乳化异氟醚及异氟醚对犬血清中C反应蛋白及总补体含量的影响

2016-11-11胡学远张帅宋曼玉罗欣然张靓玉范宏刚张建涛刘涛

中国兽医杂志 2016年8期

关键词：异氟醚补体乳化

胡学远，张帅，宋曼玉，罗欣然，张靓玉，范宏刚，张建涛，刘涛

（东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030）

乳化异氟醚及异氟醚对犬血清中C反应蛋白及总补体含量的影响

胡学远，张帅，宋曼玉，罗欣然，张靓玉，范宏刚，张建涛，刘涛

（东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030）

为了研究乳化异氟醚及异氟醚对犬血清中C反应蛋白（CRP）及总补体（CH50）含量的影响，将40只犬随机均分为乳化异氟醚复合制剂麻醉组（RYM组）、异氟醚麻醉组（YM组）、乳化异氟醚复合制剂麻醉+手术（RYMS）及异氟醚麻醉+手术（YMS）四组。RYM、YM两组只进行麻醉不进行手术，RYMS、YMS两组在实施麻醉的同时分别进行肠管吻合术，在麻醉前（T0）、手术完成即刻（T1，而RYM和YM组在麻醉后35～40 min进行采样）、术后24 h（T2）、术后48 h（T3）、术后72 h（T4）等时间点，采血，测定血清中CRP及CH50含量。结果表明，乳化异氟醚复合麻醉及麻醉下手术对犬血清中CRP、CH50含量的影响，与异氟醚相似，两者无明显的差异。

乳化异氟醚；异氟醚；麻醉；CRP；CH50

手术创伤对动物机体产生不同程度的应激反应及对免疫系统的影响是兽医外科学领域关注的热点。任何手术操作都可产生不同程度的应激反应和免疫功能的抑制，术中麻醉深度不适宜，不但会影响到手术进程，还会增加手术并发症和意外发生的风险，良好的麻醉可有效地减轻术中手术伤害，降低围术期应激反应，且对机体的免疫功能影响短暂、轻微。课题组前期通过组方试验将乳化异氟醚、芬太尼和利多卡因等药物进行复合，研制成乳化异氟醚复合制剂，并对其麻醉效果进行监测［1-2］。本次将研究乳化异氟醚及异氟醚麻醉对经历肠管吻合术犬血清中CRP及CH50含量的影响。

1材料与方法

1.1试验动物试验犬40只，性别不限，体重9.2±1.4 kg，13.4±4.2月龄，购自哈尔滨青喜实验动物养殖场，入动物舍之前进行检疫和体检。

1.2试验药品乳化异氟醚复合制剂（东北农业大学兽医外科教研室研制，批号2015041）；异氟醚（河北九派制药有限公司，批号150610）；丙泊酚（西安力邦制药有限公司，批号20150602）；30%脂肪乳（西安力邦制药有限公司，批号150311）；芬太尼原粉（购自国内某军事研究所），2%利多卡因（上海复星朝晖制药有限公司，批号150221-

2）；犬CRP ELISA试剂盒（北方生物技术研究所，批号20130502）；犬CH50 ELISA试剂盒（上海邦奕生物科技有限公司，批号20150410）。

1.3试验仪器Materx小动物专用呼吸麻醉机（美国Midmark有限公司）；MP30型呼吸循环监护仪（芬兰Philips公司）；Sigama-30K型高速冷冻台式离心机（德国Sigma有限公司）；Poch酶标仪（美国Biotek公司）；GL800型旋涡振荡器（江苏海门麒麟医用仪器厂）；常规手术器械和静脉留置针等。

1.4动物分组及实施麻醉将40只犬随机均分为乳化异氟醚复合制剂麻醉组（RYM组）、异氟醚麻醉组（YM组）、乳化异氟醚复合制剂麻醉+手术（RYMS）及异氟醚麻醉+手术（YMS）4组。RYM和YM组只进行麻醉不进行手术，RYMS和YMS组在实施麻醉的同时分别进行肠管吻合术。犬试验前禁食12 h，禁水6 h。且犬在试验前2 h，左侧前肢臂头静脉安放静脉留置针，并带入手术处置室，由平时饲养人员陪伴，让试验动物熟悉环境。

麻醉：YM组：麻醉前肌肉注射硫酸阿托品注射液（0.02 mg/kg体重），15 min后静脉匀速推注丙泊酚（4.6±1.8 mg/kg体重）进行麻醉诱导，以异氟醚进行维持麻醉。RYM组试验前制备乳化异氟醚制剂［2］，向其内加入芬太尼（0.8 μg/5 mL），利多卡因浓度（2.2 mg/5 mL），混匀研制成乳化异氟醚复合制剂。使用复合制剂对犬实施静脉诱导麻醉，剂量为0.5 mL/kg体重，待犬进入麻醉状态后，采用微量输液泵匀速静脉内输注的方式进行维持麻醉，剂量为5 mL/kg体重·h。

1.5手术模式建立待麻醉确实、良好后，对犬实施肠管吻合术，所有手术均由同一名实验人员（执业兽医师）完成，手术时间为35.8±4.6 min，术后常规消炎、镇痛、外科护理。

