联合臭氧水治疗特应性皮炎患者的疗效及白细胞介素4、神经生长因子检测

张英博 向亚平 黄进华 高丽华 陈美琳 Kathy Wu 李苗苗 陈静 杨盛波 鲁建云410013长沙，中南大学湘雅三医院皮肤科

联合臭氧水治疗特应性皮炎患者的疗效及白细胞介素4、神经生长因子检测

张英博 向亚平 黄进华 高丽华 陈美琳 Kathy Wu 李苗苗 陈静 杨盛波 鲁建云
410013长沙，中南大学湘雅三医院皮肤科

目的观察联合臭氧水治疗特应性皮炎（AD）患者的临床疗效和安全性。方法收集6～65岁中重度AD患者，分为试验组和对照组，每组30例。两组患者均口服左西替利嗪胶囊（5 mg每日1次），外涂他克莫司软膏，每日2次，同时外涂保湿润肤霜。试验组加用臭氧水疗，每周3～5次。共观察2周。观察两组患者治疗前后特应性皮炎严重度评分（SCORAD）评分、视觉模拟尺（VAS）瘙痒评分、皮肤病生活质量指数（DLQI）/儿童皮肤病生活质量指数（CDLQI）变化情况，ELISA法检测患者治疗前后外周血白细胞介素4、神经生长因子表达水平。结果试验组患者治疗前SCORAD评分、VAS评分、DLQI/CDLQI评分分别为42.13±16.03、7.14±2.12、14.92±5.94，治疗2周后分别为27.3±11.01、2.23±1.31、9.69±4.17；对照组治疗前SCORAD评分、VAS评分、DLQI/CDLQI评分分别为43.36±17.78、6.45±1.29、15.15±5.40，治疗2周后分别为39.65±16.67、3.32±0.87、12.84±5.37。两组3种评分治疗前后比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），且治疗2周后两组之间3种评分差异亦有统计学意义（均P＜0.05）。两组患者治疗后外周血白细胞介素4和神经生长因子水平均下降，与治疗前相比，差异有统计学意义（均P＜0.05），其中试验组白细胞介素4下降幅度大于对照组（t=8.57，P＜0.05），神经生长因子下降幅度两组间差异无统计学意义（t=9.51，P＞0.05）。结论联合臭氧水能安全、有效地改善AD患者病情，可能与降低患者外周血白细胞介素4水平有关。

皮炎，特应性；臭氧；白细胞介素4；神经生长因子；治疗结果

特应性皮炎（AD）是一种慢性、复发性疾病，外用药物治疗主要有糖皮质激素、钙调磷酸酶抑制剂和抗生素［1］。医用臭氧因其对多种微生物的杀菌、抑菌作用对外科及皮肤科各种伤口、皮肤黏膜感染和溃疡等都有良好的治疗作用［2］。因此，我们尝试用臭氧水联合左西替利嗪、他克莫司软膏治疗AD患者，获得满意疗效，现报告如下。

一、对象与方法

（一）对象：2014年3月至2015年3月在中南大学湘雅三医院皮肤科门诊就诊且依据文献［3］标准诊断为中重度AD。入选标准：年龄6～65岁，愿意参加本治疗且治疗前后愿意留取血标本者。排除标准：①已知对臭氧水过敏者；②患有可能干扰治疗的其他皮肤病；③伴严重系统性疾病者，孕妇或哺乳期妇女；④就诊前2周系统或局部使用糖皮质激素、免疫抑制剂、抗生素类药物；⑤治疗及随访期间用过治疗AD的其他药物或可能影响疗效的其他药物者。AD严重度判断标准见临床评分。本研究经中南大学湘雅三医院医学伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书（未成年人由其监护人签署）。

共纳入60例患者，分为试验组和对照组。试验组年龄（16.50±10.19）岁，男∶女为16∶14，病程（42.13±16.03）个月，对照组年龄（16.10± 9.03）岁，男∶女为19∶11，病程（43.36±17.78）个月，两组患者的年龄、性别、病程和严重程度比较，差异无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。

（二）方法：臭氧水疗仪为湘雅三医院皮肤科专利技术转化产品，由湖南海贽医疗科技有限公司生产，型号：HZ2600A，湘食药监械（准）字2013第2260074号。臭氧水浓度为3.5～7.5 mg/L。

1.治疗方法：两组患者均口服左西替利嗪胶囊，每天5 mg，外用他克莫司软膏（成人用0.1%，儿童用0.03%），每天2次，同时外涂保湿润肤霜。试验组加用臭氧水疗，每周3～5次。共观察2周。水疗方法：臭氧水浸泡四肢皮损，湿敷头和躯干部皮损，淋浴或浸浴治疗全身皮损。在治疗前和治疗2周后分别抽取两组患者的静脉血，离心后-80℃冰箱保存上清液待检。

