2012年至2015年呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析

何静　何丽　张颖　王蕊

2012年至2015年呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析

何静何丽张颖王蕊

目的：分析呼吸道感染患者痰标本中病原菌分布及药物敏感试验结果。方法：选择2012年3月至2015年3月在本院就诊及住院的呼吸道感染患者为研究对象，分离出病原菌标本650株，进行细菌培养、鉴定和药物敏感试验，分析结果。结果：检出650株病原菌中，革兰氏阴性菌325株，占50%，以铜绿假单胞菌、克雷伯氏菌及鲍氏不动杆菌为主要致病菌。青霉素、头孢哌酮及红霉素耐药率分别为98.6%、52.7%及87.2%，对万古霉素及亚胺培南西司他丁钠敏感，耐药率分别为0和3.0%。结论：呼吸道感染以革兰阴性杆菌为主，细菌对青霉素、头孢哌酮及红霉素等传统抗生素耐药率很高，临床医生不可再经验性用药，而要根据药敏试验合理选用抗生素，减少细菌耐药性的产生。

呼吸道感染；病原菌；耐药性

近年来，由临床分离的病原菌鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌所致的医院呼吸道感染呈上升趋势［1］，临床上广谱抗生素的使用率高、疗程长、更换频繁导致细菌耐药性的发生率迅速上升。我国是抗生素滥用和细菌耐药最严重的国家之一［2］，但细菌耐药性具有时间性和地域特点，不同地区、不同时期医院抗生素的使用及其细菌耐药性存在差异［3］。

鉴于此，现对我院2012年至2015年度门诊和住院呼吸系统感染患者病原菌菌群分布及其对抗生素的耐药性进行监测和分析，指导临床合理使用抗生素。

1　材料和方法

1.1标本收集收集2012年3月至2015年3月本院门诊及住院部送检的痰标本、咽拭子标本分离出病原菌标本650株。

1.2细菌培养及鉴定标本采集及细菌培养按照《全国临床检验操作规程》进行。采用法国生物梅里埃公司VITEK-32全自动细菌鉴定、药敏分析仪及配套试剂，革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌分别使用GNI、GPI鉴定卡，真菌使用YBC鉴定卡。

1.3药敏试验采用K-B纸片扩散法。药敏操作与结果按照美国临床实验室标准化研究所（CLSI）2005年出版的标准执行。

1.4质量控制定期用质控菌监测药敏试验，结果均符合美国临床实验室标准化委员会（NationalCommittee forClinical Laboratory Standards，NCCLS）的规定范围。

1.5数据分析全部药敏结果采用世界卫生组织（WHO）推荐的细菌耐药性监测软件WHONET5.4进行统计处理。

2　结果

2.1病原体构成在650株病原菌中，革兰氏阳性菌（G+）208株，占32%，其中最常见菌株为表皮葡萄球菌，其次为金黄色葡萄球菌和肠球菌。革兰氏阴性菌（G-）325株，占50%，最常见的菌株为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、克雷伯氏菌。真菌52株（8%）。支原体65株（10%）。

2.2细菌耐药性本次研究中青霉素对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌耐药性＞98%，但对肠球菌效果好。万古霉素对革兰氏阳性球菌均敏感，耐药率分别为0.0%。头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、亚胺培南对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌较敏感。见表1。革兰氏阴性杆菌对亚胺培南/西司他丁、美罗培南的耐药率最低，其次为头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星，以往对G-疗效较好的三代头孢敏感率下降，青霉素类耐药率＞82%，见表2。真菌的检出率以白色念珠菌为主，对氟康唑和两性霉素的敏感性较高，见表3。

表1　主要革兰氏阳性杆菌对抗生素的耐药率（%）

表2　主要革兰氏阴性杆菌对抗生素的耐药率（%）

表3　真菌对抗菌药物耐药率［株（%）］

3　讨论

本研究结果显示，呼吸道感染的病原菌以G-占优势，分离率为50%，病原菌排序前3位的为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌。革兰氏阳性菌以表皮葡萄球菌最多，这与近年来国内外其他医院报道基本一致［4］。细菌对抗生素产生耐药性主要是通过灭活酶、膜通透性改变以及靶位改变等耐药机理，造成对大多数抗生素耐药。在本研究分离的菌株中占第一位的鲍曼不动杆菌极易经结合方式获得耐药性，对β-内酰胺酶类抗生素产生β-内酰胺酶，具有较高耐药性，常常引起下呼吸道感染。铜绿假单胞菌和克雷伯氏菌也是临床上最常见的呼吸道感染病原菌，且耐药率较高，其耐药机理除了能产生β-内酰胺酶外，还与菌体外膜通透性降低以及菌体蛋白结构和功能变化有关［5］。这三种常见革兰阴性菌对三代头孢类抗生素和β-内酰胺酶类抗生素不敏感，而对亚胺培南/西司他丁、美罗培南的耐药率很低，其次对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的耐药率较低，它们的耐药机制主要是细菌表面形成物理屏障降低了抗生素的渗透性和产生超广谱β-内酰胺酶。