1.6术中监测及样品检测在术中监测4组动物体温、呼吸、心率及血压等常规生理指标。在麻醉前（T0）、手术完成即刻（T1，而RYM和YM组在麻醉后35～40 min进行采样）、术后24 h（T2）、术后48 h（T3）、术后72 h（T4）等时间点，臂头静脉采取血液2 mL，制血清，样品保存于-80℃冰箱中，待检。按试剂盒说明书对样品进行前处理，用酶联免疫吸附测定法（ELISA），检测血清中CRP及CH50的含量。

2结果

分别比较RYM与YM及RYMS与YMS组动物体温、呼吸、心率及血压等常规生理指标变化情况。监测结果表明，乳化异氟醚复合制剂麻醉及麻醉下手术过程中犬各项常规生理指标的变化轻微，除呼吸频率和血氧饱和度在5～10 min时与异氟醚吸入麻醉比较有显著差异（P＜0.05）外，其他时间点比较均无显著差异（P＞0.05）。而在5～10 min RYM和RYMS组呼吸频率和血氧饱和度变化幅度在生理耐受范围内，保持在10%～20%之间。

对血清中CRP含量检测结果表明，同列数据比较，RYM和YM组在检测过程中只在T1时间点有显著性差异（P＜0.05）。RYMS和YMS组变化趋势大体相近，均呈现先升高后下降趋势，从T1到检测结束，两组数据与T0比较，差异显著（P＜0.05）。同行数据比较，在T0时间点四组无显著差异（P＞0.05），在T1-T4时间段RYMS与YMS组、RYM与YM组没有显著性差异（P＞0.05），但RYMS和YMS组分别与RYM、YM组比较，有差异显著（P＜0.05）。具体结果见表1。

对血清中CH50含量检测结果表明，同列数据比较，RYM和YM组在检测过程中只在T1时间点有显著性差异（P＜0.05）。RYMS和YMS组变化趋势大体相近，均呈现先降低后恢复的趋势，从T1到T3，两组数据与T0比较，差异显著（P＜0.05），到T4时间点时CH50恢复到麻醉前水平（P＞0.05）。同行数据比较，在T0、T1和T4时间点四组无显著差异（P＞0.05），在T2-T3时间段RYMS与YMS组、RYM与YM组之间没有显著性差异（P＞0.05），但RYMS和YMS组分别与RYM、YM组比较，有差异显著（P＜0.05）。具体结果见表2。

表1四组血清中CRP含量检测结果（n=10，-X±SD，mg/L）

表2四组血清中CH50含量检测结果（n=10，-X±SD，mg/L）

3讨论

本研究在建立手术创伤模型方面选择肠管吻合术，其为腹部外科手术中较为复杂的手术，术中创伤和术后疼痛较为明显，可有效地激发应激反应，引起犬血清中CRP、CH50含量的改变（在本次试验中也得到了验证）。另外，采用该手术也可验证乳化异氟醚复合制剂在小动物软组织手术中的适用性。

体内的CRP属于急性时相反应物质（APR），是一种由肝脏合成的血浆蛋白，在正常状态下其在体内含量较低，当动物机体受到伤害，即便是轻微的损伤也会引发血浆中CRP含量迅速升高。相关文献研究表明，CRP含量与应激反应的程度成正比，是反映麻醉和手术应激反应的有效、可靠指标［3-4］。本次试验结果显示，乳化异氟醚复合麻醉与异氟醚吸入麻醉对CRP含量产生短时间的影响，在麻醉过程中可使其明显升高，在麻醉后24 h，其含量恢复到麻醉前水平。在两种麻醉方式下实施肠管吻合术，均可激发CRP显著升高，其中在术后24 h升至最高，之后逐渐下降，在术后72 h时仍然显著高于麻醉前水平。组间的比较表明两种麻醉方式在同一时间点无明显的差异，且在这两种麻醉保障下进行的手术对CRP含量的影响也相似，无显著性差异。

临床麻醉及手术创伤均可造成动物的免疫功能抑制，多数学者认为这与麻醉及手术伤害引起的应激反应及内分泌系统改变有关。补体是一组存在于人和动物血清中的球蛋白，经过活化后具有生物酶的活性，是免疫反应过程中较为重要的效应因子，在急性炎症、组织损伤及麻醉过程中起着重要作用［5］。相关的研究表明，在临床麻醉、手术创伤及术后疼痛之后补体有被激活的现象，主要表现为产生补体激活产物及血清中补体的含量下降，其含量降低幅度与手术类型、创伤的程度成正比［6］。本次试验结果显示，乳化异氟醚复合麻醉与异氟醚吸入麻醉对CH50含量影响较为短暂且较为相似，在两者的麻醉过程中可使CH50含量显著下降，随后逐渐上升，在麻醉后24 h恢复到麻醉前水平，之后一直保持在麻前水平。在这两种麻醉保障下实施手术，均可引起CH50含量明显降低，其中在术后48 h降至最低，之后逐渐恢复，在术后72 h时恢复至麻前水平。组间比较发现两种麻醉方式在同一时间点无明显的差异，乳化异氟醚复合麻醉对经历肠管吻合术犬血清中CH50含量的影响与异氟醚麻醉相似。