食源性植物糖蛋白研究进展

赵文竹,张瑞雪,于志鹏,*,李思慧,李新蕊,刘　婧,刘静波,励建荣,*

(1.渤海大学食品科学与工程学院;生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心,辽宁锦州 121013;2.吉林(市)出入境检验检疫局,吉林吉林 132013;3.吉林大学营养与功能食品研究室,吉林长春 130062)



食源性植物糖蛋白研究进展

赵文竹1,张瑞雪1,于志鹏1,*,李思慧1,李新蕊1,刘婧2,刘静波3,励建荣1,*

(1.渤海大学食品科学与工程学院;生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心,辽宁锦州 121013;2.吉林(市)出入境检验检疫局,吉林吉林 132013;3.吉林大学营养与功能食品研究室,吉林长春 130062)

糖蛋白是寡糖链与多肽以多种形式共价相连且具有生物活性的物质,天然糖蛋白具有抗氧化、抗肿瘤和提高免疫力等多种生理活性。本文对食源性植物糖蛋白的提取、纯化、结构鉴定以及功能活性等研究现状进行综述,同时对食源性植物糖蛋白的未来研究进行了展望与分析,旨在为食源性植物糖蛋白的基础研究及综合应用提供参考。

糖蛋白,提取,分离纯化,结构,活性

糖蛋白是一种结合蛋白,由短的寡糖链与蛋白质共价相连构成的分子,以蛋白质为主,以共价键与若干短的寡糖链相连,其总体性质更接近蛋白质[1]。糖蛋白是生物体内重要的一类大分子,是生物体内细胞膜、激素、细胞间基质以及抗体的重要组成成分。目前,植物糖蛋白研究日益增多,其具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、防衰老、降血糖、降血脂等功效[2]。因此,本文对食源性植物糖蛋白的提取、分离、纯化、结构鉴定以及活性测定方面的研究进行综述,为植物源糖蛋白的深入研究提供参考,同时可以促进植物资源的利用,对未来食品、保健品乃至药品的开发具有巨大的借鉴意义。

1　可食性植物源糖蛋白的提取

糖蛋白作为一种结合蛋白,兼具多糖和蛋白质的某些性质,大多数可溶于水及稀盐、稀酸和稀碱等溶液中。因此,天然糖蛋白的提取方法主要有水提法、稀盐溶液或缓冲溶液提取法、酸碱溶液提取法、有机溶剂提取法、酶解法、超声与微波辅助法等方法。

1.1水浸提法

大多数的糖蛋白在水溶液中具有良好的溶解性,因此可用水提取法获得糖蛋白,然而脂质以及游离蛋白质的存在会影响糖蛋白的提取率,因此对脂质和游离蛋白质含量较高的原料在提取前应进行脱脂和去除游离蛋白处理。王艳等[3]在玉竹糖蛋白提取前用2倍体积的石油醚进行脱脂,蛋白质的得率达到13.1%。李金忠[4]用乙醚丙酮热回流法去除脂肪,并用Sevage法除游离蛋白,糖蛋白的平均得率为6.847%。不同植物源糖蛋白的热水浸提工艺根据其原料及其糖蛋白的性质差异而略有不同,具体工艺参数见表1。水浸提法是提取糖蛋白较为经济的方法,其提取工艺简单,但提取过程会将其他物质提取出来,导致提取出的有效成分浓度降低,同时温度的升高易引起糖蛋白生物活性的破坏。

表1　水浸提法提取糖蛋白

表2　盐溶液浸提法提取糖蛋白

1.2稀盐溶液或缓冲盐浸提法

糖蛋白在稀盐和缓冲溶液中具有较好的稳定性与溶解性,氯化钠溶液和缓冲盐溶液是提取植物源糖蛋白的最常用溶剂,原因在于稀盐溶液或缓冲盐溶液中的盐离子可以与蛋白质部分结合,保护蛋白质使其不易变性,进而最大限度地保护糖蛋白的完整性和生物活性。一些糖蛋白能溶解在水溶液中,但与细胞颗粒结合不太紧密,因此选取适当浓度和pH的稀盐溶液或缓冲溶液进行提取,可有效提高糖蛋白提取效果(见表2)。稀盐溶液或缓冲盐溶液浸提法是制备糖蛋白最常用的方法,其提取出的糖蛋白具有较高的得率与生物活性,同时提取工艺简单,易操作。但此种提取工艺的不足在于后续需利用透析等方法进行脱盐处理。