2.临床评分：按照文献［4］进行评估。SCORAD评分=A/5+7B/2+C，其中A为皮损面积；B为皮损严重程度，包括6项指标：红斑、丘疹（或）水肿、渗出（或）结痂、表皮剥脱、苔藓化、皮肤干燥（评价未受累皮肤）；C为瘙痒和影响睡眠程度，按最近3昼夜平均分计算，每项评分为0～10分（视觉模拟尺），总分范围0～103分，0～24分为轻度，25～50分为中度，51～103分为重度。瘙痒程度评分：用10 cm视觉模拟尺（VAS）来评价，无瘙痒计0分，极度瘙痒计10分。生活质量评价：成人AD患者用皮肤病学生活质量指数（dermatology life quality index，DLQI）进行评价［5］，治疗前后患者独立完成量表填写；AD患儿用儿童皮肤病学生活质量指数（child′s dermatology life quality index，CDLQI）［6］进行评价，由其父母或监护人协助填写。

3.外周血白细胞介素（IL）4和神经生长因子（NGF）检测：ELISA法检测所有患者治疗前后外周血IL⁃4和NGF水平。外周血IL⁃4检测试剂和NGF检测试剂购自武汉华美生物工程有限公司。

4.统计学方法：用SPSS17.0统计软件包进行统计分析，计量资料用±s表示，组间比较用独立样本t检验，自身对照比较采用配对样本t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

二、结果

1.临床评分情况：与治疗前比较，治疗后试验组和对照组SCORAD评分、VAS评分和DLQI/CDLQI评分均显著下降（均P＜0.05），且3种评分在两组间差异有统计学意义（均P＜0.05）。见表1。

2.外周血IL⁃4和NGF情况：与治疗前相比，治疗后两组IL⁃4和NGF水平均显著下降（均P＜ 0.05），且试验组IL⁃4水平低于对照组（P＜0.05），但两组NGF的表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表1 两组特应性皮炎患者治疗前后临床评分（±s）

表1 两组特应性皮炎患者治疗前后临床评分（±s）

注：t1～t3以及P1～P3均为两组内各指标治疗前后比较，t4、P4为试验组与对照组之间比较。SCORAD：特应性皮炎严重度评分；VAS：视觉模拟尺；DLQI/CDLQI：皮肤病生活质量指数/儿童皮肤病生活质量指数

组别试验组对照组t4值P4值例数30 30 SCORAD评分VAS评分治疗前42.13±16.03 43.36±17.78 6.41 0.815治疗后27.3±11.01 39.65±16.67 11.59 0.037 t1值3.06 11.34 P1值0.011 0.034 t2值20.37 9.34 P2值0.041 0.021 t3值10.72 14.76 P3值0.029 0.017----治疗前7.14±2.12 6.45±1.29 5.92 0.637治疗后2.23±1.31 3.32±0.87 8.25 0.029----DLQI/CDLQI评分治疗前14.92±5.94 15.15±5.40 6.95 0.414治疗后9.69±4.17 12.84±5.37 9.71 0.024----

表2 两组特应性皮炎患者治疗前后白细胞介素（IL）4、神经生长因子（NGF）水平（ng/L，±s）变化

表2 两组特应性皮炎患者治疗前后白细胞介素（IL）4、神经生长因子（NGF）水平（ng/L，±s）变化

注：t1以及P1均为两组内治疗前后比较，t2、P2为试验组与对照组之间比较

组别试验组对照组t2值P2值例数30 30 IL⁃4 NGF治疗前0.117±0.028 0.124±0.022 4.36 0.328治疗后0.063±0.023 0.090±0.034 8.57 0.011 t1值12.06 6.48 P1值0.025 0.041 t1值13.60 6.83 P1值0.037 0.010----治疗前0.048±0.015 0.054±0.013 7.44 0.085治疗后0.029±0.010 0.035±0.011 9.51 0.063----

3.不良反应：试验组5例出现局部刺激症状，3例轻度嗜睡症状，对照组3例出现局部刺激症状，4例轻度嗜睡症状。

三、讨论

我们从2009年开始从事臭氧在皮肤科的外用治疗研究。由于臭氧气体在临床使用不便利，我们尝试研发臭氧水生成设备，将臭氧溶解在水中生成臭氧水湿敷或洗浴治疗皮炎湿疹类疾病。洗浴具有清洁皮肤、减少细菌定植、增加皮肤含水量等作用，有助于AD患者病情的缓解。为寻找一种具有良好的杀菌抑菌作用、显著止痒、缓解炎症的适合于局部和全身的洗浴方法，我们设计本研究观察臭氧水疗联合经典方法治疗中重度AD的疗效和安全性，结果表明，联合治疗组对AD患者症状的缓解作用优于单纯经典治疗。DLQI及CDLQI评价显示臭氧水疗有助于改善患者的生活质量。尤其是臭氧水疗对瘙痒的改善，遏制了AD患者瘙痒⁃搔抓的恶性循环，抑制了疾病的恶性发展，使AD患者生活质量有了很大的提高。

