98例输血前检查疑难标本的原因分析及解决对策

2016-10-27杨槐波

生物技术世界 2016年3期

关键词：血型亚型试剂

杨槐波

（通辽市中心血站内蒙通辽 028000）

98例输血前检查疑难标本的原因分析及解决对策

杨槐波

（通辽市中心血站内蒙通辽 028000）

输血前需要进行常规的血型血清学检查，而在常规检查中经常会发现各种影响正常定型的因素。本站2013年10月—2015年10月接收了98例医院血库在ABO定型和不规则抗体筛选中出现疑难问题的患者标本，本站血型室通过血型血清学试验查找出产生疑难问题的原因并采取了相应的解决方法，保证了患者正确定型和安全输血。

ABO正反定型吸收放散型物质亚型

1 材料

1.1 样本来源

2013年10月—2015年10月通辽市各医院血库输血前检查疑难血样98例。

1.2 试剂

抗-A标准血清、抗-B标准血清、ABO标准细胞、抗-AB试剂、抗-A1试剂、抗-H试剂、抗-Lea试剂、抗-Leb试剂、三组筛选细胞和十组谱细胞（上海血液生物医药有限责任公司）。

2 方法

2.1 ABO正反定型

正定型：抗-A标准血清和抗-B标准血清与被检细胞分别加入标记好的试管；反定型：Ac、Bc、Oc与被检血清分别加入标记好的试管并做自身对照,分别在4℃、室温和37℃放置5-10分钟,3400r/min离心判读结果,根据正反定型的结果,分析判断产生不符合的原因并根据具体情况,加做抗-A1、抗-AB、抗-H和A1c、A2c。

2.2 对于减弱的和可疑的抗原可进行吸收放散试验和唾液型物质检测

按文献［1］操作。

2.3 Lewis血型

用抗-Lea试剂和抗-Leb试剂判断分泌性和非分泌性,检测结果为Le（a+b-）为非分泌型；Le（a-b+）为分泌型。

2.4 抗体筛查与鉴定

出现Oc有凝集反应、自身对照阴性的标本血清应考虑有ABO系统以外的不规则抗体,应与三组筛选细胞试验,试验结果阳性的再加做十组谱细胞,以阴性排除法确定抗体的特异性。

2.5 ABO亚型的判断方法

按文献［1］标准进行相关的血型血清学试验判断不同的亚型及其分类。

2.6 DTT处理红细胞

可以用DTT处理有自身凝集的红细胞。

2.7 盐水替代法排除缗钱状凝集

3 结果

（1）经过对2013年10月—2015年10月98例输血前检查中出现疑难问题的患者标本进行血型血清学试验,其产生的原因分析见表1。

（2）对各种影响ABO血型定型的原因,我们采用了相应的血型血清学解决方法：

3.1自身冷抗体

出现自身冷抗体干扰的标本,可将血清和红细胞分别在37℃预温5-10分钟,再3400r/min离心判读结果。对于冷凝集素效价较高,红细胞已经凝集的标本,可在56℃10分钟放散细胞至直抗阴性,用此细胞进行正定型。用直抗阴性细胞4℃吸收血清30-60分钟,用此血清进行反定型。此外还可采用DTT处理后的红细胞进行定型。［2］

3.2 抗体减弱

抗体减弱可由下列四种原因引起：年龄（新生儿或老年人）、丙球蛋白过低血症、丙球蛋白缺乏血症及嵌合现象。根据抗体减弱或缺失的不同原因,可通过适当加大抗体量,延长抗原抗体反应时间,降低抗原抗体反应温度等方法解决。

3.3 ABO亚型

出现排除疾病影响的抗原减弱时,应考虑亚型的可能性。常用的ABO亚型定型试剂有抗-A1、抗-AB、抗-H、A1c、A2c。抗-A1用于判断是否存在A1抗原,抗-AB用于检测弱的A抗原和B抗原,特别适用于Ax、Bx亚型的检测,抗-H是因为大部分亚型细胞上有较多的H抗原,与抗-H反应较强。A1c、A2c用于判断A亚型的抗-A1抗体。另外还可以通过吸收放散试验、唾液型物质检测辅助亚型的判断。［3］

34 同种抗体

通过与O细胞、三组筛选细胞和十组谱细胞反应确定同种抗体的存在及特异性。需要注意的是在少数情况下会出现血清与反定A细胞或B细胞反应而与O细胞不反应,这是因为反定细胞上有相应的抗原而O细胞上却没有。［4］

3.5 血浆异常

血浆蛋白浓度异常,球蛋白浓度升高（如多发性骨髓瘤）、原发性巨球蛋白血症、血浆增容剂等会引起缗钱样凝集,如果聚集生成具有钱串样特征的团块,就容易识别,但这种聚集常常是形状不规则而且很像通常的凝集。可采用向试管中滴加1-3滴生理盐水或盐水替代法排除缗钱样假凝集。

3.6 抗原减弱

稀有的A或B等位基因存在时或白血病及其它恶性疾病时可能会引起抗原减弱,用抗-A、抗-A1、抗-AB、抗-H重复试验并在室温及4℃放置30分钟,对阴性结果用显微镜检查,还可通过吸收放散试验、唾液型物质检测；调查患者以前的血型等方法。

3.7 近期输血

对于近期输血的患者应通过毛细管离心方法,获得的患者的自身红细胞,用此细胞进行定型。