1.3酸碱提取法

糖蛋白中的蛋白质是具有等电点的两性电解质,提取时溶液的pH应偏离等电点,同时针对蛋白质的不同性质,选取不同pH提取溶液来进行提取,一般情况下,碱性蛋白质用偏酸性溶液提取,酸性蛋白质用偏碱性溶液提取。用稀酸或稀碱溶液进行提取时,要注意防止过酸或过碱导致蛋白质构象的不可逆变化。张黎明等[16]采用微碱法提取山药糖蛋白,并通过正交实验得到最优工艺:提取温度60 ℃、料液比1∶15、pH10、提取2 h,提取率为0.74%。吕婧[17]采用碱溶酸沉法对魔芋粉中的糖蛋白进行提取,以蛋白质提取率为指标,通过单因素实验和正交优化提取工艺,结果表明:魔芋糖蛋白的等电点为pH3.8,最佳提取条件为料液比1∶35、提取温度50 ℃、提取时间50 min、提取pH10,蛋白的提取率为34.72%。酸碱提取法在植物源糖蛋白的提取中应用不多,大多用在动物源糖蛋白的提取。

1.4有机溶剂提取法

天然植物源糖蛋白中可能含有一类特殊的糖蛋白,不溶于水但可溶于乙醇等有机溶剂,有研究选取不同的有机溶剂来进行提取,以期获得更多种类的糖蛋白。刘瑞媛[18]通过回流提取法、索氏连续提取法和水煎煮提取得到冬凌草石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水五个不同部位的提取物,其得率分别为0.96%、2.46%、0.36%、1.62%和4.84%。王岸娜等[19]通过响应面法优化乙醇提取猕猴桃糖蛋白的提取工艺,结果表明:当液固比6.5∶1、乙醇体积分数24%、提取温度24 ℃、提取时间45 min,蛋白提取率(提取液中的蛋白质量浓度/组织液中粗蛋白质量浓度)可高达63.05%。李慧敏等[20]对富含糖蛋白的山茱萸果肉提取液的提取工艺进行优化,以α-葡萄糖苷酶的抑制率为测定指标。结果表明:在料液比为1∶15,加入体积分数50%乙醇、超声处理温度70 ℃、超声功率420 W和超声时间30 min的条件下获得的山茱萸提取液对α-葡萄糖苷酶的抑制率为98.5%。目前,常用的提取溶剂有石油醚、乙醇、乙醚、丙酮等,有机溶剂提取法可以提取更多组分的糖蛋白,但溶剂耗用量大,生产成本较高,同时在去除溶剂时,会造成产品品质下降或有机溶剂残留。

表3　超声或微波辅助提取糖蛋白

表4　糖蛋白的分离纯化

1.5酶解提取法

对于水难溶性糖蛋白,则可采取酶法提取,即将不溶性糖蛋白分解为可溶性糖肽、游离肽或氨基酸。酶解法提取糖蛋白不仅可以缩短提取时间和增大提取效率,而且因酶具有高度专一性和选择性可以选择性地去除杂质,对各种成分起到很好的浓缩富集作用。赵希等[21]通过单因素及正交实验得到酶法提取山药糖蛋白的最优工艺条件为:料液比1∶10,碱性蛋白酶用量70 U/g山药粉,提取时间1.5 h,pH9.5,温度为45 ℃,山药糖蛋白的提取得率为67.14%。酶解提取法反应条件温和,不需要对原有工艺进行过多的改变,对反应设备的要求较低,操作简便,是可食性植物糖蛋白的绿色高效提取技术。目前,应用酶解法提取可食性植物糖蛋白的报道相对较少,酶制剂的种类和酶解条件应该是未来研究的关注点。

