细菌性阴道病患者阴道灌洗液中干扰素—γ和白细胞介素—4的含量分析

李淑 赵菊美 邹振宇

【摘要】目的：检测细菌性阴道病患者治疗前后阴道灌洗液中干扰素-γ和白细胞介素-4的含量，以分析阴道局部免疫状况和临床治疗效果。方法：通过分析2013年10月至2014年7月我院收治的47例细菌性阴道病患者的临床资料，使用酶联免疫吸附法检测患者治疗前后阴道灌洗液中干扰素-γ和白细胞介素-4的含量，同时对47例健康妇女检测结果进行对比分析。结果：BV组患者IFN-γ水平显著低于对照组健康妇女IFN-γ水平，组间差异具有统计学意义（P<0.05）。统计BV患者治疗前后IFN-γ、IL-4两项水平，BV治愈患者IFN-γ较治疗前有显著提高，IL-4则显著降低，未治愈患者则呈反向变化，BV治愈患者和未治愈患者IFN-γ和IL-4水平差异显著（P<0.05）。结论：BV患者患病同IFN-γ水平显著降低和Th1/Th2比例失衡存在一定的相关关系，为治疗BV提供了一定依据。

【关键词】细菌性阴道病；阴道灌洗液；干扰素-γ；白细胞介素-4

Analysis on interferon -γ and interleukin-4 levels in vaginal lavage fluid of patients with bacterial vaginosisLI Shu1， ZHAO Jumei1△， ZOU Zhenyu2. 1.Department of Obstetrics and Gynecology， Panzhihua City Second Peoples Hospital， Panzhihua 617000， Sichuan， China； 2.Anesthesia Department， Panzhihua City Second Peoples Hospital， Panzhihua 617000， Sichuan， China

【Abstract】Objectives： To detect interferon-γ and interleukin-4 levels in vaginal lavage fluid of patients with bacterial vaginosis and analyze vaginal immune status and clinical outcomes. Methods： By analyzing clinical data of 47 cases of bacterial vaginosis in our hospital from October 2013 to July 2014 and using enzyme-linked immunosorbent assay to detect interferon -γ and interleukin - 4 content， the test results were analyzed. Results： IFN-γ level in patients with BV was significantly lower than that in control group. The difference was statistically significant （P<0.05）. IFN-γ level of BV cure patients after treatment significantly increased and IL-4 level significantly reduced. IFN-γ and IL-4 level of uncured patient were in opposite directions. IFN-γ and IL-4 levels of BV cured patients and uncured patients were significantly different （P<0.05）. Conclusion： Significant reduced level of IFN-γ in BV patients is correlative with Th1 / Th2 imbalance， which provides a certain basis for the treatment of BV.

【Key words】Bacterial vaginosis； Vaginal lavage； IFN -γ； Interleukin-4

【中图分类号】R711.31【文献标志码】A

细菌性阴道病（bacterial vaginosis，BV）是指发生于阴道内的菌群失调，大量病原菌如加德纳菌、弯曲弧菌、革兰阴性菌和各种厌氧菌等在阴道内繁殖，而乳酸杆菌数目大量减少的一种阴道炎症[1]。该疾病多发于中青年女性人群中，可通过性接触进行传播，此外大量服用抗生素和过度使用阴道洗液进行清洁会破坏阴道环境进而导致大量细菌病原体繁殖，发展成为BV[2，3]。目前临床可使用阴道灌洗术控制BV，此外还有局部药物治疗方法减少病原菌的数目进而控制病情[4]，本研究为分析BV患者行阴道灌洗术后局部免疫状况可疾病转归情况，对47例BV患者治疗前后阴道灌洗液中干扰素-γ（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）的含量进行测量。现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2013年10月至2014年7月到我院诊治的BV患者47例及随机选取的健康妇女47例作为对照组，年龄19～49岁。BV组47例，年龄19～48岁，平均（31.73±5.49）岁；对照组47例，年龄19-49岁，平均（30.92±6.81）岁。入选标准：（1）选取两组女性均未妊娠，平素月经规律；（2）均无阴道出血情况；（3）近1个月无药物服用史；（4）就诊时及1年内宫颈细胞学检查无异常；（5）全部女性无内外科疾病和免疫系统疾病史；（6）3 d内无性生活和阴道清洗史；（7）不存在盆腔炎和阴道炎患者；（8）检查宫颈高危型人乳头瘤病毒（HPV）DNA结果呈阴性。对照组女性无白带增多和外阴瘙痒等症状；BV组患者存在白带增多、有味等临床症状，阴道分泌物检测见线索细胞。所有患者签署知情同意书。两组患者年龄等一般资料组间无显著性差异（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