臭氧水疗对中重度AD患者病情的缓解机制仍不清楚。本研究中，我们发现治疗后患者外周血细胞因子IL⁃4表达下降，且试验组与对照组比较IL⁃4下降程度有统计学差异，因此推测臭氧水疗缓解AD的机制与清洁、杀菌、抑菌作用和降低细胞因子IL⁃4表达有关。有研究表明，特应性皮炎小鼠模型皮损中NGFmRNA含量高于正常小鼠，与皮损严重程度和小鼠搔抓的频率呈正相关，且AD病情缓解后NGF表达也下降［7］。本研究结果显示，治疗后两组AD患者NGF表达均下降，但NGF下降的水平在两组间差异无统计学意义，因此，本研究结果不足以说明臭氧水疗缓解瘙痒的机制与降低外周血NGF水平有关，但是否与AD患者皮损中NGF mRNA的表达水平下降有关尚需进一步研究。

本研究中未发现对臭氧水疗的严重不良反应。理论上，臭氧在水中并不稳定，易分解为氧气，对患者应该是安全无刺激［8］，这就为臭氧水疗在AD的临床应用提供了安全保障。综上所述，臭氧外用有助于缓解中重度AD患者症状，丰富AD的治疗手段。

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Combined ozone hydrotherapy for atopic dermatitis:evaluation of efficacy and detection of interleukin⁃4 and nerve growth factor levels in peripheral blood from patients before and after treatment

Zhang Yingbo,Xiang Yaping,Huang Jinhua,Gao Lihua,Chen Meilin,Kathy Wu,Li Miaomiao,Chen Jing,Yang Shengbo,Lu Jianyun
Department of Dermatology,The Third Xiangya Hospital of Central South University,Changsha 410013,China

ObjectiveTo evaluate the clinical efficacy and safety of combined ozone hydrotherapy for the treatment of atopic dermatitis（AD）.MethodsA total of 60 patients with moderate or severe AD aged from 6 to 65 years were enrolled,and randomly and equally divided into a test group and a control group.Both the two groups were treated with oral levocetirizine capsules 5 mg once a day,topical tacrolimus ointment twice a day,and topical moisturizers.The test group was additionally treated with ozone hydrotherapy 3-5 times every week.The treatment lasted 2 weeks.The severity scoring of atopic dermatitis（SCORAD）score,visual analog scale（VAS）score,dermatology life quality index（DLQI）or children′s dermatology life quality index（CDLQI）score were assessed before and after the treatment,and compared between the two groups.Enzyme⁃linked immunosorbent assay（ELISA）was performed to measure the levels of interleukin⁃4（IL⁃4）and nerve growth factor（NGF）in peripheral blood from the patients before and after the treatment.ResultsAfter 2⁃week treatment,the SCORAD scores,VAS scores and DLQI/CDLQI scores significantly decreased from 42.13±16.03,7.14±2.12 and 14.92±5.94 before the treatment to 27.3±11.01,2.23±1.31 and 9.69±4.17 respectively in the test group（allP＜0.05）,and from 43.36±17.78,6.45±1.29 and 15.15±5.40 to 39.65±16.67,3.32±0.87 and 12.84±5.37 respectively in the control group（allP＜0.05）.In addition,all the three scores were significantly lower in the test group than in the control group after 2⁃week treatment（allP＜ 0.05）.A significant decline was also observed in the levels of IL⁃4 and NGF in peripheral blood in the two groups at the end of the treatment compared with those at baseline（allP＜ 0.05）,and the magnitude of decline in IL⁃4 levels was significantly higher in the test group than in the control group（t=8.57,P＜ 0.05）,while that in NGF levels was insignificantly different between the two groups（t=9.51,P＞ 0.05）.ConclusionCombined ozone hydrotherapy can effectively and safely improve the condition of patients with AD,likely by decreasing the levels of IL⁃4 in peripheral blood.

Dermatitis,atopic;Ozone;Interleukin⁃4;Nerve growth factor；Treatment outcome

Lu Jianyun,Email:1010739024@qq.com

2015⁃12⁃10）

（本文编辑：尚淑贤）

鲁建云，Email：1010739024@qq.com

10.3760/cma.j.issn.0412⁃4030.2016.10.016

湖南省自然科学基金（2015JJ6120）；湖南省卫生厅科研基金（B2015⁃034）

Fund programs:Natural Science Foundation of Hunan Province（2015JJ6120）;Scientific Research Program of Department of Health of Hunan Province（B2015⁃034）