1.6超声波或微波辅助提取法

超声波能形成空化作用,使原料的细胞壁易于破碎。在微波场中,吸收波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使得被萃取物质从基体或体系中分离,进入介电常数较小、微波吸收能力相对差的萃取剂中。这两种技术均有利于糖蛋白的溶出,从而达到缩短时间、增加得率的效果。由于糖蛋白种类繁多,性质上差异比较大,即使是同类糖蛋白,但因其处于不同体系,提取条件也存在差异,在糖蛋白的超声波或微波辅助提取的过程中时常综合考虑这些内外因素(见表3)。超声波或微波作用具有很强的穿透力和较好的选择性,还具有溶剂用量少、热效率高、提取时间短等优点,并可大规模应用于工业化生产。

2　可食性植物源糖蛋白的分离纯化

糖蛋白的分离纯化是指除去糖蛋白粗品中的杂质成分得到单一糖蛋白组分的过程,是糖蛋白研究中的难点,主要是由于糖链与蛋白质共价键结合,在处理过程中极易造成共价键的断裂,破坏糖蛋白原有的结构。在分离纯化前,通常要通过透析、离子交换树脂等除去无机盐和小分子有机物。对于大分子的游离蛋白质,一般采用Sevage法、酶法或三氯乙酸法。常用的糖蛋白分离纯化方法是:先将糖蛋白粗提物分级处理,然后应用阴离子交换层析柱、凝胶层析柱、亲和层析柱或其他方法进行进一步分离纯化;也有学者应用超滤法、超离心法、区带电泳法、金属络合法或凝集素富集等方法对糖蛋白进行纯化[1]。由于天然植物源糖蛋白来源广泛,形式复杂,因此糖蛋白的分离纯化要根据糖蛋白具体性质以及实验目的进行选择,见表4。

2.1膜分离法

膜分离技术是指在分子水平上不同粒径分子的混合物在通过半透膜时,实现选择性分离的技术。按分离应用领域过程可分为:微滤、超滤、反渗透、透析、电透析、纳米膜分离、亲和过滤和渗透气化。透析是以膜两侧的浓度差为传质推动力,从溶液中分离出小分子物质的过程,其具有高效节能、污染小且常温下无相变等多种优点,目前已经有研究将透析技术应用于糖蛋白的脱盐处理,Go[30]等将与硫酸铵结合的海带糖蛋白用蒸馏水透析,得到海带糖蛋白粗品。

2.2色谱分离法

色谱分离技术是一种分离复杂混合物中各个组分的有效方法,主要包括离子交换色谱、凝胶柱色谱、亲和色谱和高效液相色谱等,分离时常将几种分离方法混合使用。植物源糖蛋白的分离纯化一般将DEAE-纤维素柱层析分离方法与葡聚糖凝胶柱层析分离方法混合使用,并根据预分离植物源糖蛋白的具体性质选择合适的型号[24-27]。此种纯化方法具有分离效率高、样品用量少、选择性高等优点。目前,常用刀豆凝集素A-琼脂糖凝胶作为亲和层析[31],因为ConA可特异性结合α-D-葡萄糖基和α-D-甘露糖基,所以含有这些糖基的糖蛋白可以与刀豆凝集素A-琼脂糖凝胶发生亲和吸附,而不能形成特异结合的杂质则很快随洗脱液流出,这是植物源性糖蛋白分离纯化的一种高效方法。现有凝集素功能化材料存在负载量偏低以及富集效率有限等问题,有学者研究新型凝集素富集糖蛋白的方法。时照梅等[32]制备了两种以氧化石墨烯(GO)为载体的新型固定化凝集素,利用GO比表面积大,功能基团含量高,分散性、化学稳定性好等特点,实现了高负载量的凝集素固定(GO-ConA 2.073 mg/mg;RSD=1.0%;GO-WGA 1.908 mg/mg;RSD=0.14%)。常用凝集素及识别的肽链结构[33]见表5。此外,根据糖蛋白糖链部分特殊理化性质,纳米离子以其丰富的活性亲和位点和特殊结构已经开始逐步应用于糖蛋白的分离与富集,还有凝集素亲和法、硼酸法、肼化学反应法和免疫法等也有应用[34]。