BV组患者治疗方案为：采用局部用药治疗，给予患者甲硝唑呋喃唑酮栓（哈药集团制药总厂，国药准字H23022664，5s/粒）1粒/次，1次/晚，连续治疗1周。BV组患者分别在治疗前、后第2个月月经干净后对患者阴道灌洗液中IFN-γ和IL-4两种细胞因子水平进行检测，具体检测步骤为：（1）采集标本：在月经来潮前10d内采集组员阴道灌洗液，在暴露阴道的状态下取中上1/3的侧壁分泌物进行生殖道微生态检测。取0.9%的无菌氯化钠注射液5mL对阴道壁上1/3及宫颈阴道部进行充分冲洗，在后穹窿处吸取灌洗液4mL，室温条件下以2000r/min的速度离心5min，去除上清液分装于-80℃条件下保存。使用无菌刷在宫颈表面顺时针刷5圈，将样本置于保存液中为进一步HPV DNA检测做准备。需注意制作标本中不能混有血液和反复冻融处理。（2）阴道分泌物的检测：采用革兰染色镜行生殖道微生态检测，检测项目包括清洁度、pH值及菌群多样性、优势菌群、线索细胞和乳酸杆菌等。（3）IFN-γ和IL-4的含量测定：采用酶联免疫吸附法定量检测法检测IFN-γ和IL-4的含量。试剂盒选用武汉博士德生物工程有限公司的人白介素7酶联免疫吸附测定试剂盒IL-7（h）ELISA kit，货号EK0779，具体操作按照说明书进行[5，6]。

1.3观察指标

对BV组患者进行1个月随访，测得患者治疗前后阴道灌洗液中IFN-γ和IL-4的含量，并对比分析IFN-γ和IL-4水平变化，同时同对照组进行比较分析。BV治愈标准：患者临床症状消失，经检测阴道菌群恢复正常，未检测出病原菌。

1.4统计学方法

利用SPSS11.0统计软件建立数据库，计量资料以均数±标准差（±s）表示， 组间比较采用t检验， 计数资料用χ2检验，以P<0.05差异具有统计学意义。

2结果

2.1BV组患者和对照组两组女性阴道灌洗液中IFN-γ和IL-4水平比较BV组患者IFN-γ和IL-4水平同对照组对比，组间差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

3讨论

临床统计发现BV感染率相对较高，作为临床常见的妇科病之一，BV疾病具有临床表现不明显的特点，大部分临床患者无任何症状，少部分患者有临床表现，常表现为白带增多、有异味，同时极少数患者伴有轻度的外阴瘙痒和灼烧感症状[7，8]。据统计BV疾病临床复发率相对较高，其发病机制和复发机制尚不能确定，故不能有效控制[9]。近年来有研究发现BV患者同健康患者阴道灌洗液中IFN-γ和IL-4水平存在一定差异，测定IFN-γ和IL-4水平有助于了解BV患者局部免疫微环境的变化，本研究对此进行了深入探讨。

研究中统计BV组患者和对照组女性阴道灌洗液中的IFN-γ和IL-4水平，发现BV患者阴道灌洗液中的IFN-γ含量同对照组具有显著性差异（P<0.05）。近年来，有学者发现免疫因子的异常分泌同阴道炎发病存在一定的关系，T辅助细胞则是影响人体免疫功能的重要免疫细胞，T辅助细胞的Th1可分泌IFN-γ，IFN-γ具有抗病毒、免疫调节及抗肿瘤特性，可介导细胞免疫，而Th2可分泌IL-4，具有调节体液免疫和适应性免疫的作用，可介导体液免疫[10-12]。正常情况下人体Th1/Th2维持在一个相对稳定的水平，一旦两者平衡遭到破坏，人体局部免疫微环境即发生变化，导致人体出现感染或其他病理情况。研究结果显示BV组患者的IFN-γ水平显著较高，推测其在阴道感染中起着至关重要的作用，BV患者的IFN-γ分泌受到了一定的抑制，改善Th1细胞分泌IFN-γ有助于改善病情发展[13，14]。此外研究中还分析了BV治愈患者和BV未治愈患者的两种细胞因子的变化，发现治疗前后两种细胞因子均发生一定的变化，其中IL-4发生变化较显著，治愈患者和未治愈患者IL-4含量差异也较大。未治愈患者Th1/Th2平衡状态同正常妇女差异较大，推测Th1/Th2失衡也是导致BV疾病发作的重要原因之一[15]。

综上所述，BV患者发病机制同阴道局部免疫微环境变化有一定的关系，适当提高IFN-γ水平和降低IL-4水平对改善患者Th1/Th2平衡状态和改善病情有一定的帮助，有一定的临床指导意义。

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