本次调查的革兰氏阳性菌中主要以表皮葡萄球菌为主，其次为金黄色葡萄球菌和肠球菌，葡萄球菌对万古霉素耐药率是0，因此万古霉素可作为表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌感染的首选药物。对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南和阿米卡星耐药率较低。青霉素类和大环内酯类抗菌药物呈高度耐药。葡萄球菌的耐药性是因为mecA基因编码的青霉素结合蛋白PBP2a产生［6］。分析耐药菌株产生的原因可能与广谱抗生素的滥用导致细菌变形有关，也可能与激素的不规范应用有很大关系。真菌的检出率以白色念珠菌为主，主要原因可能是菌群失调，导致真菌的二重感染，对氟康唑和两性霉素保持较高的敏感性。支原体引起的呼吸道感染未做药敏试验。

本研究结果与国内其他地区细菌感染分布及耐药结果相近［7］，可见呼吸道感染以革兰阴性杆菌为主。通过本研究发现引起呼吸道感染的细菌对传统抗生素耐药率很高，这提示临床医生不可再经验性用药，而是要根据药敏试验合理选用抗生素，减少细菌耐药性的产生。同时要求细菌工作者加强与临床医生的沟通和合作，充分发挥细菌学在医学诊断和治疗中的重要作用。

［1］丁雅萍.呼吸道标本鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌的检出及耐药分析［J］.中国卫生检验杂志，2012，22（1）:185-186.

［2］牛小萍.当前细菌抗药性分析［J］.河南外科学杂志，2012，18（2）:73-75.

［3］陈风军.近2年本院临床分离常见耐药菌的耐药监测分析［J］.国际检验医学杂志，2010，31（8）:877-879.

［4］王德，曹玉妍，江婵娣，等.2004-2009年医院感染细菌分布及耐药性变迁［J］.中华医院感染学杂志，2011，21（14）:3056-3058.

［5］夏云，曹何，张晓恒，等.革兰阴性杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药率的变化及用量的关系［J］.临床检验杂志，2010，28（3）:237-238.

［6］刘蔡植.微生物学和微生物学检验［M］.北京:人民卫生出版社，1996:264.

［7］李婧，郭月玲，魏海静.老年患者下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析［J］.中国卫生检验杂志，2011，21（8）:2063-2064.

Distribution and drug resistancemonitoring of pathogen in patientsw ith respiratory tract infections from 2015 to 2012

He Jing1，He Li2，Zhang Ying2，Wang Rui2.1.Department of Laboratory Medicine，Traditional Chinese Medicine Hospital of Lanzhou City，Lanzhou 730050，China；2.Department ofNeurological Rehabilitation，Gansu provincial Corps Hospital ofChinese People's Armed Police Force，Lanhou 730050，China

He Li，E-mail:1295055381@qq.com

Objective:We analyze the distribution and drug sensitivity test resultsof pathogen in sputum samples from patientswith espiratory tract infections.Methods:Patientswith respiratory tract infectionswere selected outpatients and inpatients in the hospital from March 2012 to March 2015，and 650 strains ofpathogen were isolated and entered into bacterial culture dentification and drug sensitive test，esultswasanalysed.Results:65 strainsofpathogen were detected，325 strainswere negative gram bacteria，accounting for 50%.Pseudomonasaeruginosa，klebsiella and baumanniiacinetobacter were themain pathogen.Resistance rate of penicillin，cefoperazone and erythromycin were 98.6%，52.7%and 87.2%respectively.Detected negativegram bacteriawassensitive to vancomycin and imipenem-cilastation sodium. The resistance ratewas 0 and 3.0%，respectively.Conclusions:Themain pathogen in patientswith respiratory tract infection are gram negaive bacteria，and resistance rate of these bacteria to penicillin，cefoperazone，erythromycin and other traditionalantibiotic are high.Clinicians hould notbeempiric，butselectantibiotics reasonablybased on thedrugsensitivity test to reducebacterial resistance.

respiratory tractinfection；pathogen；drug resistance

A

1004-2725（2016）06-0409-03

730050甘肃 兰州，兰州市中医医院检验科（何静）；730050甘肃 兰州，武警甘肃总队医院内一科（何丽、张颖、王蕊）

何丽，E-mail:1295055381@qq.com