表5　常用凝集素及其识别的糖链结构

3　可食性植物源糖蛋白的纯度鉴定、组成及结构鉴定

获得高纯度的糖蛋白是结构鉴定的基础,通常要经过两种以上方法进行纯度鉴定,糖蛋白纯度鉴定常用的方法有凝胶层析法、亲和层析法、高效液相色谱法、高压电泳法、超速离心法和毛细管电泳法[35]等。目前有两种常见的纯度鉴定方法:凝胶柱层析法,若糖蛋白经凝胶层析得到单一对称的洗脱峰,则证明糖蛋白是均一组分;电泳方法,若电泳后显色,糖和蛋白质的电泳图谱重合,呈单一色斑,则糖蛋白为均一组分。

糖蛋白是一种复合糖,其主链较短,糖含量也因糖蛋白种类而异。在糖蛋白中,糖的组成一般有甘露糖、半乳糖、岩藻糖、葡糖胺、半乳糖胺、唾液酸等[36]。糖链的存在可以提高糖蛋白的亲水性,并且可与其他糖链或蛋白质形成共价键或氢键,起到结构支架或转移糖基的作用。哺乳动物的糖链参与多种细胞机制,具有多重生理功能,如调节蛋白质的折叠、细胞粘附、分子的搬运与清除、受体激活、信号传导等,其具体的调节过程见图1。糖蛋白中肽链含有几乎所有氨基酸种类,其中苏氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、天冬酰胺和羟赖氨酸等含量较高[37]。根据糖链还原端与蛋白质上特定残基连接所形成的糖肽键的不同,可将糖蛋白分为O-连接糖蛋白和N-连接糖蛋白[38],见图2。糖基化是一种常见的蛋白质修饰转译,对蛋白质的结构和功能有重要的影响,包括蛋白质的折叠、稳定性、分子识别和免疫抗原性等。目前,糖基化识别已经作为癌症的早期检测的生物标志物[39]。由此,植物源糖蛋白的糖基化也越来越被关注。

图1　糖链功能的细胞机制[40]Fig.1　Cellular mechanisms of glycan function[40]

图2　O-糖肽键(a)和N-糖肽键(b)[41]Fig.2　O-glycopeptide linkage(a)and N-glycopeptide linkage(b)[41]

表6　糖蛋白结构鉴定

目前糖蛋白结构鉴定主要方法有理化鉴定法、GC法、红外光谱法、DSC技术、核磁共振光谱法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法、薄层层析法、HPLC法、紫外光谱扫描法、化学比色法、纸层析法等,详见表6。

4　可食性植物源糖蛋白的功能活性

4.1抗氧化

4.2抗肿瘤

目前使用的抗肿瘤药物会一定程度上损害人体的正常细胞、造成机体免疫功能衰退,研究发现多种植物源糖蛋白具有抗肿瘤功效,且对细胞没有毒害作用,由此植物源糖蛋白抗肿瘤活性的研究对于肿瘤疾病的防治具有重大的意义。糖蛋白的抗肿瘤机制为:P-糖蛋白可以防止机体对有害物质的吸收和介导物质的输出、诱导肿瘤细胞的凋亡、通过影响活性氧(ROS)影响机体细胞的凋亡[52]。刘主等[53]对甘薯糖蛋白SPG-1进行抗肿瘤活性研究,结果发现:甘薯糖蛋白对H22实体瘤小鼠有明显的抑瘤作用(p<0.05),对H22腹水瘤小鼠具有明显的延长存活期作用(p<0.01)。钱建亚等[54]用甘薯糖蛋白提取物进行Ames实验,实验结果表明两个实验样品均具有显著的抗突变作用,在实验剂量0～5000 μg/mL的范围内,抑制强度与剂量呈相关趋势。体外抗肿瘤实验揭示,实验样品对COS-1、SHG-44、SKOV3细胞的抑制作用呈现剂量依赖性,最小抑制量为1.5 μg/mL。

