APTT Bland-Altman分析

从图2中可以看出，PT、INR分别有3.3%（1/ 30）、6.7%（2/30）的点在95%一致性界限以外，两种仪器PT测量结果的均值在39.4s相差2.8s是最大差值，在临床上可以接受；INR测量结果的均值在1.1的差值为0.17、均值在4.2的差值-0.29，这两种相差结果在临床上可以接受，因此这两种仪器测量PT、INR的结果具有较好的一致性，可以互相代替使用；APTT有6.7%（2/30）的点在95%一致性界限以外，并且从图上可以看出两个种方法测量的结果变异不相等，变异随着测量值的变大而变大，在30～40之间的差值较小，临床上可以接受，但测量均值在45以上的差值开始增大，在测量均值在54.9的差值为18.3，这种差值临床上是不可接受的。从比对结果（见图3）中也可看出两两种仪器检测PT值的偏倚100%和INR值的偏倚93.3%（28/30）的结果在可接受范围，比对结果均合格。而检测APTT值比对结果不合格，有23.3%（7/30）的点超出可接受范围，高值结果偏倚达到40%，qLabs仪器检测结果比SysmexCA8000的结果要偏高。PT、APTT偏倚小于7.5%时判断为合格，偏倚大于7.5%时判断为不合格。INR偏倚小于10%时判断为合格，偏倚大于10%时判断为不合格。

3 讨论

图3 PT、INR、APTT比对结果分析

POCT凝血分析仪其优点是一滴指血即可快速完成测试，大大简化了抗凝治疗的检测流程，为门诊、急诊快速检测以及患者家庭监测凝血功能提供了便利［4］。我国每年因脑卒中死亡的人数已超过肿瘤和心血管疾病，成为第一位致死病因［5］，心房颤动、颈动脉粥样硬化等心血管疾病是脑卒中的重要危险因素，需要长期口服华法林进行抗凝治疗，并定期监测PT-INR值以预防脑卒中［6］。qLabs凝血仪检测结果稳定、准确可以满足口服抗凝药自我监测的要求，这类患者最常见于老年人，去医院检测不方便，POCT凝血仪提供准确、快捷、方便的检测能满足这些患者需求，尤其对于交通不便和不易多次静脉采血的患者，具有更明显的优势。由于肝素对内源性凝血过程具有显著的抗凝作用，APTT测试还可以用来监测肝素对患者血液的抗凝治疗效果［7］。在急性心肌梗塞、缺血性脑卒中的溶栓治疗中，需要根据患者凝血功能确定是否能够进行溶栓治疗及有无禁忌症等，快速凝血检测平台能为患者的溶栓抢救赢得时间。

从本文的比对结果看POCT凝血分析仪检测PT/INR、APTT的精密度较好，小于黄珣钡等［8］的研究中INR的CV值4.5%；凝血分析仪PT/INR与全自动分析仪结果具有很好的相关性，比对结果在可接受范围内，可以替代全自动凝血分析仪检测。APTT的检测结果正常值范围内与全自动凝血分析仪的结果具有可比性，但是高值的结果偏高较大。由于本文异常病例数少，可能在统计上存在一定差异，POCT仪器检测的标本为采集新鲜的全血需要即刻做完，APTT检测高值的偏差是否与末梢血采集的影响有关还需要进一步探讨。

但是POCT凝血仪广泛应用于临床测定还存在一些问题［9］。凝血仪检测的样本需要未抗凝的新鲜血，未抗凝全血易凝固不能适合临床大批量标本检测，POCT凝血仪使用者的培训并确保获得持续的资格认证后，POCT的检测结果与中心实验室的结果达到很好的一致性［10］。因此，需要制作标准的SOP及对使用者进行培训和使用过程中的质量管理，才能确保结果的准确、可靠。每张检测卡都有内部质控，每一次进行测试时，凝血仪会自动检测质控.这种方式可以有效的防止使用过期或者变质的检测卡导致获得不准确的结果。外部质控可以与医院检测定期进行对比，还可以使用电化学检测系统专用的质控液分别配合测试卡用于验证系统的性能。加强设备与试剂室内质控，保证质量就是要保证和满足疾病的临床诊断、监测、筛查、预防的需要。

通过与全自动凝血分析仪检测结果对比，POCT凝血分析仪电化学法检测具有较好的精密度和准确度，POCT电化学法检测PT、INR的结果与全自动凝血分析仪无差异完全可以替代，由于方法原理的差异APTT检测需要通过确定其医学决定水平和参考范围可以应用于临床。合理的应用POCT凝血分析仪，应用于急诊缩短样本周转时间（TAT），满足临床医生对这些指标快速准确报告的迫切需求可以使患者减少看病等待时间，提高对医院医疗服务的满意度。

［1］Okorodudu AO．Optimizing Accuracy and Ptecision for Point-of-Care Tests［J］.Point of Care，2012，11：26-29．

［2］陈卉．Bland-Altman分析在临床测量方法一致性评价中的应用［J］.中国卫生统计，2007，24（3）：308-309．

［3］王杨，陈涛，徐涛，等.Bland-Altman分析结果散点分布趋势与测量方法变异程度间的关联度分析［J］.中华疾病控制杂志，2012，16（6）：535-536.

［4］中华医学会心血管病分会.华法林抗凝治疗的中国专家共识［J］.中华内科杂志，2013，52（1）：76-82.

［5］陈竺.全国第三次死因回顾抽样调查报告［M］.北京：中国协和医科大学出版社，2008：10-17.

［6］国家卫生计生委脑卒中防治工程委员会.中国脑卒中一级预防指导规范［S］.2015.

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R446.11+1，R554

A

1674-1129（2016）05-0635-05

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.033

2016-04-28；

2016-08-23）

王长奇