4.3免疫调节

免疫系统对生物体具有极其重要的作用,它能够保持生物生命体内环境的稳定及结构的完整。同时还可以形成一层天然的保护屏障,使生命体抵抗或免受各种细菌和病原菌的侵入,增强生物体的抵抗能力。目前,很多学者经体外和体内免疫活性研究发现,糖蛋白能够增强和调节生物体的免疫功能,多种食源性植物糖蛋白的免疫调节活性也日益被关注。韩澄等[55]利用小鼠巨噬细胞建立体外实验模型,对茶叶糖蛋白的免疫活性进行研究,并且采用倒置显微镜观察细胞形态变化,结果表明:50 μg/mL的茶叶糖蛋白可显著促进细胞分泌一氧化氮和细胞因子TNF-α、IL-1β(p<0.01),说明茶叶糖蛋白可通过促进细胞分泌一氧化氮和细胞因子,起到活化RAW264.7细胞和调节机体免疫的功效。沈柱英等[48]用纳豆糖蛋白进行体外免疫实验,结果表明:100 μg/mL的纳豆糖蛋白可显著增强脾细胞增殖能力,同时纳豆糖蛋白可显著促进细胞因子白细胞介素-2以及干扰素-γ的表达。梁婧婧等[56]研究发现甘薯糖蛋白可以降低高脂血症大鼠的肝脏/体重比值,提高动物的机体免疫能力。利用糖蛋白的免疫原性和免疫反应性,将细菌的多糖抗原与蛋白载体通过化学的方法制备多糖蛋白疫苗可能是未来的发展方向。

4.4其他生物活性

糖蛋白的糖链结构具有多样性,糖链参与维持其肽链处于有生物活性的天然构象及稳定肽链结构,并赋予整个糖蛋白分子以特定的生物活性。黄丹菲[57]等探讨茶叶糖蛋白对小鼠骨髓来源树突状细胞表面分子表达的影响,结果表明:经茶叶糖蛋白作用24 h后,树突状细胞形态更加典型,更加成熟,并且在0.1～25 μg/mL浓度范围内呈现剂量依赖性。Lee[58]等研究龙葵糖蛋白对人乳腺癌MCP-7细胞的细胞毒性作用,结果表明:1 μg/mL的龙葵糖蛋白Ⅰ和100 μg/mL的龙葵糖蛋白Ⅱ能够产生细胞毒性,同时诱导NO的产生。丁诚实[29]等研究用离子交换结合FPLC技术分离纯化得到天麻糖蛋白对急性血瘀大鼠血液流变的影响,结果发现:60、120 mg/kg能够显著降低急性血瘀模型大鼠高切、中切的全血黏度(p<0.05)和血浆黏度(p<0.01),降低红细胞聚集指数(p<0.05),增大红细胞变形指数(p<0.05)。糖蛋白的多种生物活性在药物和功能性产品的开发等领域方面具有广阔的前景。

5　展望

植物源性糖蛋白具有来源丰富、易获得、成本低等特点。此外,植物源性糖蛋白还是一类具有多种功能的重要化合物,而且其糖链参与多种细胞机制,具有多重生理功能,如调节蛋白质的折叠、细胞粘附、分子的搬运与清除、受体激活、信号传导等。糖蛋白结构存在着复杂的微观不均一性,即在蛋白质的氨基酸序列完全相同的情况下,由于糖链的组成和连接方式不同而形成的多种糖蛋白亚型,糖链很少以线性、非分支的方式出现,糖蛋白的这种复杂性在生理功能上具有重要意义,但却给糖蛋白的结构鉴定带来巨大的障碍。糖链结构测定也远比核酸和蛋白质要困难。植物源糖蛋白未来的研究方向可以从以下三个方面进行:一是利用组学技术对糖蛋白的糖基化位点及糖链构型进行表征;二是阐明糖蛋白发挥多种功能活性的作用机理及构效关系等;三是对植物源糖蛋白进行综合性利用,如开发保健食品、新型化妆品、抗肿瘤药物等。

[1]丁璇子,王岸娜,吴立根,等. 糖蛋白结构鉴定研究现状[J]. 粮食与油脂,2015(7):9-13.

[2]Preuss H G,Echard B,Bagchi D,et al. Enhanced Insulin-hypoglycemic activity in rats consuming a specific glycoprotein extracted from maitake mushroom:Molecular Cellular Biochemistry,2008,306(1-2):105-113

[3]王艳,胡一鸿,陈秋志,等. 玉竹糖蛋白分离纯化及其体外抗氧化能力[J]. 食品科学,2015,36(2):52-56.

[4]李金忠. 山药糖蛋白的超声辅助提取及免疫调节功能研究[D]. 镇江:江苏大学,2005.

[5]师超,何雅蔷,卞科，等.黄肉甘薯糖蛋白提取工艺的研究[J].安徽农学通报,2013(19):119-121.

[6]钱鑫.甘薯糖蛋白提取、纯化研究[D].陕西科技大学,2009.

[7]邵海.山药糖蛋白的分离纯化研究[D].上海海洋大学,2009.

[8]王利军,吕杰.南瓜中糖蛋白提取工艺的研究[J].粮油食品科技,2006,14(1):46-47.

[9]袁菊如,徐国良,蒋维,等. 紫山药糖蛋白提取工艺研究[J]. 食品工业,2014(7):87-89

[10]魏文志. 小球藻糖蛋白的分离纯化与体外预防肿瘤作用筛选的研究[D]. 无锡：江南大学,2008.

[11]王芳,杨航娟,段玉峰. 覆盆子糖蛋白提取工艺的研究[J]. 安徽农业科学,2009,37(8):3756-3758.

[12]刘倩倩. 正交优化甘薯淀粉渣中糖蛋白提取工艺[J]. 山东化工,2015,44(13):25-26,30.

[13]陈琼,于佳.蒲公英糖蛋白的含量测定及两种提取工艺优化[J].广州化工,2012,40(12):69-71.

[14]王应强,段玉峰,刘爱青，等.丹参水溶性糖蛋白的提取及其理化性质[J].陕西师范大学学报：自然科学版,2007,35(2):99-102.

[15]李婷婷,张晖,吴彩娥,等. 油茶籽糖蛋白提取工艺优化及抗氧化性[J]. 农业机械学报,2012,43(4):148-155.

[16]张黎明,王艳乔,左北梅,等. 微碱法提取山药糖蛋白的工艺研究[J]. 食品科技,2012(3):206-209.

[17]吕婧. 魔芋甘露聚糖肽的制备工艺及理化特性研究[D].西安:陕西科技大学,2015.

[18]刘瑞媛. 冬凌草提取物逆转肿瘤多药耐药性的研究[D]. 西安：陕西师范大学,2011.

[19]王岸娜,孙玉丹,李龙安,等. 响应面法优化猕猴桃糖蛋白提取工艺研究[J]. 河南农业科学,2012,41(8):121-127.

[20]李慧敏,刘艳妮,王小蕊,等. 以α-葡萄糖苷酶活性抑制率为指标优化山茱萸果肉的提取条件[J]. 植物资源与环境学报,2013,22(1):112-114.

[21]赵希,张黎明,王玲玲. 酶法提取山药中多种水溶性成分的工艺研究[J]. 精细化工,2009(1):28-32.

[22]罗秋水.紫红薯糖蛋白提取、纯化、抗氧化活性研究[D].南昌：江西农业大学,2011.

[23]任涛,钟洁. 响应曲面法优化超声波辅助提取蒲公英糖蛋白工艺[J]. 食品工业科技,2011(7):297-301.

[24]Yan W,Zou T,Xiang M,et al. Purification and characterization of a soluble glycoprotein from garlic(allium sativum)and itsinvitrobioactivity[J]. Preparative Biochemistry & Biotechnology,2016,DOI:10.1080/10826068.2015.1135454.

[25]孟宪军,包红娜,梁婧婧. 甘薯糖蛋白的氨基酸组成分析[J]. 食品工业科技,2009(8):303-305.

[26]孙宇婧,韩涛,卞科，等.山药糖蛋白纯化条件及其理化方法鉴定[J].中国粮油学报,2011,26(3):81-85.

[27]杜晓旭,钟洁,段玉峰,等. 蒲公英糖蛋白的分离纯化及结构分析[J]. 食品工业科技,2012,33(8):198-200.

[28]孙星学,柳参奎. 水稻可溶性糖蛋白的纯化与鉴定研究[J]. 植物研究,2006,26(2):187-192.

[29]丁诚实. 天麻糖蛋白GGE2b的分离纯化及对急性血瘀大鼠血液流变的影响[J]. 食品科学,2010,31(1):240-242.

[30]Go H,Hwang H J,Nam T J. Glycoprotein extraction from Laminaria japonica promotes IEC-6 cell proliferation.[J]. International Journal of Molecular Medicine,2009,24(6):819-824.

[31]罗瑞鸿. 木豆凝集素的提纯、部分性质及生物学活性研究[D]. 南宁：广西大学,2006.

[32]时照梅,范超,黄俊杰,等. 氧化石墨烯固定化凝集素的制备及在糖蛋白/糖肽富集中的应用[J]. 色谱,2015,33(2):116-122.

[33]陈国千.糖蛋白糖链结构分析与恶性肿瘤诊断[J]. 国外医学·临床生物化学与检验分册,2000,21(4):171-173.

[34]丁鹏,陈掀,李秀玲,等. 基于纳米粒子的糖蛋白/糖肽分离富集方法[J]. 化学进展,2015,DOI:10.7536/PC150513.

[35]Stefan M,Jonathan B,András G. Unraveling the glyco-puzzle:glycan structure identification by capillary electrophoresis.[J]. Analytical Chemistry,2013,85(9):4228-4238.

[36]Taylor M Drickanmer K. 糖生物学概述[M]. 马毓甲,译.3版. 北京:科学出版社,2013:4-9.

[37]李锡径.植物糖蛋白的结构与功能[J].植物生理学通讯,1983(1):5-9.

[38]Jensen P H,Karlsson N G,Daniel K,et al. Structure analysis of N-and O-Glycans released form glycoproteins[J]. Nature Protocol,2012(7):1299-1310.

[39]Svarovsky S A,Joshi L. Cancer glycan biomarkers and their detection-past,present and future[J]. Analytical Methods,2014,6(12):3918-3936.

[40]Ohtsubo K,Marth J D. Glycosylation in cellular mechanisms of health and disease.[J]. Cell,2006,126(5):855-867.

[41]张艳. 裸燕麦糖蛋白的提取纯化及抗氧化作用研究[D]. 保定：河北农业大学,2010.

[42]赵梅,于春娣,丁霄霖,等.甘薯水溶性糖蛋白的分离纯化及结构初探[J].食品与生物技术学报,2009,28(1):76-80.

[43]赵梅,唐文婷,于春娣,等.甘薯糖蛋白的分离纯化及其性质研究[J].食品研究与开发,2008,29(7):49-51.

[44]梁婧婧,苏锡辉,史铁嘉,等.甘薯水溶性糖蛋白一级结构鉴定[J].食品工业科技,2011(11):166-167.

[45]丁青芝,马海乐,骆琳,等.山药糖蛋白的分离纯化与鉴定[J].食品科学,2008,29(7):217-220.

[46]邹柯婷,李淼,陈双,等.玉竹糖蛋白的分离纯化及理化性质的研究[J].食品工业科技,2012,33(8):191-193,197.

[47]程显好,袁建国,高先岭,等. 虫花菌菌丝体糖蛋白的分离、纯化及其性质研究[J]. 食品与药品,2005(6):34-36.

[48]沈柱英,黄占旺,肖建辉,等. 纳豆糖蛋白的分离纯化、结构表征及其免疫活性研究(英文)[J]. 食品科学,2015,36(13):215-222.

[49]朱科学. 小麦胚水溶性糖蛋白(WGWSGP)的化学组成及结构分析[J]. 食品信息与技术,2004,25(2):17-17.

[50]赵文竹,张瑞雪,于志鹏,等.生姜的化学成分及生物活性研究进展[J]. 食品工业科技,2016,http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1759.TS.20160129.1408.038.html.

[51]雷利芳,游静,曾华金,等. 微孔板结合化学发光法快速测定覆盆子中总糖蛋白的抗氧化活性[J]. 发光学报,2013,34(5):650-655.

[52]Vanderschaeghe D,Festjens N,Delanghe J,et al. Glycome profiling using modern glycomics technology:technical aspects and applications.[J]. Biological Chemistry,2010,391(2-3):149-161.

[53]刘主,朱必风,彭凌,等.甘薯糖蛋白降血糖与抗氧化作用研究[J].食品科学,2008,29(11):582-584.

[54]钱建亚,刘栋,孙怀昌. 甘薯糖蛋白功能研究一体外抗肿瘤与Ames实验[J]. 食品科学,2005(12):216-218.

[55]韩澄,陈一晴,黄丹菲,等. 茶叶糖蛋白对RAW264.7细胞分泌作用的影响[J]. 北京联合大学学报:自然科学版,2011,25(4):23-25.

[56]梁婧婧,苏锡辉,史铁嘉,等. 甘薯糖蛋白对高血脂大鼠体重及脏器指数的影响[J]. 食品研究与开发,2013,34(3):9-11.

[57]黄丹菲,聂少平,韩澄,等. 茶叶糖蛋白对树突状细胞表面分子表达的影响[J]. 南昌大学学报:理科版,2009,33(3):257-260.

[58]Lee S J,Lim K T. Antioxidative Effects of Glycoprotein Isolated from Solanum nigrum Linne on Oxygen Radicals and its Cytotoxic Effects on the MCF-7 Cell[J]. Journal of Food Science,2006,68(68):466-470.

Progress of research on glycoprotein from edible plant

ZHAO Wen-zhu1,ZHANG Rui-xue1,YU Zhi-peng1,*,LI Si-hui1,LI Xin-rui1,LIU Jing2,LIU Jing-bo3,LI Jian-rong1,*

(1.College of Food Science and Engineering,Bohai University;National & Local Joint Engineering Research Center of Storage Processing and Safety Control Technology for Fresh Agricultural and Aquatic Products,Jinzhou 121013,China;2.Jilin(city)Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau,Jilin 132013,China;3.Lab of Nutrition and Functional Food,Jilin University,Changchun 130062,China)

Glycoprotein is any of a class of proteins which have a carbohydrate group attached to the polypeptide

glycoprotein;extraction;separation and purification;structure;activity

2016-02-17

赵文竹(1986-)，女，博士，讲师，研究方向：植物活性成分，E-mail：zhaowenzhu777@163.com。

于志鹏(1984-)，男，博士，讲师，研究方向：蛋白质及活性肽的功能研究与产品开发，E-mail：yuzhipeng20086@sina.com。

励建荣(1964-)，男，博士，教授，研究方向：生鲜食品贮藏加工与质量安全控制，E-mail：lijr6491@163.com。

国家科技支撑课题(2012BAD00B03)；渤海大学博士启动项目(0515bs020)。

TS201.1

A

1002-0306(2016)16-0389-07

10.13386/j.issn1002-0306.2016.16.069

chain,composed of relatively small number of monosaccharide units and a compound consisting of two or more peptides linked through a variety of covalent forms,natural glycoprotein generally has special physiological activities,such as anti-oxidation,anti-tumor,enhance immunity.In the current plant glycoprotein research pro-gram,the research progress was reviewed. The prospect of plant glycoprotein was addressed,aimed to the comprehensive development of the edible plant glycoprotein.